FFPEキットは、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)されたサンプルから簡単に、しかも毒劇物を使わずにRNAを精製できます。ホルマリン固定のプロセスで生じるRNA分子に対する化学的な構造変化を最適に修復することにより、PCR可能なRNAを大量に回収することができます。含まれており、定量PCR実験の反応条件の評価や、実験間の比較を容易に行うことができます。RNAをコントロールとすることで、定量逆転写PCR(QRT-PCR)の有意義なデータを得ることができます。本製品には、脱パラフィンから精製RNAの溶出まで必要なすべての試薬が包装されており、別途試薬を購入する必要はありません。パラフィン包埋組織からの確実なRNAの回収ホルマリン固定パラフィン包埋組織はmRNA発現解析、DNAマイクロアレイ、QRT-PCRなどの分子遺伝学的解析に幅広く使用されています(1-14)。ホルマリン固定パラフィン包埋後に時間がたったサンプルからQRT-PCR解析に十分な量のRNAを単離することは困難です。サンプルの固定のプロセスでRNA分子が変性し、以降の実験への使用ができない場合もあります。(LMD)によって得られたサンプルに適しています。本キットは競合他社のキットと比較し、QRT-PCR解析により適したRNAを回収することができます(表1)。FFPEキットで精製されたRNAはQRT-PCR解析可能なRNAをA社のキットと比較して多く回収することができますので、より高感度での解析が可能になります。1-Stepを使用)を行いました。FFPEキットにより高純度のDNA-フリーRNAを抽出することが可能です。本キットは脱パラフィン処理とプロテイナーゼK消化後、ゲノムDNA除去のためのカラム上でのDNase処理を含む3段階で純粋なRNAを精製します。RNAの純度を検定するために、3つの組織(肝臓、結腸、腎臓)由来のサンプルのA260/A280比率を計測しました。比率は1.8以上で、RNA純度が高いことが示されました(表2)。FFPEキットは3時間という短いプロテイナーゼK消化で、より多くのRNAを回収することができました(図1)。FFPEキットはシンプルで確実、フェノール-フリーのプロトコールでパラフィン包理組切片からRNAを精製します。最初に組織断片をd-limoneneで脱パラフィン処理した後、エタノール‐ベースの溶液で洗浄します。次に切片をプロテイナーゼK消化して固定組織を可溶化し、核酸を溶液中に遊離させます。RNAキットにより精製します。バッファーに懸濁し、RNaseによるRNA分解を阻害します。カップにアプライします。処理により除去されます。ulの容量で溶出されます。精製されたRNAはQRT-PCRによる遺伝子発現解析にご使用いただけます。違いにより、組織ブロック間で大きな個体差が生じることがあり、下流の解析において大きな差として現れる可能性もあります。含まれておりますので、QPCRの際にサンプル間のターゲット遺伝子の発現量を標準化するためにお使いいただけます。用いてQPCRの条件を最適化することで、貴重なパラフィン包理組織由来のRNAを無駄なく使用することができます。お問い合わせくださいシンプル、確実、フェノール-フリーのプロトコールでパラフィン包理組切片から高純度のRNAを単離。含まれており、意義のある定量RT-PCR(QRT-PCR)のデータを測定可能。お問い合わせくださいシンプル、確実、フェノール-フリーのプロトコールでパラフィン包理組切片から高純度のRNAを単離。含まれており、意義のある定量RT-PCR(QRT-PCR)のデータを測定可能。