(2,3-Diaminonaphthalene)の反応を利用して、試料中のNOを蛍光法で間接的に測定するキットである。一酸化窒素(NO)は情報伝達物質として多くの生理的現象に関与しているため、NOに関する研究が盛んに行われている。NOはN2O3あるいはN2O4となり水中で加水分解され最終的にNO2-とNO3-になるため、NO2-と同時にNO3-も測定する必要がある。本キットは還元酵素を含み、NO3-をNO2-に還元できるのでNO2-とNO3-両方の濃度測定が可能である。濃度領域に適している。nm使用方法は、プロトコルをご覧下さい。違いは何ですか?A主な違いは以下の通りです。詳細は製品情報をご確認下さい。1.検出方法Kit-CIIは吸光度測定、Kit-FXは蛍光測定です。それぞれ対応したマイクロプレートリーダー等をご利用下さい。NO2-/NO3-濃度の測定に適しています。3.阻害物質フェノールレッドを含む培地は、Kit-CIIでは使用可能ですが、Kit-FXでは使用できません。Qサンプルの前処理方法を教えて下さい。A<血清>除蛋白が必要です。測定試料として下さい。トリクロロ酢酸を用いた除タンパクでも結構です。酸で除タンパクした場合は、測定前に必ずpHを中性に戻してから使用して下さい。酵素反応が阻害をうける可能性があります。<尿>除蛋白が必要です。血清の除蛋白操作を参考に、除蛋白操作を行って下さい。室温)し、上澄みをサンプルとして下さい。血清を添加している場合は、除蛋白を行って下さい。血清のタンパク成分の影響で、NO2-/NO3-濃度が低く出る可能性があります。Millipore社)などで除タンパクして測定試料としてください。4616-4621.Q金属による測定への影響A金属によっては影響します。蛍光強度の減少が見られます。金属に対して等量か過剰のEDTAを加えることで影響を回避することができます。まで影響が見られません。Q使用できない培地は何でしょう?A硝酸塩が多く含まれる培地は使用出来ません(RPMI1640など)その他、フェノールレッド、出来れば血清も、含まない培地をご使用ください。*注:[NO2-]のみの測定であれば可能ですが、[NO2-/NO3-]のトータルの濃度測定は出来ません。NO2/NO3濃度の測定に適しています。添加されていますので、測定限界をはるかに超えています。代表的な培地ですと『MEM』大部分の種類のものが硝酸を含んでおりませんので、硝酸を含んでいないものをお使いください。1640は除きますが)、やむを得ず硝酸を含んだものをお使いになり、その影響が気になる場合は、サンプルに含まれる量と同量の培地のみで測定してブランクとして差し引いてください。培地のカタログに組成表が記載してありますので、測定前にご確認ください。solution]を添加しますが、これはアルカリ性溶液になっています。solution]を添加後、培地が黒くなり蛍光が測定できません。<血清>血清の中には元々、NO2/NO3が含まれております。そのため、血清を含む培地の場合には、培地を緩衝液で『希釈』していただく必要が生じます。Q試料を、前処理前に保存することはできますか?A-20°Cで保管していただければ、保存は可能です。-20°Cで保管した血清は、凍結前と2ヶ月間凍結した後で、データに差がないことを確認しております。試料中にNOxを分解するような物質(微生物など)が含まれると安定性が確保できませんので、ご注意下さい。1640など)中では、測定ができません。詳しくは「使用できない培地は何でしょう?」のQ&Aをご参照下さい。Mgなど)が入っていると測定に影響が出ます。試料は前処理の段階で、除タンパク操作を行って下さい。金属はキレート剤(EDTAなど)を加えることで影響を回避できます。Center皆さまの実験を失敗させないために技術的なお困りごとや、ご相談・ご要望などお気軽にご相談ください。当社は、皆さまの実験が早く成功できるよう技術者が一緒に考える体制を整えております。9:00-17:00(土・日・祝日を除く)※フリーコールがつながらない場合はこちらをご利用ください。