2017年10月15日(日)こんにちは。紹介いたします!!植物バイオコースの先輩たちが、昨年タバコの葉にウイルス(CMV【キュウリモザイクウイルス】)を接種いたしました。今回の実習では、接種タバコの葉にCMVがちゃんと感染しているかどうかをELISA、ウェスタンブロット、そしてRT-PCRで検出しています。感染が確認されたタバコの葉を用いて、新しい別のタバコの葉に接種し、また来年度の学生が感染の有無を調べていきます。CMV【キュウリモザイクウイルス】とは、アブラムシによって伝搬されるウイルスで、雑草だけでなく作物にも感染する駆除の難しいウイルスの1つです。感染すると、生長点付近の葉が濃淡のモザイク症状となり、葉が萎縮したり、奇形になったりします。葉脈が透化または緑帯となったり、淡褐色の小斑点を生じたりもします。CMVは外被タンパク質とゲノムとしてRNAを持っています。そのため、タバコの葉がCMVに感染しているかを調べる方法は、様々あります。1CMVゲノムRNAを検出し、CMVのRNAが存在するかどうかを調べます。植物からRNAを抽出し、RT-PCRで目的のCMVの遺伝子を増幅し、CMVのRNAが存在するかどうかを調べます。2植物からタンパク質を取り出し、CMVのタンパク質が存在するかどうかをCMV抗体を使って抗原抗体反応で調べます。タンパク質を用いての実験は、DIBA法、ELISA法、そしてウェスタンブロット法の3つを用いて調べました。今回は、タンパク質を用いて調べるウェスタンブロット法の様子です!葉を乳鉢ですりつぶし、タンパク質をSDS-PAGE電気泳動で分子量の大きさで分けます。泳動後のゲルをメンブレンに転写し、メンブレンを抗体と反応させることで、CMVがあればその部分の色が変わり、CMVに感染していたかどうかが分かります。植物を材料とした細胞工学の実験技術者を目指す、バイオテクノロジー科4年制植物バイオコース。群馬県の勢多農林高等学校の学生さんが東京バイオにいらっしゃいました。バイオでは、毎週末実験ができる体験実習を行っています。週末忙しいい方のために平日説明会も開催中。