(6)口腔内カンジダ感染ラットに対するオゾン治療後の舌組織カンジダについては、すでに真菌症のシリーズの中で下記の通り、簡単にご紹介させて頂いています。(2)カンジダ症またオゾンについては、このサイトで2018年12月末現在も継続掲載中の「オゾンのシリーズ」でも取り上げ、概要をご説明させて頂いています。そこで今回から、人為的(実験的)にラットの口腔内に感染させたカンジダ症の治療にオゾンによる治療を試みた下記の報告をご紹介させて頂きます。57–60.背景カンジダ菌は健康人の約30〜40%の口腔内に存在するとされています。カンジダの日和見(ひよりみ)感染は、免疫不全患者における口腔及び食道における感染症の主な原因菌で、ヒト免疫不全ウイルス感染やAIDS患者の90%で感染しているとする報告もあります。infection)とは健康なヒト及び動物では感染症を起こさないような感染力の弱い病原体が原因で発症する感染症を意味します。その感染対象は、臓器移植を受けた後や自己免疫疾患で免疫抑制剤を使っている患者さんなどの免疫不全状態の患者さんです。免疫不全患者におけるカンジダ症は、免疫担当細胞であるT細胞機能を欠く患者において、貪食機能が損なわれていることから、深刻な皮膚粘膜感染症を引き起こします。貪食細胞は、免疫機構がなくても真菌の感染から宿主を保護すると考えられますが、貪食後の情報伝達が免疫細胞であるT細胞に伝えられないことから、免疫機構による生体防御機能としては、不十分である事が指摘されています。高齢化に伴い、唾液分泌量の減少を含む糖尿病、抗生剤あるいは免疫抑制剤の長期使用、および口腔内衛生管理の低下からもカンジダの感染は増えます。抗真菌剤としてのアムホテリシンやナイスタチンを含むポリエン系抗生物質(二重結合が沢山ある抗生剤)は、長い間、真菌感染の唯一の治療選択肢であったが、耐性菌が増え、代替治療薬の必要に迫られています。他方、オゾンは3つの酸素原子で構成された天然の気体分子で、オゾンが接触するあらゆる汚染物質と結合し、酸化分解します。そこでオゾンを治療に利用する場合、ガスまたは水溶液、あるいは油にオゾンを溶解し、利用するなどの検討が重ねられて来ました。その目的は、オゾンによる治療をさまざまな疾患で幅広く応用するための検討にあります。今回の研究目的は、実験的経口内カンジダ感染に対するオゾン療法の有効性を評価するために、免疫機能障害および口腔内の安定した微生物集団の実験モデルを開発することです。・・・免疫抑制剤と抗生物質で除菌後にカンジダを経口及び経粘膜投与して感染させる体重150-200gmの60匹のラットに与える飲料水中に免疫抑制剤であるデキサメタゾン(0.5mg/L)を混ぜて、ラットに継続的な免疫抑制を誘導した。免疫抑制剤の影響で常在菌による発症を抑制するために、カンジダを感染させる7日前に、抗生剤・テトラサイクリンの0.1%水溶液をラットに投与し、ラットに常在する感染菌を除菌した。ml)0.2mlをラットの口腔内に滴下した。その後、懸濁液に浸した綿棒で舌背部にカンジダ懸濁液を広く感染させた。(舌背部を示す画像はこちらを参照して下さい)カンジダ接種後、少なくとも1時間はラットに水を与えず、この感染手順を3日間連続して繰り返した。カンジダ感染の確認は、接種6日後に接種した口腔内を滅菌綿棒で拭き取り、寒天培地でカンジダを培養して評価した。オゾン濃度は、国際オゾン協会が推奨する254nmのUV分光光度計を用いて測定した。Lとして表される)の積で現した。オゾン治療実験ラットに上の「方法1」で誘導した免疫抑制後、ラットは次の4群に分けた。I群:ラットには免疫要請したまま保持した(免疫抑制したが、オゾン治療しなかった対照群ラット)。グループII群:ラットの舌背部表面に「方法1」で示したカンジダを口腔内に接種した。グループIII群:ラットにカンジダを経口感染させ、日常的にマイコスタチンと言う治療薬を使用した。・・・・マイコスタチンは、広範囲のカンジダに有効な治療薬で、ナイスタチン(上記「背景」でも紹介した)とも言います。・・・オゾン治療群でが、何故か口腔内ではなく腹腔に投与しています。ために舌の組織を採取し、組織染色した。上記「方法3」で示したグループ分けしたラットにカンジダを経口感染2週間後、ラット舌組織のHE染色とCD3(T細胞受容体をもつリンパ球)マーカーを染色した。この「結果1」では、HE染色の結果についてのみご紹介させて頂きます。「方法3」の通りにグループ分けしたラットは、下の顕微鏡写真のA~Dに示し、次のような染色結果が見られた。・・・ここで述べる「I群~IV群」は、上の「方法3」で述べた4つの実験群を示します。(A)I群の免疫抑制しただけの舌の組織写真では、層状の扁平上皮を有するピンク色の舌粘膜が舌の表面を覆っている事を示しています。その下の少し濃く染まっている部分が粘膜固有層で、そのさらに内側(下部)が粘膜筋板で細胞が集まって紫色の点として観察されます(紫色は細胞の核です)。下の白っぽくなっている当たりが舌の腺組織と思われます。(B)II群は、カンジダ経口感染群で、(A)で見られた舌粘膜が損なわれ、最表面は粘膜固有層がむき出しになっています。カンジダの感染に伴い、粘膜下固有層には(細胞の核を示す小さな濃い紫色に染まった)炎症細胞の浸潤が見られます。舌の腺細胞二層等する部分は萎縮が見られ、乱れた粘膜固有層と粘膜筋板及び舌の腺組織の境目が不明瞭になっています。(小さな濃い紫色は、炎症細胞の核が染色されていることを示す事から、表層の炎症に対してリンパ球が集まってきたと考えられます。・・・・・(A)の写真に比べ、粘膜上皮組織が無くなっており、粘膜下固有層が露出しています。)(C)III群は、カンジダの口腔内感染とカンジダに対する抗菌薬(マイコスタチン)を使用したグループ群です。舌の粘膜上皮が萎縮し、小さな紫色に染まった炎症細胞が粘膜固有層から粘膜上皮付近の表層まで見られる事から、カンジダの感染により炎症細胞が浸潤している事を示しています。(D)IV群は、カンジダの経口接種群にオゾン治療したラットのグループです。炎症細胞はより多く粘膜固有層に集まり、舌の腺組織内には拡張血管も認められ、炎症を食い止めているかのように見えています。<参考として、「舌」の正常組織図を示します>左の図は、「WeSapiens」のサイトから「舌」を検索して得られた組織画像です。舌の正常組織を現しており、組織構造別に色分けしてあります。左の図には示されていませんが、黄色の粘膜固有層の内側(深層)とピンク色の筋層の間には、粘膜筋板と粘膜下層があります。その内側のピンクが舌の筋層です。<まとめ>写真(A)の対照群に比べ、カンジダを経口感染させた(B)群の舌組織は、大きく正常な構造が損なわれています。粘膜上皮は破壊されており、治療が効果的であるようには見えません。粘膜上皮組織は保持されており、粘膜固有層と舌腺組織構造の境界はより鮮明に保たれ、オゾン療法が舌組織構造の構造をより正常に近い状態で保持させているかのように見えます。以上のように、一応まとめられますが、「カンジダを口腔に感染させたにも関わらず、オゾン水の腹腔投与で効果が見られたという点は、個人的引っかかります。・・・言い換えますと腹腔に投与したオゾンが口腔内のカンジダに効果があったという点は、オゾンが腹腔からどう口腔に移行したのでしょうか?投稿ナビゲーションコメントは受け付けていません。