B-cellへの分化に重要な役割をはたす。寄与することが知られている。B細胞リンパ腫でのNotch-Mastermindシグナル意義は不明であり、Mastermindについては報告すらない。発現と役割について解析することを目的とした。初年度はMastermindを検出するための免疫組織化学の方法の確定、検討する症例データベースの作製、実際の染色を主に行った。blot法および免疫組織化学により検討した。抗体の選定、染色条件の決定を行った。リンパ腫症例におけるMastermind発現の検討:B細胞リンパ腫症例(ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、辺縁帯B細胞リンパ腫)の症例データベースを構築した。症例は全例で300例集積できた。MamL3)あり、いずれも免疫組織化学的に発現検討を行った。ホジキンリンパ腫についてはその亜型での発現の違いがあるかについて検討した。MamLの発現の有無とBcl-6発現との関連を検討した。Mastermindの発現と臨床病理学的特徴の検討を行った。blot法および免疫組織化学により検討した。抗体の選定、染色条件も決定し得た。リンパ腫症例におけるMastermind発現の検討:一部症例で臨床情報が不足しているが、その数は全体症例の数%であり、研究遂行に問題はない。症例の基本情報の解析は終了した。Activity今後は悪性リンパ腫におけるMastermindの役割について検討する。ついて検討、各種マーカー発現の検索を行う。Mastermind発現陽性細胞と陰性細胞のmRNA、タンパクを回収し、RT-PCR、ウエスタンブロットで各種分化マーカーの発現を検討する。Notchシグナルへの影響2)細胞増殖およびアポトーシスへの影響3)マーカー分子発現の変化について検討する。Notchシグナルの反応に違いがあるか検討する。2)Mastermindによる細胞増殖およびアポトーシスに影響については、増殖能はMTTアッセイを用いて、アポトーシスについてはTunnel法を用いて検討する。3)分化マーカーの変化については免疫組織化学、ウエスタンブロットで行う。Funding正常リンパ節からMastermind発現細胞について細胞分離を行うため、磁気ビーズを用いた細胞分離を行う。このため、これら実験に必要な各種試薬を購入する。免疫組織化学的には蛍光顕微鏡を用いて蛋白局在についても検討するが、このための励起光光源を購入予定である。