様々な実験系を用いて細胞周期について研究を行っている。(M期)開始因子であるMPFはプロテインキナーゼ活性を持ち、その活性化には、触媒サブユニットであるCdc2のTyr15における脱リン酸化とThr161におけるリン酸化とが必要である。電気泳動上の易動度の差異から、Cdc2には、これ以外にも翻訳後修飾を受ける部位が存在することが推測されている。これらの未知の修飾の機構とMPF活性に対する影響を解明するため、二次元電気泳動とプロテインキナーゼ活性測定による解析を進めている。DNA複製開始制御機構の解析DNA複製開始に先立ち、細胞周期のG1期において、Cdc6、Cdt1、Mcm、GINS、Cdc45などの多くの因子が複製開始点に結合する。現在、McmとCdc45との相互作用について、遺伝学的及び生化学的に解析を行っている。明らかにしたCdc45の機能に必須な部位が、Mcmとの相互作用にどのように関与するかの解析も行っている。卵の生存を維持する分子機構の解析アフリカツメガエル卵抽出液をモデル系として、アポトーシス開始を制御するBcl-2ファミリー蛋白質の機能解析を進めている。卵抽出液にはxBid/xMcl-1に加えてxBcl-xL/xBax/xBakが発現していることを見出した。xBcl-xL及びxBakはミトコンドリアに局在するのに対して、xBaxは細胞質に局在し、カスパーゼ活性依存的に一部がミトコンドリアへ移行することを明らかにした。高等真核生物におけるチェックポイント機構の解析DNA複製の異常やDNA損傷を感知して細胞周期の進行を一時的に停止させるチェックポイント機構を、培養細胞を使って解析している。ヒトのNdr1プロテインキナーゼは細胞周期、DNA複製の阻害、UV照射などでリン酸化状態が変化することから、この機構への関与が推測され、Ndr1のキナーゼ活性がチェックポイント機構に必要である可能性が示唆された。siRNAでNdr1の発現を抑えたときγH2AXが増加したことから、S期に自然発生的に生じるDNAの二重鎖切断(DSB)の修復のためのシグナル伝達系にNdr1が関与している可能性が考えられた。このsiRNAはNdr1に特異的であって、Ndr2の発現には変化は認められなかった。siRNAによってγH2AXの強いシグナルが認められた。siRNA処理した細胞では、無処理の細胞に比べてp53の発現レベルの上昇が認められ、リン酸化型p53も増加していると考えられた。siRNAの発現で、細胞周期の変化も認められた。これらの結果をふまえて、Ndr1がDNA損傷の修復系の因子と複合体を形成している可能性を検討している。解明ほ乳類受精卵(Zygote)において、染色体複製の開始はその後の胚発生の進行に必須である。これまでにマウス卵母細胞において卵成熟中にOrc6(染色体開始複合体(ORC)の構成因子)やDbf4(S期キナーゼ、Cdc7の調節サブユニット)の蛋白質発現が染色体複製に必須であることを明らかにしてきた。現在、これらの因子の作用機序と染色体複製のさらなる詳細な分子機構、あるいは染色体の空間的構造変化への作用について研究を推進している。複製開始因子Cdt1の解析Cdt1は、pre-RCと呼ばれるDNA複製開始に必要な蛋白質複合体の形成に関わる因子として知られている蛋白質である。細胞内でCdt1を人工的に過剰発現させると、S期においてDNAの重複製が生じることが知られている。このことからCdt1は細胞周期のS期の開始と共役し、一回の細胞周期において染色体の複製を一回のみに制御する機構(ライセンス化制御)に関わる蛋白質であることが推定されている。Cdt1には、pre-RC蛋白質複合体に含まれるいくつかの蛋白質と結合するという報告もあり、我々は細胞周期においてCdt1の制御を行う蛋白質の同定を進めている。