株は種々の塩基がワクチン株と異なった。あり、野外株と推察された。高変異領域の塩基配列分析による株型別は、Erの疫学調査に有用であると思われた。鶏コクシジウム症の診断は、一般に糞便検査によってコクシジウム原虫のオーシストを検出することにより行われる。顕微鏡下でオーシストを観察して形態と大きさから種の鑑別を行うが、それらは種間で類似していることも多く、正確な判定には高度の熟練を必要とする。DNAの定量が可能なリアルタイム検出PCR法の開発を試みた。ITS-1領域内の種特異的な配列を基にプライマーを設計した。PCR用プライマーを使用した。社製)を用いて実施した。浸潤度の高さが伺えた。従って、鶏コクシジウム症の診断に有用であると考えられた。属原虫の寄生に起因する鶏の腸炎を主体とする疾病である。産卵率などを悪化させるため、主にブロイラー産業において多大な経済的被害をもたらしている。本症の予防対策として、従来、コクシジウム予防剤が中心的役割を果たしてきたが、近年では薬剤耐性株の出現が問題化し、また薬剤に頼らない安全・安心な食品生産を求める消費者の声もあることから、これに変わってコクシジウム生ワクチンの利用が急速に拡大してきた。本報告では、当該生ワクチンを用いたコクシジウム対策について、生産現場における応用事例について紹介する。慢性疾患にしばしば続発する。その他に細菌性多価不活化ワクチンの反復使用によるアミロイド症が知られているが、報告例は少なく、詳細は不明である。本研究では鶏に死菌抗原を高用量複数回投与してアミロイド症を誘発し、その病態を解析した。SPF鶏の雌に3週間隔で3回筋肉内に投与した。mLずつ同様に投与した。A抗原の検出を行った。経時的に血漿を採取し急性期蛋白を測定した。4週頃より本症によると思われる死亡鶏もみられた。剖検では発症鶏の肝臓は腫大し、緑色調を呈していた。投与部位には中等度~重度の炎症反応が認められた。組織学的に肝臓のディッセ腔にアミロイドが沈着し、コンゴーレッド染色で赤橙色を示した。類洞は狭窄し、出血や肝細胞の萎縮が認められた。ISH法では接種鶏の肝細胞の多くにSAA陽性シグナルが検出された。非臨床試験においてイヌ、サルに次ぐ非げっ歯類の実験動物としてミニブタが注目されてきている。おける利用が高まるものと期待される。mg/kgの用量で胃管を用いて28日間連続経口投与した。初回投与後1、2、4、6、8および24時間および試験28日の投与直前ならびに投与後1、2、4、6、8および24時間に採取した血漿を用いてTK測定を実施した。行い、主要器官の重量を測定するとともに、採取した全身諸器官の病理組織学的検査を実施した。試験期間中に死亡動物はなく、臨床症状も観察されなかった。mg/kg群において血漿中からの消失性が低くなった。試験28日では雌に比較して雄の投与直前の血漿中濃度が高く、AUCの個体差が大きくなった。NIBS系ミニブタでは雌に比較して雄において連続投与によるカフェインの血漿中における蓄積性が高いこと、その血漿中からの消失速度の個体差が大きいことが明らかとなった。体重比器官重量に投与用量に関連した変化はなかった。SPFネコの生産は特殊な機関を除いてまだ確立されていない。そのため、様々な研究機関では諸外国から輸入し様々な研究に使用している。輸入した場合、多くの研究者にとって、検疫の関係で、使用したい月齢で入手困難なことが多く見られ、研究に支障をきたしていることが現状である。我々は、これまでSPFネコの研究開発に取り組んできたが、このほどSPFネコの生産コロニーを確立した。群のローテーションシステムで維持しており、特徴として、短毛で、性格は温順、頑健で飼育しやすいことが挙げられる。本系は今後、種々の疾病研究用、ワクチン製造用あるいは検定用動物として利用が期待される。ネコ舎における維持管理システムの概要について紹介する。40年以上前からその存在が知られており、今までに多くのニワトリ筋ジストロフィー発症系が確立されてきた。Hampshire種の413系(NH-413)と呼ばれる筋ジストロフィー発症系が存在する。現在、NH-413系は、福山型筋ジストロフィーの発症モデルとして有用であろうと考えられている。よる筋ジストロフィー遺伝子の同定は現在に至るも明らかにされていない。通常の交配によってNH-413系の後代を得ることも困難である。確立された白色レグホン(L-M系)と、NH-413系を用いて生殖細胞キメラを作出し、筋ジストロフィー症ニワトリの再生を試みた。L-M系)をレシピエントとし、NH-413系受精卵(筋ジストロフィー症系)をドナーとした。レシピエント受精卵の胚盤葉明域中央部の一部を物理的に除去した。インジェクションし、NH-413系由来のキメラニワトリを作出した。作出したキメラのうちドナー由来の表現型(羽毛色)を発現している個体をキメラと判定した。NH-413系を用いて作出したキメラの後代検定を試みた。孵化直後のキメラ個体は、表現型、行動による筋ジストロフィー症発症などの特性は確認できなかった。4日齢以降において、キメラの羽装中にドナー由来の羽装が認められた。2週齢頃には首を傾ける行動、片側の羽が挙がりにくいといった行動異常が確認できた。その後、観察を継続したが顕著な行動異常は確認できなかった。NH-413系に特徴的な羽の硬直(フリップテスト陽性)は確認されなかったが、行動異常は現在も続いている。NH-413系と作出キメラの交配によって得られた後代の雛は、すべてドナー由来の羽装を示した。今回の研究では、作出キメラニワトリにおける筋ジストロフィー症の発症は確認できなかった。行動異常を示したことから筋ジストロフィー遺伝子の限定的な関与が考えられた。キメラの精子を用いた人工授精によって筋ジストロフィー発症個体の作出を試みたところ、全ての雛においてドナー由来の羽装を示した。これらの雛においては、筋ジストロフィーの発症が確認された。発症が確認された個体同士の交配を行なったところ、すべての個体においてドナー系同様の筋ジストロフィーを発症した。これらのことから、作出したキメラは生殖系列キメラであるものと確定した。本研究によって生殖細胞キメラを解して、効率的に筋ジストロフィー発症個体を再生することに初めて成功した。これらの発生工学的技術は、疾患モデル動物の効率的な開発や、鳥類遺伝資源の保存、等に非常に有用であろうと考えられた。家系を用いてハプロタイプ分析を行ってきた。原因候補遺伝子として同定された。遺伝子のいずれもが既知の筋ジストロフィー発症関連遺伝子ではなく、詳細な遺伝的解析が必要とされる。そこで本研究では各原因候補遺伝子の翻訳領域の塩基配列を決定し、病因となる変異の同定を試みた。ジストロフィー発症鶏と正常鶏の塩基配列を比較した。検出されたアミノ酸置換を伴う突然変異に対し、他品種鶏と他生物種でのアミノ酸の保存性を調査した。検出されたアミノ酸置換はイソロイシンからバリンへと変化するものであり、これらは共に中性アミノ酸であった。検出されたアミノ酸置換はアルギニンからグルタミンへと変化するもので、塩基性アミノ酸から中性アミノ酸への置換であった。アミノ酸の性質がより大きな変化を引き起こすことから、後者の変異がニワトリ筋ジストロフィー発症に関与している可能性が強く示唆された。品種全てで保存されており、またヘビ、ワニ、ハト、カメ、カエル、トカゲ、ウシ、マウス、ラット、イヌ、サル、ヒトで高度に保存されていた。