ABCA1はコレステロールを細胞外へ排出する活性と、細胞膜中でフロップする活性の2つの異なる活性を何らかの機構でスイッチしていると考えられる。その機構の解明は今後の研究において重要である。これらの研究から、コレステロールの生理的役割がこれまでの常識を大きく超え「細胞膜内シグナル分子」として機能していることがわかってきた。本研究によって、細胞生物学の常識を大きく塗り替えると期待できる。ABCA1のAFM観察の実現のために、基板上に脂質二重膜を形成する条件の大幅な改善に成功した。ABC蛋白質をノックアウトしたメダカに、表現型の変化が表れてきた。今後の展開が期待できる。Activity31年度は、ABCA1によるHDL産生反応の初速を解析することによって、HDL産生が細胞内コレステロール濃度に依存していることを示し、それによってABCA1がコレステロールを直接輸送していることを証明する。輸送したコレステロールを細胞外ドメインに溜め込んだABCA1を高速AFMによって観察するため、脂質二重膜をAFM観察基板に形成させ、精製したABCA1の活性を保ったまま基板上の脂質二重膜に再構成する条件を確立する。クライオ電子顕微鏡を用いたABCA1の構造解析の条件も確立しつつある。31年度に本格的な観察を開始する。結晶化条件のスクリーニングも順調に進展しており、すでに微結晶が観察できている。メダカのABCA1、ABCA7、ABCA13オーソログのノックアウトにも成功しており、本年度は生理的影響の観察を本格的に行う。