(i)もしくは(ii)の配列、または配列番号28〜32、35〜43および45〜59のいずれかの塩基番号21〜50の配列、配列番号44の塩基番号21〜51の配列、もしくは配列番号60の塩基番号21〜48の配列を含む核酸アプタマーからなるカンプトテシン類結合剤。0002】イリノテカンやトポテカンなどのカンプトテシン類は、広い抗がんスペクトルを有するため、非常に有効ながん治療薬の一つとして用いられている。一方で骨髄抑制や出血性膀胱炎などの副作用が報告され、投薬には専門的な注意を要する。種々のがん疾患に対して有効なカンプトテシン類について、副作用の少ない安全な投薬方法が開発されれば、がんで苦しむ多くの患者に福音がもたらされる。副作用低減には、疾患部位に必要最小限のカンプトテシン類を送達することが有効であると考えられるが、そのためには、疾患部位に特異的に薬物送達を行うDDS機能をカンプトテシン誘導体に結合でき、かつ、誘導体の活性を保持する必要がある。その方法として、カンプトテシン誘導体に共有結合でポリマーをつなぐ方法がある。この方法では、ドラッグ・リリース(疾患のある細胞組織に結合すると薬物を放出すること)が円滑に行い難いなどの課題がある。本発明の目的は、カンプトテシン類に対し特異的に認識し結合する核酸アプタマーを提供することである。本発明者は上記課題を解決するために鋭意検討を行った。その結果、配列番号1,2等の特定の配列を含む核酸アプタマーがカンプトテシン類に特異的に結合することを見出し、それにより、抗癌剤やカンプトテシン類の薬理効果や薬物動態の測定に利用できることを見出して、本発明を完成させるに至った。【0007】すなわち、本発明は以下のいずれかの配列を含む核酸アプタマーからなるカンプトテシン類結合剤を提供する。(i)GGGNGGGNGGGNGGG(配列番号1)(ii)GGGNGGGNGGGNNGGG(配列番号2)ここで、NはA,T,GまたはCを示す。(i)または(ii)を含む配列としては、配列番号6〜9および12〜18のいずれかの塩基番号21〜50の配列、配列番号10の塩基番号21〜51の配列、配列番号11もしくは20の塩基番号21〜49の配列、配列番号19の塩基番号21〜52の配列、配列番号23の塩基番号14〜40の配列、または配列番号21の塩基番号21〜54の配列であることがより好ましい。【0008】また、核酸アプタマーは修飾塩基を含むものでもよい。本発明はまた、配列番号28〜32、35〜43および45〜59のいずれかの塩基番号21〜50の配列、配列番号44の塩基番号21〜51の配列、または配列番号60の塩基番号21〜48の配列を含む核酸アプタマーからなるカンプトテシン類結合剤を提供する。これらの配列における修飾Tとは下記の式(I)で表される化合物の残基を示す。本発明はまた、下記(I)の式で表される化合物又はその塩を提供する。【化2】この化合物はチミジン三リン酸の誘導体である。したがって、修飾ポリヌクレオチドの作製などに使用することができる。本発明はまた、下記(II)または(III)の式で表される化合物又はその塩を提供する。塩としては酸付加塩が例示される。【化3】これらは抗癌剤として知られるカンプトテシンの誘導体である。み合わせる担体等は、抗癌剤としての使用態様は抗癌剤として公知のカンプトテシン誘導体に準じて決定することができる。【0011】なお、本発明において、カンプトテシン類とはカンプトテシンに限られず、カンプトテシンの骨格を含むものであればよいが、例えば、トポテカン、イリノテカン、DB67、BNP1350、エキサテカン、ルートテカン、ST1481、CKD602および上述した化合物(II)、(III)なども挙げられる。核酸アプタマーとは好ましくはDNAであり、より好ましくは一本鎖DNAである。核酸アプタマーは修飾されたものであってもよい。核酸アプタマーの安定性を増加させるために、ホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート修飾することも可能である。蛍光物質等で標識されたものでもよい。核酸アプタマーの長さは、好ましくは15〜100塩基であり、より好ましくは20〜60塩基である。本発明において新たに開発した核酸アプタマーは、カンプトテシン類を特異的に認識し結合することができるため、薬物検出のための分子プローブや、DDSの薬物キャリア分子として、抗がん剤の薬理効果や薬物動態などの検証研究や、DDSによるがん治療に応用されることが期待できる。核酸は、(1)生体の拒絶反応を抑制できる、(2)細胞表面の特定の分子等を特異的に認識する他の核酸アプタマーや抗体などと容易に連結できる、(3)核酸同士で連結する場合、ドラッグ・リリースなどのインテリジェント機能を容易に持たせることができる、などの点でポリマーを用いた方法より有利と考えられている。【図1】実施例2で選択されたカンプトテシン類結合核酸アプタマーの配列を示す図。グループに分けてコンセンサス配列を示した。カッコ内の数字は配列番号を示す。下線部はプライマーの配列である。以下に本発明を詳しく説明する。本発明のカンプトテシン類結合剤の一態様は、下記(i)または(ii)の配列を含む。(i)GGGNGGGNGGGNGGG(配列番号1)(ii)GGGNGGGNGGGNNGGG(配列番号2)ここで、NはA,T,GまたはCを示す。具体的には配列番号6〜9および12〜18のいずれかの塩基番号21〜50の配列、配列番号10の塩基番号21〜51の配列、配列番号11もしくは20の塩基番号21〜49の配列、配列番号19の塩基番号21〜52の配列、配列番号23の塩基番号14〜40の配列または配列番号21の塩基番号21〜54の配列が挙げられる。カンプトテシン類の少なくとも一種類に結合する能力が維持される限り、5’側および/または3’側に任意の長さの任意の配列が付加されてよい。【0017】また、本発明のカンプトテシン類結合剤の他の態様は、配列番号28〜32、35〜43および45〜59のいずれかの塩基番号21〜50の配列、配列番号44の塩基番号21〜51の配列、または配列番号60の塩基番号21〜48の配列を含む修飾塩基を含む核酸アプタマーであってもよい。カンプトテシン類の少なくとも一種類に結合する能力が維持される限り、5’側および/または3’側に任意の長さの任意の配列が付加されてよい。【0018】また、図1より、下記のようなコンセンサスが抽出できるので、下記のような配列を含む核酸アプタマーもカンプトテシン類結合剤として使用可能である。ACGtAGGGtGGtCAtAGtAtCtGGGAAACGGGtGGtttAAAGGtXXXXXXXXXXXXXGttXCAtCCCGtt...tAACCGCCttAAGtXAtGGCG...CCtXtGXACGCCAtCTTCAAAAA...CttttCAGGGGXAtXXXCtAここで、Xは任意の塩基(好ましくはA,G,Cまたはt)を示し、tとは式(I)の化合物の塩基部分である。本発明のカンプトテシン類結合剤は、カンプトテシン類検出のための分子プローブとして使用することができる。核酸アプタマーを蛍光色素などで標識し、カンプトテシン類と複合体を形成させて、カンプトテシン類の体内動態などをトレースすることができる。【0020】また、本発明の核酸アプタマーとカンプトテシン類の複合体は、抗癌剤として使用することができる。組織にカンプトテシン類を特異的に集積させるための物質を結合させることが好ましい。標的癌組織にカンプトテシン類を特異的に集積させるための物質としては、標的癌組織の細胞表面に出ているタンパク質や糖鎖などに特異的に結合する物質が好ましく、抗体などのタンパク質や細胞表面の特定の分子等を特異的に認識する他の核酸アプタマーがより好ましい。アプタマーにそのような物質を結合させる技術は公知であるが、例えば、カンプトテシン類との結合に関与する配列に、別の配列(結合に影響を与えない配列)を付加し、それにビオチンを結合させ、一方、抗体をアビジンで標識して、抗体とアプタマーを結合させ、アプタマー−カンプトテシン類−抗体の複合体を作製することができる。以下に実施例を示し、本発明をさらに具体的に説明する。本発明は下記実施例に限定されるものではない。derivative2(化合物c)を合成した。1.0eq)を75%H2SO4(5ml)に氷冷下で溶解した。1.58eq)を水(1ml)に溶かし、氷冷下でCamptothecin溶液に加えた。ClCH2CHO(3.2ml)を氷浴下でCamptothecin溶液に加えた。十分に溶液を撹拌後、氷冷下で30%H2O2(1ml)を滴下し、5min氷冷下で撹拌後、室温で1.5h撹拌。氷冷下で冷水を反応液に加え、懸濁させた。セライトを用いて反応液を吸引ろ過し、残渣をDMFで回収し、減圧留去した。残渣をクロロホルム:ヘキサン=7:3溶液で懸濁させ、吸引ろ過を行うことにより、黄色の粉末状化合物1を得た。60,70-230mesh,0〜10%メタノール/クロロホルム)で精製することにより、化合物aを得た。DMF(20ml)に溶解した。Toluene(35ml)を加え、反応液に加え、2h撹拌した。溶液を減圧留去し、CHCl3に溶解して、飽和食塩水を用いて洗浄し、有機相をMgSO4で乾燥させた。溶液を減圧留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(富士シリシアFL60D,クロロホルム→70%酢酸エチル/ヘキサン)によって精製し、化合物bを得た。2.68×10-4mol)を10%TFA/CH2Cl2(18ml)に溶解し、1.5h撹拌した。derivative2)を得た。DMF(4ml)を加え溶解させた。3.0eq)を順によく撹拌しながら加え、化合物cの溶液に加えた。室温で2h反応させた。応液を減圧留去し、CHCl3に溶解し、飽和食塩水で洗浄した。有機相にMgSO4を加え乾燥させ、吸引ろ過し、残渣を減圧留去した。化合物d(117mg)を10%TFA/CH2Cl2(8ml)に溶解し、2h撹拌した。derivative1)を得た。3.2ml)を1ml加え塩酸を除去し、残りの2.2mlを1h何度も繰り返し流す。3mlの1×CB-NOを加え、続いて。Bを2ml×3加えた。HClを1ml×3加え、SC-Nを2ml×2加えゲルを保存した。Aを2ml×3加え、30min静置した。Bを2ml×3加えた。HClを1ml×3加え、SC-Nを2ml×2加えゲルを保存した。30sec→25°C(0.5°C/min)]した。