Japanese)細胞への遺伝子導入技術として、ポリエチレンイミンなどのポリマーをナノキャリアとして使用した技術が知られている。このようなナノキャリアとDNAとの複合体を形成させた後に、細胞へ投与することによって、DNA単独で細胞へ投与した場合と比較して、高い効率で遺伝子が導入され発現する。このようなナノキャリアにおいて、遺伝子の導入と発現の効率を上昇させるために、新しいナノキャリアとなる化合物が探索されてきた(特許文献1、特許文献2)。新しいナノキャリアとなる化合物は、細胞毒性の点においても良好であることが求められている。細胞の凍結保存技術として、凍結保存剤を添加した凍結保存技術が知られている(特許文献3)。Japanese)本発明は、遺伝子導入された細胞の製造方法、及び遺伝子導入に好適なポリエチレンイミンの置換体ポリマーに関する。凍結した細胞を、解凍する工程、を含む、遺伝子導入された細胞を製造する方法。核酸と、カチオン性ポリマー又はカチオン性脂質とを、溶液中で混合することによって複合体を形成する工程、によって形成された複合体である、請求項1に記載の方法。核酸が、遺伝子導入される遺伝子を含む核酸である、請求項1~2のいずれかに記載の方法。核酸とカチオン性ポリマー又はカチオン性脂質との複合体を、細胞が分散した培地中へ添加して、培地中で細胞と接触可能にする工程である、請求項1~3のいずれかに記載の方法。【請求項5】カチオン性ポリマーが、ポリエチレンイミン、ポリリジン、ポリオルニチン、ポリアリルアミン、及びこれらの修飾ポリマーからなる群から選択された1種以上のカチオン性ポリマーである、請求項1~4のいずれかに記載の方法。【請求項6】ポリエチレンイミンが、直鎖型ポリエチレンイミンまたは分岐型ポリエチレンイミンである、請求項5に記載の方法。-NH-CO-CH(CH2-COOH)R11(ただし、R11基は、水素、又はC1~C6のアルキル基である)を有する、ポリエチレンイミン置換体ポリマーである、請求項5~6のいずれかに記載の方法。-NH-CO-CH(CH2-COOH)R21(ただし、R21基は、水素、又はC1~C6のアルキル基であり、R11基とは異なる基である)を有する、ポリエチレンイミン置換体ポリマーである、請求項5~6のいずれかに記載の方法。培地が、凍結保護剤を含む培地である、請求項1~8のいずれかに記載の方法。ポリオール類、及び糖類からなる群から選択された凍結保護剤である、請求項9に記載の方法。請求項1~10のいずれかに記載の方法によって製造された遺伝子導入細胞の遺伝子を発現させて、遺伝子産物を製造する方法。-NH-CO-CH(CH2-COOH)R21(ただし、R21基は、水素、又はC1~C6のアルキル基であり、R11基とは異なる基である)を有する、ポリエチレンイミン置換体ポリマー。【請求項13】R11基が、水素、又はC1~C2のアルキル基であり、R21基が、C3~C5のアルキル基である、請求項12に記載のポリエチレンイミン置換体ポリマー。【請求項14】R11基が、水素であり、R21基が、ブチル基である、請求項12に記載のポリエチレンイミン置換体ポリマー。置換前のアミノ基のモル数を100とした場合のR2基のモル数の比率が、10~30の範囲にある、請求項12~14のいずれかに記載のポリエチレンイミン置換体ポリマー。