213mgのDEHPを単回投与した他の研究では尿中代謝物の99%がグルクロン酸抱合体であった。Lewisら(1978)は血清中DEHPの50%が32分で消失すると報告した。DEHPを18-38mg/dL含む血小板濃縮液を投与された患者の血漿中レベルは0.34-0.83mg/dLであり、24時間以内の排泄の60-90%が尿中に認められた。1998)ことに留意する必要がある。reductase活性は有意に低下した。reductase活性は50%低下した。一般にフタル酸エステル類の精巣毒性は特に幼若ラットで強く発現することから、ラットの4-6週齡から投与を開始した研究結果を表2(一部2世代試験を含む)にまとめた。精子細胞の欠落等を報告した。Butterworth(1980)は2,800mg/kg/dayでC1〜C8の直鎖型フタル酸エステル及びDEHPをWistar雄ラットに10日間強制経口投与の実験を行い、ほぼ同様の結果を得ている。精巣毒性はDIBPからDHpPまでのフタル酸エステル類に認められているものの、その毒性強度は直鎖型のC4〜C6で強く発現している。明確な無毒性量が求められているのはDEHPだけである。DEHPの構造については、2位の炭素側鎖が回転することによって、C4とC6の両方の直鎖型側鎖を有することになる。phthalate(C4)とを生じるが、前者は精巣毒性を示さず、後者はDBPの活性代謝物と同一である。(MEHP)を用いて行われている。cyclaseを活性化させ、cAMPを産生させることにより生理作用を発現すると考えられている。Chapin(1989)は、ラットの培養セルトリ細胞において、MEHPがFSH刺激によるcAMPの蓄積を用量依存的に抑制したことから、MEHPの作用点は細胞膜またはFSH受容体そのものであると予測した。Grassoら(1993)は、同セルトリ細胞をMEHPとインキュベーションしたところ、FSH結合性の低下が認められたが、MEHPとFSHの同時存在下ではFSH結合性の低下は認められなかったことから、MEHPの作用部位はFSH受容体よりむしろG蛋白であろうと推定している。その後、フタル酸エステル類のFSH-cAMP経路への作用に関する研究報告はない。フタル酸エステル類は精子形成阻害を引き起こすが、その作用機構の一つとしてセルトリ細胞からの原生殖細胞(genocytes)の遊離とその結果生じる原生殖細胞のアポトーシス誘導が考えられている。Fasシステムとは原生殖細胞に存在する膜レセプター蛋白であるFas、セルトリ細胞に存在するそのリガンド(FasL)からなるパラクラインシグナリングシステムで、FasLのFasへの結合により、原生殖細胞のアポトーシスが引き起こされる(図2(PDF:52KB))。Boekelheide(1996)は28日齢のラットにMEHPを単回経口投与し、3、6、12時間後にセルトリ細胞及び原生殖細胞への影響を解析した結果、原生殖細胞のアポトーシスが3時間後には一過性に低下したものの、6時間以後には著しく増加した。投与後3時間の時点からセルトリ細胞内で原生殖細胞の結合維持に重要な役割を果たしていると考えられているビメチンフィラメントの崩壊が観察された。mRNAの増加を示した。Fasが増加することを報告している。これらの結果に基づいて、Richburgら(1999)はMEHPの作用機構について図-2のBに示したような仮説を立てた。MEHPはセルトリ細胞のビメチンフィラメントを崩壊させることにより、原生殖細胞をセルトリ細胞から分離させ、Fasシグナル伝達経路を崩壊させる。その後、sFasLの形成及び原生殖細胞膜でFas発現が増加し、sFasLがFasに結合することによって原生殖細胞のアポトーシスが起こるという考え方である。精細管への影響について推測されるこれら二つのメカニズムの関連性については検討されていない。DEHPは新生児期のラットセルトリ細胞に対して影響を及ぼす。Dostalら(1988)は6日齡のSDラットにDEHPを500mg/kg/day以上で5日間経口投与し、精巣重量の低下を伴ったセルトリ細胞数の減少を認めたが、200mg/kg/dayでは影響は見られなかった。セルトリ細胞は生後10-14日までに細胞分裂を終了するため、Liら(1998)は2日齢のSDラットの精巣から調製したセルトリ細胞及び原生殖細胞の共培養系を用いてMEHPの作用を検討した。MEHPは用量依存的なセルトリ細胞からの原生殖細胞の分離を引き起こすと共に、セルトリ細胞の増殖を抑制した。MEHPはFSH刺激によるセルトリ細胞の増殖を抑制したが、MEHPのセルトリ細胞の増殖抑制に対するcAMPの添加効果は認められなかった。これらのことから、新生児期にラットがMEHPに暴露されるとセルトリ細胞数の減少を招き、その結果成熟期での精子形成減少の生じることが推定される。mg/kg以上の投与で見られたことを報告した。