(PCVAD)と総称される多様な病態を引き起こす。PCV2の遺伝子型は、ORF2の塩基配列によりa〜e型の5つに分類される。流行株の遺伝子型は、2004年頃にa型からb型へ、2012年以降にd型への世界的な遷移が報告されている。日本国内で流行しているPCV2の遺伝子型に関しては、2008年にTakahagiらが報告しているのみである。そこで本研究では、近年の日本国内におけるPCVの流行状況を把握することを目的に、PCVADを疑う症例からPCV2およびPCV3を検索し、分子系統解析を行った。ORF2領域をPCR法によって増幅した。増幅されたPCR産物の塩基配列を決定した後、分子系統解析を行った。同様に2016年に採集した27農場74頭からPCV3を検索し、全ゲノム配列を決定した後に分子系統解析に供した。【成績と考察】国内の8農場、9頭からPCV2遺伝子が検出され、分子系統解析によって、1検体がa型、2検体がb型および6検体がd型に分類された。6農場、7頭からPCV3遺伝子が検出され、2016年に報告された米国分離株ゲノムと99.4%の相同性を示し、最も近縁であった。以上より、近年の日本国内においてはd型が最も優勢な遺伝子型になっていることが示唆された。本研究で検出されたPCV3は、既知の米国野外株と非常に高い相同性を示したことから、日本国内への本ウイルスの侵入が明らかになった。本研究は国内におけるPCV3検出の初報告である。要旨:研究あるいは医薬品等の開発に使用する実験動物用飼料の重要性については、論を俟たないであろう。国内で維持・生産されているミニブタは実験動物として供給されており、他の実験動物と同様に給与する飼料による実験結果への影響、データのバラツキ等をできる限り少なくするために規格管理された飼料の給与は重要である。kg/袋となっている。月齢によって制限給餌量は異なるが、離乳時から給与可能である。当研究所の生産施設においても育成ミニブタには同じ飼料を使用しているが、放射線滅菌後に給与している。製造ロット毎に飼料成分、コンタミナントについて検査を実施しており、要望に応じてユーザー様に配布している。NSの制限給餌下で、6及び10ヵ月齢時のNIBS系ミニブタの体重(平均値±標準偏差)は雄では19.6±1.0kg及び28.0±1.3kg、雌では20.5±2.8kg及び30.1±2.8kgとなる。今回、当研究所で販売しているNSの特徴について試験データを交えてご紹介する。原因とし、豚に甚大な被害を及ぼす呼吸器疾病である。抗原性の違いに基づき、16の血清型に分類され、日本では、2型、1型、5型、15型の順に多い。実施してきたが、非特異反応が出現することがあり問題となっていた。近年、CPSやLPSを抗原に用いた新たなELISAの作出も報告されている。これらのELISAを用いてワクチン抗体を検出できるかは不明であった。作出し、Appワクチン免疫血清の抗体価測定における有用性を検討した。1型、2型および5型からホットフェノール抽出したCPSを含むLPSを抗原として使用し、間接法に基づき実施した。ELISAと同一の菌株をオートクレーブ処理した菌体を抗原として使用し、サンドイッチ法に基づき実施した。2型を気管内投与し攻撃した実験豚から採取した血清を用いて、2つのELISAで測定し相関を調べた。ワクチン免疫した野外豚の抗体応答を調べる為に、App1.2.5型を含む不活化ワクチンであるAP125RXワクチンで免疫した野外豚から採取した血清を用いて、2つのELISAで測定し相関を調べた。ELISAの非特異反応の有無を調べる為に、菌体ELISAで非特異反応を示した血清を測定した結果、いずれの検体にも非特異反応は認められなかった。ELISAの特異性を調べる為に、App1.2.5型をそれぞれ豚に気管内投与し、1週間後採血した血清を陽性血清として、同一および異なる血清型の組み合わせで測定した。その結果、1-2-5型間で交差反応は認められなかった。実験豚でのワクチン免疫血清の抗体応答を調べた結果、免疫群は攻撃時にApp1型、2型および5型に抗体上昇が認められたのに対して、対照群は攻撃後に2型のみ上昇が認められた。ELISAの間には高い相関が認められた。ELISAの間には高い相関が認められた。ELISAは、(i)菌体ELISAに比べて非特異反応がない。(ii)血清型特異的なLPSとCPSを抗原としている為、LPSに対する抗体応答を特異的かつ高感度に検出できる。(iii)間接ELISAである為、サンドイッチELISAに比べてより作業工程が簡潔である。(iv)感染血清のみでなく、免疫血清の抗体価も測定できる、といった利点を持った有用な抗体検出法と考えられた。【臨床事項】母豚250頭規模の養豚場の子豚において、ブルーイヤーを呈して、衰弱・死亡する個体が増加した。1ロット当たりの発病率は約20%、死亡率は約1%であった。提出例は病性鑑定のために鑑定殺に供された5例のうちの1例である。供された5例に共通して肺門リンパ節の腫脹が観察された。その他、提出例では暗赤色肺、腸間膜リンパ節の腫脹が認められた以外、肝臓を含む他の諸臓器に著変は認められなかった。