本発明は、がん診断におけるHE染色標本に代わるあるいはそれを補助する、新たな組織サンプルにおけるがんのイメージング法を提供することを目的とする。本発明はまた、生体外での生体由来組織片を生きた状態に維持する方法を提供することを目的とする。生体から採取した組織片を、29~33°Cの温度にて少なくとも30分以上処理し、その後、35.5~37.5°Cの温度にすることにより、組織の生理機能が正常な状態に維持できる方法が提供される。概要がんを精度よく検出することは、その発見や治療のために重要である。通例、がん組織は一様な性質を示す細胞の集合ではなく、様々な形態的あるいは機能的な特徴、分化の程度を示す細胞の集合である。正常細胞の中に混在して存在する場合もある。そこで、がん診断では、診断を確定するために生検標本の病理診断を行い、細胞レベルで異常細胞の評価を行うことが必要となる。Negative、偽陰性)と診断される可能性が存在する。内科診断時に組織を取り出す生検を行なう場合、このような偽陰性の診断がなされてしまい、その後に病状が進行してしまってから初めて気づく危険性をいかに小さくするかが課題となっている。同様の問題は、手術後の再発の有無の評価においても大きな課題となっている。消化管がんでは、一般に消化管内腔の組織表層(粘膜層)にある上皮細胞に最初に異常が発生する。経過観察の結果、もしも組織深く、すなわち粘膜下層から更に深い筋層においても異常細胞がみられるようになると、転移の可能性が増大する。転移すると根治が難しくなるため、こうした事態となる前に「組織表層の病変の性質と範囲」を正確に判定することが求められている。組織学的に異常細胞を判定する場合、内視鏡などを用いて消化管内腔表面を観察して病変部と思われる部位の一部を採取する(生検)。生検組織はホルマリン等で固定した後に厚さ5ミクロン程度にまで薄切し、多数の標本(プレパラート)を作製、色素等で組織染色を行う。異常の様相、等の形態学的特徴に注目して、正常であるか、あるいはがんやがんに移行する可能性が疑われる異常を示しているか診断する。がんの病理診断は、長年の経験を積んだ病理医が主観に基づいて下すものであることから、がんとアデノーマ(良性腫瘍)との境界状態にあるような組織や、核形態だけでは判断できないような場合等において、病理医により意見が分かれることも少なくない。表層に留まる早期の病変の判定基準は、欧米と日本で異なるなどの問題も指摘されている。実際、早期の病変であればあるほど、「がんとなる恐れのある病変」と、「がんとなる恐れのない病変」の線引きは難しい。そこで、臨床サイドからはこうした主観的側面をもつ現在の病理診断に代わり得る客観的な尺度、あるいは経験に乏しい医師であっても判断できるような明確な指標が求められている。高齢化し絶対数の不足する病理医のサイドからは、日々蓄積する膨大なヘマトキシリンーエオシン染色(HE染色)標本の中から、「ここをよく見てほしい」と指し示すガイドとなるような指標、あるいはHEによる診断を補うような指標がほしいという要望がある。現在の病理診断のもう一つの問題として、上記した異常判定が、固定後死んだ細胞を対象とするため、専ら「形態学的な異常」の判定に留まり、細胞の「機能的な異常」を見ていないという点がある。正常な細胞組織構築を示す領域の細胞が、機能的に正常であるか否かは、通常の病理組織学的検査ではわからない。病理学者が形態的に正常と判断しても、既に細胞は感染して機能的異常が開始しているような場合、形態的に異常が明らかになるまで待っていては治療が後手に回ってしまう可能性もある。このような細胞の「機能的な異常」を見るためには、生検鉗子等で体外に摘出した不定形のがん組織を生かした状態に保つことが必要である。HE染色標本以外のがんの検出手段として、D-グルコースに緑色の蛍光基NBDを結合した2-NBDGを用いたイメージングが報告されている。がん組織の生検もしくは手術時摘出標本に2-NBDGを用いた例として、口腔がん(非特許文献1)、乳がん(非特許文献2)およびバレット食道がん(非特許文献3)の例が報告されている。程度の差はあるとはいえ、2-NBDGは非がん細胞にも取り込まれて非がん細胞をイメージングしてしまう。生検鉗子等で体外に摘出した不定形のがん組織を生かした状態に保ち、蛍光グルコース誘導体を投与して、細胞内への取り込みの様子を連続的に蛍光観察する技術は確立されておらず、これらの報告は再現性や技術的信頼性に乏しいと言わざるを得ない。従って、これらの技術も、上記の問題や要望に応えるものとはなっていない。本発明者らは、L-グルコースを緑色の蛍光基NBDで標識した蛍光L-グルコース誘導体(2-NBDLG)を開発した(特許文献1)。がん細胞内への2-NBDLGの特異的な取り込みによりがん細胞を検出する方法を報告している(特許文献2)。本発明は、生体由来組織片を用いたがんの検出方法に関する。本発明はまた、生体外での生体由来組織片中の細胞を生きた状態で維持する方法に関する。工程aが、生体から採取した組織片を、約0°Cに冷却した後、29~33°Cの温度にて少なくとも30分以上処理する工程である、請求項1または2に記載の方法。工程aが、生体から採取した組織片を、約0°Cに冷却した後、29~33°Cの温度にて少なくとも30分以上処理する工程である、請求項5に記載の方法。請求項1~8に記載の方法。細胞内のL-グルコース誘導体の検出を行った後に、さらに組織片から病理標本を作製して病理標本に基づくがんの検出を行う、請求項1~9のいずれか一つに記載の方法。前記L-グルコース誘導体の検出が寒天中に固定された組織片を用いて行う、請求項10に記載の方法。ライセンスをご希望の方、特許の内容に興味を持たれた方は、下記「問合せ先」まで直接お問い合わせください。同じキーワードでJ-STORE内を検索することが出来ます。