Achievements初年度のメタボローム解析結果に基づき、GGCT阻害により惹起される細胞内カスケードの起点として酸化ストレスに着目し、MCF-7におけるGGCTノックダウン細胞と対照細胞間のROSレベルを測定し比較検討した。細胞質、ミトコンドリア、細胞内脂質におけるROSレベルを比較したが、いずれも有意な差は確認できなかった。抗酸化剤であるN-acetyl-L-cysteineの前処理によるGGCT-siRNAの細胞増殖抑への阻害効果も認めなかった。以上より、GGCT発現阻害による癌細胞増殖抑制メカニズムとして、酸化ストレス関連細胞死の関与を明らかにすることはできなかった。pathwayの関与が示唆された。MCF-7において、GGCT/TGFβ-siRNAによる多重ノックダウンは、GGCT-siRNAによるCDK阻害因子の発現を低下させ、細胞増殖抑制を有意に阻害した。前立腺癌および膀胱癌由来細胞株の一部においても同様の遺伝子発現変動および細胞増殖抑制の阻害効果が確認された。pathwayの活性化と標的遺伝子であるG1/S期制御因子の誘導が癌増殖抑制のメカニズムの1つである可能性が示唆された。planned.ReasonH30年の計画内容として予定したトランスクリプトーム解析及びメタボローム解析結果の検証を行い、GGCTノックダウンにおける抗腫瘍メカニズムの一端を示す事ができた。トランスクリプトーム解析と比較し、メタボローム解析に関しては一部解析が遅れており、鋭意推進中である。Activity今年度はトランスクリプトームデータとメタボローム解析結果を統合し、GGCT発現阻害により惹起される細胞内カスケードを明らかにするための検証を引き続き行う。blotなどによる発現解析や多重RNA干渉実験による細胞増殖抑制の阻害効果や細胞周期解析による検証を行う。他のGGCT高発現細胞株に対しても同様の増殖抑制機構が働くかを検証する。