FavoritesSummary新生内膜過形成はarterialized静脈の狭窄症の主な原因です。Dawleyラットの総頚動脈のカフ手法を用いてグラフト化されることにより、我々は新しいプロトコルを提案する。生存率は犠牲の時点で100%であった。here.Abstract新生内膜過形成は、末梢動脈のバイパス手術で同様に動静脈瘻の動脈冠動脈バイパス手術において非常に重要であるarterialized静脈の狭窄の1主な原因です。1-5は、総頸動脈の静脈グラフト挿入の実験手順カフの手法を用いて新生内膜過形成とそれに対処するための治療法の選択肢の病因を調べるために、いくつかの研究プロジェクトに適用されています6-8カフは新生内膜過形成の発達、それによって血管吻合改造を防止し、移植片内で乱流を誘発します。優れた静脈静脈グラフトを使用すると、静脈動脈化実験のための確立された小動物モデルである。らによって記載された技術。手続きを簡素化するために、必要な実験動物の数を最小限にするため、ビデオトレーニングで詳細な動作プロトコルが表示されます。このビデオでは、カフテクニックと静脈グラフト介在両方を学ぶ初心者外科医を助ける必要があります。Dawleyラットの総頚動脈のカフの技術で移植した。自動移植が行われたため、特筆すべきは、NOドナー動物は、必要ありませんでした。生存率は犠牲の時点で100%であった。グラフト開存率は、最初の10個の手術動物のための60%、残りの11の動物のための82%であった。屠殺時に血液の流れが8±3ミリリットル/分であった。結論として、この外科的プロトコルはかなり簡素化され、このコンピュータを最適化し、標準化licated手順。それによって彼らは速く専門知識を獲得し、実験動物の無駄な犠牲を避けるために貢献し、可能な落とし穴を説明して、初心者の外科医に、簡単なステップバイステップの指示を与える。FELASAのガイドラインに従って、実行されるすべての実験のために地域の倫理委員会の承認を得る。GmbHはSulzfeld、Germany)から購入することが可能な雌Sprague-Dawleyラットを使用しています。私たちは7匹術後3,6および12週目に屠殺し、その各々の3つのグループに分かれて21頭を使用していました。購入時には、動物は12週齢であると250〜300グラムの重量を量るべきである。21の周囲温度を有する気候制御室で動物を飼う°C、食品や水への無料アクセスを相対湿度60%と12時間明暗サイクル。/分の酸素流量で設定され、麻酔器に接続されているプレキシグラスボックスを使用して、全身麻酔を誘導し、イソフルラン気化器ワットi番目の5パーセント麻酔ガス。動物の深い感覚の反射が抑制されているとすぐに1.5%イソフルラン気化器で麻酔を維持します。体の暖まる皿の上に仰臥位でラットを固定します。胸骨柄下2cmに顎角から、脱毛クリームで、その毛皮を押し削除して、それぞれの動物の動作領域を準備します。手術領域、動物および外科医の前面に用意面積に着目して、無菌手術野を準備します。消毒剤でベンチを清掃してください。クロルヘキシジンと70%イソプロピルアルコール)の複数のアプリケーションを使用して切開部位を準備します。クロルヘキシジン、第一、第二アルコールと、最終的には、スクラブのソリューションを適用する。滅菌マイクロサージェリーの楽器を使用しています。M650、ガイス、スイス)を使用します。図1は、ラットの首の解剖を表しています。1a)の右胸鎖乳突筋の切断前に内臓。1b)の右胸鎖乳突筋の切断後の内臓。カフの準備プラスチックチューブ(Portex、内径0.75ミリメートル、外径0.94ミリメートル、スミスメディカル、英国)から手で3mmの長さで袖口をカット。これらの袖口は、プラスチックチューブ、カフ量の半分から成るカフハンドルの完全なボリュームを含む管状カフ本体で構成されています。カフ本体とカフハンドルの両方が均等に経度であるべきグラム。カフハンドルは外科手術中にカフを操作するために不可欠です。カフを容器の上に滑った後は、ミニブルドッグクランプは、出血を防ぐ位置にカフを維持し、安定性を確保するために、カフハンドルと容器に同時に配置されます。カフテクニック容器の上にカフを滑る。その直後、容器を裏返す、カフ本体の外側の上にそれを引くと7から0絹糸結紮で固定します。このように、カフの内腔は内皮細胞で覆われている。その後、カフ本体の上に静脈グラフトをスリップし、新しい7から0絹糸結紮で固定します。血栓形成を防止するためには、所定の位置に動脈を保持しているタイに連絡から血を避けるために、カフ余裕に非常に近い静脈グラフトタイを固定するために不可欠です。これは、血流方向による遠位吻合するために重要です。著者によれば、それは考慮されません同じ理由から、近位吻合するのに不可欠です。2.5センチ長い正中頸部切開を加えます。周囲の組織から右外頸静脈から1cm長セグメントを完全に分離7から0絹縫合糸と静脈支流をライゲーションする。胸鎖乳突筋の準備をして、途中でそれを横断する。動脈または迷走神経を圧迫しないように確認しながら、慎重に右総頸動脈を準備します。ダウン腕頭動脈に頸動脈分岐部からそれを動員する。その後、切断前に7から0絹縫合糸で真ん中に2回を連結。図2c)を確保するためのカフ·ハンドル上のミニブルドッグクランプ付き遠総頚動脈のカフの端をクランプします。続いて、得られた動脈の切り株がカフ本体と同じくらいの長さにする必要がありそれによってリガチャー、真後ろに動脈を切った。mlの0.9%NaCl)を使って動脈内腔を洗浄します。後で使用するために適切な位置に置いておき結紮ループを設定します。動脈切り株をプルアップし、カフ本体オーバースリーブのようにそれをスリップ。その後、ライゲーションループと結び目しっかり引き出します。図2f)についても同じ手順を繰り返します。図2G)の適切な位置決めを可能にし、反対方向に縫合糸を引くヘパリン生理食塩水で静脈部分を洗浄します。カフ遠位頚動脈の上に以前に逆転静脈部分の一方の端をスリップし、正しい位置に固定シルク7から0リガチャーとる。静脈の周囲が完全に均等に把握する必要があることをここで注意することが重要です。ヘパリン生理食塩溶液で静脈セグメントをリンスした後、近位頸動切り株の上に静脈セグメントのもう一方の端をスリップ。図2I)が可能遠頚動脈切り株にしてから、近位1の最初のミニブルドッグクランプ他の後に1を削除します。血流や脈動がグラフトと総頸動脈(視覚的に評価し)内で観察された場合手術は成功したとみなされます。VICRYLを使用しています。VICRYLを使用しています。P>動物は赤外線加温ランプ下で平らな紙の寝具に麻酔から回復しましょう​​。すべての動物が正常に見えるまでの間、家畜の保持領域に手術動物を返しません。kg体重scの濃度でブプレノルフィン(Temgesic)を管理する。ブプレノルフィンはちょうどイソフルラン誘導前に投与することができます。彼らの一般的な条件や、病気や感染症の徴候について術後の動物を監視します。システム(TS420、トランソニックシステムズヨーロッパBV、マーストリヒト、オランダモデル)を用いて、血流測定で証明された。システムは、ドップラー原理に基づいています。代表的な結果Fによってaithfully命令は前述のまま、手術の平均持続時間は約65分であった。動物は、優れた物理的条件を提示し、実験全体を通して予想通り体重が増えた:操作の開始時点で動物は312の重量を量った±20.39グラム。3週間の犠牲時点で、手術後の動物は6週目で、325.2±28.7グラムの重量を量った333±39.9グラム、12週の時点で362.22±29グラム。いいえ感染は手術部位と先進ない傷では観察されなかった。操作傷は予想された時間で完全に治癒した。神経制御は、脳梗塞や運動の欠乏の徴候を示さなかった。動物は頸動脈で運転され、2つの外頚静脈のいずれかが削除され、自動移植として使用されていたので、後で重要なポイントだった。術後疼痛緩和の治療に全くアレルギー反応は認められなかった。>全ての動物は、実験全体を通して警戒し、社会的なされた。食べ物や水を得ることに関する彼らの習慣は、全体の時間を通して変わらなかった。すべての実験の生存率は犠牲の時点で100%であった。グラフト開存率は、最初の10個の手術動物のための60%、残りの11の動物のためのそれに応じて82%であった。合計グラフト開存率は71%であった。arterialized静脈グラフトにおける血流が犠牲の時点で測定し、8歳の±3犠牲時点の間の統計的有意差なしの3ミリリットル/分であった。図1ラットの首の解剖学。1a)の右胸鎖乳突筋の切断前に内臓。1b)の右胸鎖乳突筋の切断後の内臓。カフ2の近似g)は十字テクニック総頸動脈の切り株、h)を静脈介入後の内臓は、i)静脈介在グラフトの再灌流後の内臓。内臓の概略図静脈介在グラフトの再灌流後。拡大図を表示するには、ここをクリックしてください。librarian.Discussion総頸動脈で外頚静脈グラフトを介在させるには、高度なマイクロサージェリー技術です。このビデオでは、初心者外科医は実験動物の低い廃棄物と一緒に最小の時間で、このテクニックを習得するのに役立ちます。それは、過度に深い麻酔ステージを回避うまく制御することができ、外科医に十分な時間が動作することができますので、吸入麻酔は、この操作のための最適なオプションです。ラットはマウスに比べて、はるかに簡単にこのような複雑な手術テクニックを練習するのに適したサイズを提供して実験動物です。カフテクニックを使用することの利点は、異なる管腔の直径の血管を吻合することができることである。再灌流後の出血を避けるためにカフと外転船の全周を連結することが重要です。このモデルは、高い血流速度と低せん断応力の血行動態をシミュレートするために、勉強することは非常に適しています新生内膜過形成の発達に影響を与えるメカニズム。カフは、血管吻合改造を防止し、移植片内の乱流とそれによって新生内膜過形成の発達を誘導する。図3)の場所で動脈を保持していると血液の関連付けを防止するための適切な位置に静脈グラフトタイ2を配置することが不可欠である。9は推奨される方法で静脈グラフトを接続すると、血栓が制限百分の12から13と、さらに低い比率に血管の閉塞にイベント15が動作ビデオで見てわかるとおり、その提案された位置に正確にネクタイを配置することは容易ではありません。作者は、それが血流方向のため、特に、遠位吻合するために重要であると考えています。これとは対照的に、これは、同じ理由から、近位吻合絶対に重要であると考えられません。静脈vを使用してプロシージャとは異なり、移植、移植片は半分に実験動物の数を減らすことが必要なように外頸静脈を使用して、この自家としてEIN。最終的には、総頸動脈で外頚静脈グラフトを介在させるには、高度なマイクロサージェリー技術です。このビデオでは、初心者外科医は実験動物の低い廃棄物と一緒に最小の時間で、このテクニックを習得するのに役立ちます。このモデルは現在小動物の固形臓器移植で使用されているカフテクニックを練習する初心者の外科医のための優れた手段です。librarian.Disclosures特別な利害関係は宣言されません。"START"によって賄われていた。私たちは、彼女の優秀な編集支援のため夫人メアリー·ジョアンBlümichに感謝したいと思います。gdpr@jove.com.。