CRISPR/Casシステムが宿主遺伝子の転写調節に関与することを示唆するデータを得た。Cas12aによるR-ループ形成が、負のDNA超らせんのトポロジーで亢進することを見出した。トポロジーに依存するR-ループ形成を介して、DNAまたはニックの入った環状DNAの切断よりも50倍以上速いことを見出した。(<1%)、CRISPRシステムが誘導するDNA損傷と一細胞クローニングの繰り返しを含む最適とは言えない実験条件の影響を受けやすいことから、CRISPR技術を介してiPSCsから疾患モデルを構築することは簡単ではなく、また、通常の研究室の限度を超える経費を必要とする。Edinburghの研究グループは今回、iPSCsの機能には干渉しない膜表面タンパク質CD46の細胞外ドメインをHiBitタグで標識しておくことで、目的とする改変が起きたiPSCsをシーケンシングをすることなく、短時間で選別可能なことを示した。2019-02-23.遺伝子ドライブの場合、通常のCRISPR/Cas9遺伝子編集と異なり、Cas9が宿主ゲノムに埋め込まれていることから、宿主ゲノム内のCas9配列を増幅・検出することで、遺伝子ドライブで改変された個体を識別可能になる。Researchなどのオランダの研究チームは、PCRよりも選択性が高く、安く、高速で、等温反応であるLAMP法と、バッテリー駆動で温度調節が可能なArduinoシステムによって、CRSIPR-Cas9遺伝子ドライブのエレメントを帯びた個体の識別を実現した。reactionに由来する。polymerase)、Cas9nの切断標的配列を帯びたプライマー1セットで構成され、プライミング、伸張、ニッキングおよび鎖置換反応のサイクルを繰り返すことで、DNAを多段複製する。(検出限界ゼプトモル)、1塩基の差異を判別可能である。オフターゲット作用を実証した。Apoeノックアウトラットは脂質異常と大動脈病変を呈するなど、アテローム性動脈硬化症の発症機構と早期の進行を研究するモデルとしてマウスモデルより優れていることが示した。(ALD4)の三種類の遺伝子単独および2遺伝子と3遺伝子のあらゆる組み合わせのノックアウトを試行し、80-100%の効率を達成し、最適条件で、エタノールの生産性を野生型の1.41倍にまで向上。2019-02-21.酵母ゲノムにはノックインの標的になりえるδ配列が多数散在している。CRISPR-Cas)プラットフォームを開発し、マーカレスかつこれまでにない高い効率でマルチコピーの大型の生合成パスウエイを酵母に組み込むプロトコルを確立した。2019-02-22.ワクチン療法はこれまで病原体由来の抗原が基本であり、個人によって量や機能が大きく変動する抗体は注目されてこなかった。BCR)の重鎖と軽鎖の遺伝子座の可変領域を、有効なモノクローナル抗体の一定の組み換え配列で置換することができれば、養子細胞移植による療法が実現する。CRISPR/Cas9とsgRNAのRNPをエレクトロポレーションすることで、モデル遺伝子座のCXCR4における編集を、T7E1アッセイ、フローサイトメトリーおよびTIDE解析により、標的遺伝子座の編集を確認した。HRによる挿入をシーケンシング、PCRおよび制限酵素消化により確認した。最適化を経てBCRの可変領域でのHRを介した内在BCRプロモータによる外来遺伝子発現を実現した。2019-02-26.AMPsは小型、主として陽イオン性、通常両親媒性のペプチドであり植物と動物の自然免疫に貢献する宿主ゲノムにコードされた'抗生物質'である。vivoでの機能同定はほとんど為されていない。MetchnikowinおよびDefensin)を単独あるいは種々の組み合わせでノックアウトし、また、全てのAPMsをノックアウトし、その抗菌性を検証した。ショウジョウバエのAMPsは主としてグラム陰性菌と菌類に対して抗菌性を発揮し、相加的または相乗的に作用する。AMPsはまた特定のバクテリアや菌類に対して選択的な抗菌性を示す。GI)の同定実験のほとんどが、コストと時間の問題から単一の環境での実験に限られていた。(同図gRNA2)を形質転換し、二重CRISPRi株を生成する。具体的には、5種類の環境条件における~7,700組のペアワイズ相互作用にわたる~17,000株のフィットネスを評価し、最適培養条件でみられるGIsの~3倍におよぶGIsを同定した。