スチレンまたはα−メチルスチレンを主体とするビニル重合体成型品の表面にアミノメチル基を導入したものを使用する。血管内皮細胞の培養などに有用である。【産業上の利用分野】本発明は、組織系細胞に作用して有用物質を産生させ得る細胞培養用成型品に関する。その他、分析用試薬などとして広く利用されており、今後さらに幅広い応用が期待される重要な物質である。ケラチン細胞等で代表される組織系細胞はインターフエロン、インターロイキン−1(IL−1)、インターロイキン−6(IL−6)などの有用なサイトカインを産生することでしられている。血管内皮細胞は血管の血液接触部に存在する細胞であるが、組織プラスミノーゲンアクチベータ、プロスタサイクリン、アンジオテンシンII、レニン、IL−1、IL−6などの有用物質を産生することが知られており、生体外での血管内皮細胞の培養は、人口血管の製造のほか、これら有用物質の生産を可能にする意味で、近年、とりわけ注目されている。1589(1988)}。イミユノロジー,142,144(1989)}を加えることによつて、IL−6の産生が促進されることが知られている。これらには、添加するものが高価な蛋白質であつたり、あるいは、構造の複雑な有毒物質であつたりする欠点がある。【発明が解決しようする課題】本発明らは、かかる従来技術の問題点に鑑み、毒性のない低分子化合物を不溶性担体に固定化し、これを血管内皮細胞と接触させることによつて有用なサイトカイン等を産生させられないか検討した結果、動物細胞中に広く分布するN−アセチルノイラミン酸を固定化したものが血管内皮細胞にインターロイキン−6等のサイトカインを産生させることを見出し、本発明に到達した。【課題を解決するための手段】本発明は、以下の(1)〜(6)の技術的手段から構成される。0009】(3)組織系組織系細胞を請求項1記載の細胞培養用成型品と接触させることを特徴とするサイトカインの製造方法。【0010】(4)サイトカインが、インターロイキン−6であることを特徴とする請求項3記載のサイトカインの製造方法。0011】本発明でいう不溶性担体とは、実質上不溶性で、第1級または第2級アミノ基を有し、N−アシルノイラミン酸をアミド結合で固定することのできる担体を意味する。これ等を用いた組み立て品のいずれでもよいが、とりわけ、これ等に光透過性があると細胞の観察が容易にでき、細胞の管理がしやすいので好ましい。【0012】本発明でいう不溶性担体の具体例をあげると、■スチレンまたはα−メチルスチレンの単独重合体もしくはこれらを主成分とする芳香族ビニル系共重合体をシヤーレ、試験管、管、フイルム、びん、注射筒、カテーテルなどに成型したものの表面にアミノメチル基を導入したもの、■スチレン/エチレン・ブチレンのABAブロツクポリマの膜にアミノメチル基を導入したもの、■ポリプロピレン補強ポリスチレン繊維の表面にアミノメチル基を導入したもの、■ポリスチレンまたはスチレン・ジビニルベンゼン共重合体ビーズに、アミノメチル基を芳香核置換基として導入したもの、■アミノプロピル化ガラスビーズなどがあげられるが、これ等に限定されるものではない。これらのなかでも、■と■が光透過性が高く、且つ、取り扱いやすいので、特に、好ましく用いられる。【0013】■の場合、成型品の厚みには特に制限はないが、実用に耐える強度を維持するためには、通常、100ミクロン以上の厚みを持つものが好ましく用いられる。その光透過性に関しては該成型品の底面または側面の反対側に存在する物質の形を確認可能にするに十分な光透過性を有することが望ましい。該成型品の光透過性は主として表面での散乱によつて決まるので、表面が完全に平滑でなければならない。該成型品の場合、500〜700ナノメーターの波長の光に対する吸光度が3以下であることが必要である。この吸光度が小さいほど該成型品の光透過性が良く、吸光度が1以下であればさらに好ましい。【0014】本発明でいうN−アシルノイラミン酸とは、ノイラミン酸のアミノ基をホルミル基、アセチル基、グリコリル基、プロピオニル基、ブチリル基等で代表されるアシル基で置換したものを意味する。アシル基がアセチル基およびグリコリル基であるN−アシルノイラミン酸は動物界に広く存在し、抽出・単離されている。有機合成の手段でも得ることができる。水酸基をカルボン酸エステルにしたものも細胞が分泌する加水分解酵素によつて容易に脱エステル化されるので、同様に用いることができる。製造は、不溶性担体をN−アシルノイラミン酸とカルボジイミドの混合溶液に加えるか、N−ヒドロキシスクシンイミドエステルで代表される活性エステルの溶液中に浸漬することにより容易に達成される。本発明でいうサイトカインとは、組織プラスミノーゲンアクチベータ、プロスタサイクリン、アンジオテンシンII、レニン、IL−1、IL−6等を意味する。ケラチン細胞等が産生する物質で、最初はB細胞分化因子として見出されたが、最近では他にいろいろな作用のあることが知られており、特に血小板に対する造血促進作用があることで注目されている。7(15)(増刊)90−95(1989)}。【0016】血管内皮細胞を本発明の成型品と接触させながら培養すると、血管内皮細胞は活性化されて、実施例に示すような高濃度のIL−6のほか、同様にして組織プラスミノーゲンアクチベータ、プロスタサイクリン、アンジオテンシンII、レニン、IL−1等のサイトカインを高濃度で産生することが確認された。vitroでの白血球増加剤として利用できる。【0018】以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。実施例中の評価方法は、以下に従つた。1.芳香族ビニル系重合体成型品の化学的解析成型品を塩化メチレンでソツクスレー抽出すると不溶性の膜状物が得られるので、これを真空乾燥し、重量を量り、赤外線吸収スペクトル測定等を行つた。FTIR−4300を用いKBr錠剤法で測定した。UV2100を用い、500ナノメーターで板状成型品に垂直方向の吸光度を測定した。従つて、その値が小さいほど成型品の光透過性が高いことになる。学会出版センター)に基づいて、蛍光標識1,2−ジアミノ−4,5−メチレンジオキシベンゼンを反応させ、島津高速液体クロマトグラフイーLC−7Aで定量した。5.サイトカインの定量インターロイキン−6はRアンドDシステムズ社(ミネアポリス、USA)のクウオンテイカイン・ヒト・IL−6・ELISAキツトにより定量した。【実施例1】1−ニトロプロパン500mlと硫酸272mlの混合溶液を0°Cに冷却し、20.4gのN−メチロール−α−クロルアセトアミドを加え、0〜10°Cで溶解した。【0020】この溶液を10°Cに昇温したのち、φ3.5cm×1.2mmHのポリスチレン製培養皿(厚み1mm)に7mlずつ入れ、室温で1hr反応させた。反応液を捨て、培養皿を零下20°Cのメタノールに浸し、さらにメタノーおよび水で洗つた後、真空乾燥して、内部表面だけクロルアセトアミドメチル化された成型品Aを得た。【0021】上記で得た成型品A1個を、塩化メチレンでソツクスレー抽出したところ、薄膜状の不溶物3.1mgが得られた。あるので、反応部の厚みは大体1.2μと考えられる。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、1659cm-1(アミド−I)、1529cm-1(アミド−II)および3297cm-1(N−H)にアミド基の強い吸収が認められたことからその構造を確認した。【0022】上記で得た成型品A40個を、2000mlの10%ジメチルアミノエタノール・ジメチルスルホキサイド溶液中に浸し、室温で18hr静置した後、2000mlの10%ジメチルアミノエタノール水溶液中、70°Cで2hr加熱した。成型品を水洗後、乾燥してアミノメチル化成型品Bを得た。この成型品のA500は0.05であつた。【0023】上記本発明の成型品B1個を、塩化メチレンでソツクスレー抽出したところ、薄膜状の不溶物2.3mgが得られた。この不溶物の赤外線吸収スペクトルでは、成型品Aで認められた1659cm-1(アミド−I)および1529cm-1(アミド−II)の第一級アミド基の強い吸収cm-1が完全に消失していたことからその構造を確認した。【0024】上記本発明の成型品B10個を500mlの水に浸し、N/100−塩酸でpH5〜6に調整した後、成型品Bの内部に0.2mg/mlのN−アセチルノイラミン酸水溶液4mlと1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩8mgを加え、室温で48hr静置した。母液中のN−アセチルノイラミン酸の濃度から0.022mg固定化されたことが確認された。成型品上のN−アセチルノイラミン酸はN/40−NaOHで洗浄しても溶出の無いことを確認した。)で24hr培養した。【0026】比較として、実施例1で得た成型品B、および成型品Bに3−デオキシ−D−マンノ−2−オクチユロソン酸(KDO)を固定したもの(紫外線照射滅菌)および市販の細胞培養用皿MS−1035R(住友ベークライド(株))で同様に培養した。【0027】各培養上清を取つてその中のIL−6を調べたところ、N−アセチルノイラミン酸を固定化した本発明の皿では100pg/皿であつたのに対し、成型品Bでは0pg/皿、KDOを固定化した皿では34pg/皿、MS−1035Rでは15pg/皿であつた。個で、それぞれ5、5、および、6倍に増えていることがわかつた。【0028】この結果から、細胞の増殖支持能は3者でほとんど差がないが、IL−6産生誘導能は本発明の成型品が著しく優れていることがわかる。個と生育阻害が起きていることがわかつた。)で30hr培養した。上清を採取し、2mlのEGM−UVをいれて培養を続けた。培地は2または3日毎に交換した。【0030】各培養上清中のIL−6の濃度を定量したところ、30hr後、3日後、6日後、9日後、12日後、15日後のもので、それぞれ、240,175,215,200,300,260pg/mlとIL−6産生誘導能が持続されることがわかつた。収集に関しては慎重に行っておりますが、もし掲載内容に関し異議がございましたらお問い合わせください、速やかに情報を削除させていただきます。