T細胞の作製・培養がんを標的とする遺伝子改変T細胞(Tリンパ球)を用いたがん治療法は、従来法では治療が困難ながんにも有望なアプローチとして近年注目されています。vitroで増殖させた後、患者に投与されます。これまでに行われた遺伝子改変T細胞を用いた多くの臨床試験において、タカラバイオのRetroNectinが使用されています(参考文献はこちら)。ここでは、遺伝子改変T細胞の作製・培養のワークフローにおいて、使用実績のある製品をご紹介します。行った結果、PBS使用時の1.3倍の細胞が回収でき(パネルA)、CD3、CD4、CD8、CD14、CD15、CD19抗原陽性細胞の回収率も増加した(パネルB)。CD14陽性細胞(単球)で高い回収率の向上(★)が認められた。単球は白血球の中でも接着性の高い細胞であることから、通常の回収方法では回収ロスが多く、CELLOTIONを使用することで顕著に回収率が向上したと考えられる。Kitイルミナ社次世代シーケンサー(NGS、MiSeq推奨)用ライブラリー調製キットマルチプレックスPCRに依らず、ヒトTCRmRNAの完全長V(D)Jのシーケンスが可能シングルセル解析のため、TCRα鎖、β鎖のペアリング情報を取得可能96個のシングルセルに8種類のインデックスを付加後プール。Carbonateとして米国FDAのドラッグマスターファイルに登録準備中です。RetroNectinを用いたリンパ球拡大培養を研究目的以外で実施する場合には、個別に弊社とのライセンス契約の締結が必要です。末梢血単核球への遺伝子導入ヒト末梢血単核球(PBMC)にZsGreen1を発現するレンチウイルスベクターをポリブレン法とReroNectin法で導入した。その結果、ポリブレン法では10倍希釈したレンチウイルスで32.5%の陽性率を示したが、RetroNectinを用いたRBV-Spin法では10倍希釈したウイルスを使用した場合で63.2%もの高い陽性率を示し、また90倍希釈したウイルスを用いても42.7%の高い陽性率が得られた。mAbとRetroNectin(RN)の共刺激下で4日間培養後、リンパ球培養用培地で適宜希釈しながら、さらに10日間培養を行った。CCR7+陽性細胞比率)の上昇がみられた。serum)無添加の条件で10日間培養を行った。CD45RA+)が高いことが確認できた。gradeは、STEM-CELLBANKERとして原薬等登録原簿(マスターファイル)に登録されています。