vitro評価系を利用した有用シーズの探索を行った。1.IL-5-venusノックインマウスを作出することに成功し、恒常的にIL-5を産生する原始IL-5産生細胞を同定した。アレルギーの誘発因子のIL-33をIL-5-Venusノックインマウスに投与したところ、肺において原始IL-5産生細胞と好酸球が顕著に増殖することを見出した。高脂肪食摂餌によるマウス肥満モデルにおいて、脂肪組織におけるTLRファミリー分子RP105の発現が10倍以上に増加することを見出した。vitro評価系を確立し、IL-5産生を抑制する化合物を見出した。この化合物はB細胞のIgE産生も抑制することから、アレルギーに対する医薬品シーズとしての展開が期待できる。活性化による交叉提示能評価系を用い1,500種類以上の化合物を調べた結果、PKC活性を持つ複数の天然薬物がTh1依存性に抗原交叉提示を増強することを見出した。増強することを確かめた。現在、PKC活性が天然物による抗原交叉提示の増強に重要であるかどうかについて検討中である。planned.Reason本研究の目的は以下の2点である。1.免疫ネットワークの時空間的な調節機構を明らかにし、アレルギーや炎症の制御および破綻の分子機構を解析し、慢性炎症性疾患の発症に関与するバイオマーカーを確立する。それにより炎症の発症と慢性化の予防法の開発に寄与する。2.アレルギーや非感染性炎症を制御する薬物の試験管内評価系を利用し、有用な植物由来化合物を探索するとともに、生体内での動態と有効性や作用機序を既知の医療用医薬品と比較する。23年度の研究は、計画通り進捗している。ある肥満に関係するバイオマーカーの発見など成果をあげている。2.についても独自の評価系でアレルギーを制御し得る候補化合物を見出している。Activity今後の推進方策としては、研究が当初の計画通り進捗していることから、交付申請時に記載した計画通り24年度の研究を行う。23年度の予算のうち63、190円が次年度使用額であるが、「IL-1βによる膵臓β細胞のアポトーシスを抑制する化合物の探索研究」については、当初から23-24年度と2年間継続して行う予定のため24年度請求額と合わせて使用する。Funding24年度は23年度の成果を踏まえ、以下の2点を中心に研究を行う。1.自然免疫を制御する化合物の探索:(1)マクロファージ細胞株をLPS刺激し、TNF-αやIL-6など炎症性サイトカインの産生をELISA法により検討する。NF-κBの活性化をGFPの発現で評価できるレポーター遺伝子導入細胞を利用して評価する細胞系を樹立し、LPSによる炎症を抑制する植物由来化合物を探索する。TNF-αの産生を抑制してショック死を抑制できるか調べる。2.非感染性炎症を制御する化合物の探索:(1)ヒト由来株化細胞を用い、細胞毒性を示さない濃度でIL-1βによるアポトーシス誘導を抑制する天然物の探索は、平成24年度も継続する。