(NOA)の治療法の可能性を示した。vitroで増殖し、KitwvサイトのC-to-T点変異をCRISPR-Cas9とドナーDNAを介して修復し、修復に成功したSSCsを分離・増殖、残していた精巣に移植した結果、完全な精子形成が実現した。tabacumとブドウ細胞でその性能を実証した。nEGFPは、EGFPイタの5'末端"ATG"開始コドン直下にsgRNAとPAMを挿入し、プロモーター(35S)に連結した構成である。(NOS)-Atu8g-sgRNASを導入した場合を比較し、前者では蛍光が発生せず、後者で蛍光が発生することを確認した。蛍光を示した細胞の90%以上が変異細胞であることを確認した。nEGFPの導入がCas9とsgRNAの活性を損なわず、また、細胞を障害しないことも確認した。6の分子機構モデル図参照)。[2019-08-31時点では非公開])。3段構えの阻害AcrV4は、LbCas12a-crRNA複合体が標的dsDNAに結合前に、crRNAの標的dsDNAへの結合を不可能とするコンフォメーションに固定する。AcrV4は、LbCas12a-crRNAがdsDNAに結合しR-ループが形成された状態でこの複合体に結合し、LbCas12aがdsDNAを切断する前にdsDNAを複合体から遊離させる。(酵素リサイクリングを阻害する)。塩基対合を立体障害する。AcrIIA2およびAcrIIA4は、dsDNAの構造を模倣して、dsDNAのエフェクタ複合体への結合を阻害する。(スペーサ)の3’末端切断により障害する。AcrVA5は、Cas12aのPIドメインをアセチル化することで、dsDNA結合を立体障害する。(Acr)タンパク質を発現することで宿主のCRISPR-Casシステムを阻害し宿主細胞内で生存する。(HTH)モチーフを帯びたタンパク質をコードする保存性の高いanti-CRISPR-associated(aca)遺伝子に隣接している。このことから、aca遺伝子は、ゲノム配列からのacr遺伝子探索の手がかりとして利用されている。(Cell論文は2019-07-25に受理)。ファージは宿主細胞に侵入すると同時に、cr遺伝子のプロモーターによってacr遺伝子の転写が急速に進み、Acrタンパク質が宿主細胞内に蓄積され宿主のCRISPR免疫応答に対抗するが、一方で、ファージ自身を破壊する。一方で、anti-CRISPRオペロンにコードされているaca遺伝子からのAcaタンパク質が、acr遺伝子のプロモーターに作用しacr遺伝子の転写を抑制することを同定した。Acaが欠損していると、aca遺伝子の下流に位置している遺伝子の転写プロファイルが改変され、ファージの形態形成が損なわれることで、ファージの生存が脅かされるに至る分子機序が示唆された。Acaがanti-anti-CRISPRとしてacr遺伝子の転写を抑制することが、CRISPR-Casシステムの有無とは独立に、ファージの生存に必須であることが示唆された。falciparumが侵入し、分化することを見出した。falciparumの侵入にベイシジンの細胞質内ドメインが必須であり、シクロフィリンBが必須ではないことを同定し、BEL-Aからはじまるこの実験系が、マラリア原虫感染機構の解明に有用であることを示した。