様々な実施形態において、前記1つ以上の標識抗体は、IgM、IgGおよび/またはその組み合わせから選択される。生成するための、本明細書に記載のマウスの使用を提供し、この使用は、増幅重および軽鎖可変領域配列をヒト重および軽鎖定常領域配列に融合させること、融合した重および軽鎖配列を細胞において発現させること、および発現された重および軽鎖配列を回収し、それによってヒト抗体を産生させることをさらに含む。0134様々な実施形態において、前記ヒト重鎖定常領域は、IgM、IgD、IgA、IgEおよびIgGから選択される。様々な特定の実施形態において、前記IgGは、IgG1、IgG2、IgG3およびIgG4から選択される。様々な実施形態において、前記ヒト重鎖定常領域は、CH1、ヒンジ、CH2、CH3、CH4またはその組み合わせを含む。免疫グロブリンκ定常領域である。様々な実施形態において、前記細胞は、HeLa細胞、DU145細胞、Lncap細胞、MCF−7細胞、MDA−MB−438細胞、PC3細胞、T47D細胞、THP−1細胞、U87細胞、SHSY5Y(ヒト神経芽腫)細胞、Saos−2細胞、Vero細胞、CHO細胞、GH3細胞、PC12細胞、ヒト網膜細胞(例えば、PER.C6(商標)細胞)およびMC3T3細胞から選択される。特定の実施形態において、前記細胞は、CHO細胞である。01351つの態様において、対象となる抗原に対して特異的な逆キメラ齧歯動物−ヒト抗体を産生させるための方法を提供し、この方法は、本明細書に記載のマウスを該抗原で免疫する工程、該抗原に対して特異的な逆キメラマウス−ヒト抗体を産生するマウスから少なくとも1つの細胞を単離する工程、該抗原に対して特異的な該逆キメラマウス−ヒト抗体を産生する少なくとも1つの細胞を培養する工程、および該抗体を得る工程を含む。1つの実施形態において、前記逆キメラマウス−ヒト抗体は、マウスまたはラット重鎖定常遺伝子と融合するヒト重鎖可変ドメイン、およびマウスまたはラットまたはヒト軽鎖定常遺伝子と融合するヒト軽鎖可変ドメインを含む。01361つの実施形態において、前記抗原に対して特異的な前記逆キメラ齧歯動物−ヒト抗体を産生する少なくとも1つの細胞の培養は、前記マウスから単離された少なくとも1つの細胞から産生された少なくとも1つのハイブリドーマ細胞で行う。01371つの態様において、対象となる抗原に対して特異的な完全ヒト抗体を産生させるための方法を提供し、この方法は、本明細書に記載のマウスを該抗原で免疫する工程、該抗原に対して特異的な逆キメラ齧歯動物−ヒト抗体を産生するマウスから少なくとも1つの細胞を単離する工程、該抗原に対して特異的な該逆キメラ齧歯動物−ヒト抗体に由来する完全ヒト抗体を産生する少なくとも1つの細胞を産生させる工程、および該完全ヒト抗体を産生する少なくとも1つの細胞を培養する工程、および該完全ヒト抗体を得る工程を含む。0138様々な実施形態において、前記抗原に対して特異的な逆キメラ齧歯動物−ヒト抗体を産生するマウスから単離される少なくとも1つの細胞は、脾細胞またはB細胞である。0139様々な実施形態において、前記抗体は、モノクローナル抗体である。0140様々な実施形態において、前記対象となる抗原での免疫を、タンパク質、DNA、DNAとタンパク質の組み合わせ、または該抗原を発現する細胞を用いて行う。01411つの態様では、免疫グロブリン可変領域またはその断片をコードする核酸配列を作製するための、本明細書に記載のマウスの使用を提供する。1つの実施形態では、前記核酸配列を使用して、ヒト抗体またはその抗原結合断片を作製する。engager:BiTE)から選択される抗原結合タンパク質を作製する。01421つの態様では、機能的内因性マウスADAM6配列が無いマウスに異所性ADAM6配列を導入するための、本明細書に記載のマウスの使用を提供し、この使用は、本明細書に記載のマウスと、該機能的内因性マウスADAM6配列が無いマウスとを交配させることを含む。01431つの態様では、異所性ADAM6配列を有するマウスを作製するための、本明細書に記載のマウスからの遺伝子材料の使用を提供する。1つの実施形態において、前記使用は、本明細書に記載のマウスの細胞の核を使用する核移植を含む。1つの実施形態において、前記使用は、本明細書に記載のマウスの細胞を、該細胞に由来する動物を産生するためにクローングすることを含む。1つの実施形態において、前記使用は、前記異所性ADAM6配列を含むマウスを作製するためのプロセスにおける、本明細書に記載のマウスの精子または卵子の利用を含む。01441つの態様では、改変免疫グロブリン重鎖遺伝子座を含む妊性雄マウスを作製するための方法であって、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変を含む第一のマウス生殖細胞を、雄マウスにおいて機能的であるADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログもしくは断片を含む第二のマウス生殖細胞で受精させる工程;受精細胞を形成する工程;前記受精細胞を胚へと発生させる工程;および代理母において前記胚を妊娠させてマウスを得る工程を含む方法を提供する。01451つの実施形態において、前記受精は、雄マウスと雌マウスを交配させることによって達成される。1つの実施形態では、前記雌マウスが前記ADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログもしくは断片を含む。1つの実施形態では、前記雄マウスが前記ADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログもしくは断片を含む。01461つの態様では、免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変を含むゲノムを有するマウスの妊性を回復させるまたは強化するための、マウスADAM6タンパク質またはそのオルソログもしくはホモログまたは対応するADAM6タンパク質の機能的断片をコードする核酸配列の使用を提供し、この場合の改変は、内因性ADAM6機能を低減させるまたは消去する。01471つの実施形態では、前記核酸配列を前記マウスのゲノムの異所位置に組み込む。1つの実施形態では、前記核酸配列を前記マウスのゲノムの内因性免疫グロブリン遺伝子座に組み込む。特定の実施形態において、前記内因性免疫グロブリン遺伝子座は、重鎖遺伝子座である。1つの実施形態では、前記核酸配列を前記マウスのゲノムの内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の位置に組み込む。01481つの態様では、ヒト疾患または障害の処置のために、薬物(例えば、抗原結合タンパク質)を製造するための、または薬物(例えば、抗原結合タンパク質)の可変配列をコードする配列を製造するための、本明細書に記載のマウスの使用を提供する。本発明は、例えば以下の項目を提供する。(項目1)マウスであって、該マウスは、免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変を含むゲノムを有し、該改変は、内因性ADAM6機能の低減または消去を含み、そして該マウスは、マウスADAM6タンパク質またはそのオルソログもしくはホモログまたは対応するADAM6タンパク質の機能的断片をコードする核酸配列をさらに含む、マウス。(項目2)前記核酸配列が、異所位置に位置する、項目1に記載のマウス。(項目3)前記核酸配列が、内因性免疫グロブリン遺伝子座にある、項目1または2に記載のマウス。(項目4)前記核酸配列が、前記マウスゲノムの内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の位置に組み込まれている、項目1または2に記載のマウス。(項目5)前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座の前記改変が、1つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列の配置を含む、項目1〜4のいずれか一項に記載のマウス。(項目6)前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座の前記改変が、マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内の1つ以上の配列の、1つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列での置換を含む、項目1〜4のいずれか一項に記載のマウス。(項目7)前記免疫グロブリン重鎖遺伝子座の前記改変が、1つ以上の内因性重鎖V(VH)遺伝子セグメントの、1つ以上のヒト重鎖V(VH)遺伝子セグメントでの置換を含む、項目6に記載のマウス。置換を含む、項目1に記載のマウス。(項目9)前記核酸配列が、マウスADAM6aタンパク質および/もしくはADAM6bタンパク質、またはそのオルソログ、ホモログもしくは機能的断片をコードする、項目1〜8のいずれか一項に記載のマウス。(項目10)マウスの免疫グロブリン重鎖遺伝子座を改変するための方法であって、以下:(a)雄マウスにおいて内因性マウスADAM6活性の低減または消去を結果としてもたらす、該マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座の第一の改変を行う工程;および(b)雄マウスにおいて機能的であるADAM6活性を該マウスに付与する核酸配列を付加するための該マウスに対する第二の改変を行う工程を含む方法。(項目11)前記工程(b)の核酸配列が異所位置に付加される、項目10に記載の方法。(項目12)前記第一の改変が、1つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列の配置を含む、項目10または11に記載の方法。(項目13)前記第一の改変が、前記マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座内の1つ以上の配列の、1つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子配列での置換を含む、項目10または11に記載の方法。(項目14)前記第一の改変が、1つ以上の内因性VH遺伝子セグメントの、1つ以上のヒトVH遺伝子セグメントでの置換を含む、項目13に記載の方法。置換を含む、項目10に記載の方法。(項目16)前記第一および前記第二の改変が同時に行われる、項目10〜15のいずれか一項に記載の方法。(項目17)項目10〜16のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるマウス。(項目18)項目1〜9および17のいずれか一項に記載のマウスからの単離細胞。(項目19)項目1〜9および17のいずれか一項に記載のマウスからの単離組織。(項目20)ヒト−マウス逆キメラ抗体、完全ヒト抗体、完全ヒトFab断片および/または完全ヒトF(ab)2断片の産生のための、項目1〜9および17のいずれか一項に記載のマウスの使用。(項目21)抗原に対して特異的な逆キメラマウス−ヒト抗体を産生させるための方法であって、以下の工程:a)項目1〜9および17のいずれか一項に記載のマウスを該抗原で免疫する工程;b)該抗原に対して特異的な逆−キメラマウス−ヒト抗体を産生するマウスから少なくとも1つの細胞を単離する工程;およびc)工程b)の抗体を産生する少なくとも1つの細胞を培養し、そして該抗体を得る工程を含む方法。(項目22)工程c)における前記培養する工程が、工程b)において得た前記少なくとも1つの細胞から産生された少なくとも1つのハイブリドーマ細胞で行われる、項目21に記載の方法。(項目23)抗原に対して特異的な完全ヒト抗体を産生させるための方法であって、以下の工程:a)項目1〜9および17のいずれか一項に記載のマウスを該抗原で免疫する工程;b)該抗原に対して特異的な逆−キメラマウス−ヒト抗体を産生するマウスから少なくとも1つの細胞を単離する工程;c)工程b)の該抗体に由来し、該抗原に対して特異な完全ヒト抗体を産生する少なくとも1つの細胞を産生させる工程;およびd)工程c)の抗体を産生する少なくとも1つの細胞を培養する工程、および該抗体を得る工程を含む方法。(項目24)工程b)において得られる前記少なくとも1つの細胞が、脾細胞またはB細胞である、項目21および23のいずれか一項に記載の方法。(項目25)前記抗体がモノクローナル抗体である、項目21〜24のいずれか一項に記載の方法。(項目26)工程a)の前記抗原での免疫が、タンパク質、DNA、DNAとタンパク質の組み合わせ、または前記抗原を発現する細胞で行われる、項目21〜25のいずれか一項に記載の方法。(項目27)内因性ADAM6機能を低減させるまたは消去する免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変を含むゲノムを有するマウスの妊性を回復または向上させるための、マウスADAM6タンパク質またはそのオルソログもしくはホモログまたは対応するADAM6タンパク質の機能的断片をコードする核酸配列の使用。(項目28)前記核酸配列が、前記マウスの前記ゲノムの異所位置に組み込まれている、項目27に記載の使用。(項目29)前記核酸配列が、前記マウスの前記ゲノムの内因性免疫グロブリン遺伝子座に組み込まれている、項目27または28に記載の使用。(項目30)前記核酸配列が、前記マウスのゲノムの内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の位置に組み込まれている、項目27または28に記載の使用。(黒塗りの記号)の直接ゲノム置換の一般説明図(縮尺不定)を示すものである。(黒塗りの記号)の直接ゲノム置換の一般説明図(縮尺不定)を示すものである。直接ゲノム置換についての最初の3工程(A〜C)の詳細な説明図(縮尺不定)を示すものである。3’マウスホモロジーアームを有する。後続のターゲティングベクターから挿入されるヒト(白抜きの記号)およびマウス(黒塗りの記号)免疫グロブリン遺伝子セグメント、追加の選択カセット(白抜きの長方形)および部位特異的組換え部位(白抜きの三角形)が示されている。直接ゲノム置換についての追加の6工程(D〜I)の詳細な説明図(縮尺不定)を示すものである。5’マウスホモロジーアーム、選択カセット(白抜きの長方形)、196kbヒトゲノム断片および62kbヒトホモロジーアームを有し、該ヒトホモロジーアームは、示されている最初のヒト重鎖遺伝子セグメント挿入物の5’端とオーバーラップしており、該ヒト遺伝子セグメントに対して5’に部位特異的組換え部位(白抜きの三角形)がある。後続のターゲティングベクターによって挿入されるヒト(白抜きの記号)およびマウス(黒塗りの記号)免疫グロブリン遺伝子セグメントならびに追加の選択カセット(白抜きの長方形)が示されている。直接ゲノム置換についての最初の3工程(A〜C)の詳細な説明図(縮尺不定)を示すものである。前記ターゲティングベクターから挿入される選択カセット(白抜きの長方形)および部位特異的組換え部位(白抜きの三角形)が示されている。直接ゲノム置換についての追加の5工程(D〜H)の詳細な説明図(縮尺不定)を示すものである。後続のターゲティングベクターによって挿入されるヒト(白抜きの記号)およびマウス(黒塗りの記号)免疫グロブリン遺伝子セグメントならびに追加の選択カセット(白抜きの長方形)が示されている。図3Aは、標的胚性幹(ES)細胞におけるヒト重鎖遺伝子配列の挿入およびマウス重鎖遺伝子配列の喪失を検出するための定量的PCR(qPCR)プライマー/プローブセットの場所を含む、スクリーニング戦略の一般説明図(縮尺不定)を示すものである。未改変マウス染色体(上部)および正しくターゲティングされた染色体(下部)上の欠失領域(「喪失」プローブCおよびD)、挿入された領域(「hIgH」プローブGおよびH)および隣接領域(「保持」プローブA、B、EおよびF)のためのqPCRプライマー/プローブセットを用いた、ES細胞およびマウスにおける第一のヒト重鎖遺伝子挿入についてのスクリーニング戦略が示されている。図3Bは、ヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子セグメントの第一の挿入についての、親ES細胞および改変ES細胞における実測プローブコピー数の代表的算定を示すものである。プローブAからFについての実測プローブコピー数は、2/2ΔΔCtと算定された。ΔΔCtは、ave[ΔCt(試料)−medΔCt(対照)]として算定され、この式中のΔCtは、被験プローブと基準プローブ(アッセイに依存して4と6の間の基準プローブ)の間のCtの差である。用語medΔCt(対照)は、親ES細胞からの多数(>60)の非標的DNA試料の中央値ΔCtである。各改変ES細胞クローンを6つひと組(sextuplicate)でアッセイした。親ES細胞におけるIgHプローブGおよびHのコピー数を算定するために、これらのプローブが改変ES細胞では1のコピー数を有すると仮定し、増幅が観察されなかったとしても35の最大Ctを用いた。図3Cは、プローブDおよびHのみを使用して算定した各遺伝子型の4匹のマウスについてのコピー数の代表算定を示すものである。野生型マウス:WTマウス;ヒト免疫グロブリン遺伝子セグメントの最初の挿入物に関してヘテロ接合性のマウス:HETマウス;ヒト免疫グロブリン遺伝子セグメントの最初の挿入物に関してホモ接合性のマウス:Homoマウス。図4Aは、細菌相同組換え(BHR)による3hVHBACvecの構築に用いた3工程についての詳細な説明図(縮尺不定)を示すものである。ターゲティングベクターから挿入されたヒト(白抜きの記号)およびマウス(黒塗りの記号)免疫グロブリン遺伝子セグメント、選択カセット(白抜きの長方形)および部位特異的組換え部位(白抜きの三角形)が示されている。図4Bは、Notl消化後の3つのBACクローン(B1、B2およびB3)のパルスフィールドゲル電気泳動(PFGE)を示すものである。BioLabs、マサチューセッツ州イプスウィッチ)である。図5Aは、漸増量のヒト免疫グロブリン重鎖遺伝子セグメントでのマウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座の逐次的改変の概略説明図(縮尺不定)を示すものである。重鎖ヒト化の3つの異なる段階それぞれからホモ接合型マウスを作製した。白抜きの記号はヒト配列を示し、黒塗りの記号はマウス配列を示す。図5Bは、漸増量のヒト免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子セグメントでのマウス免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座の逐次的改変の概略説明図(縮尺不定)を示すものである。κ軽鎖ヒト化の3つの異なる段階それぞれからホモ接合型マウスを作製した。白抜きの記号はヒト配列を示し、黒塗りの記号はマウス配列を示す。図6は、野生型およびVELOCIMMUNE(登録商標)ヒト化マウスにおけるB細胞集団のFACSドットプロットを示すものである。野生型(wt)、VELOCIMMUNE(登録商標)1(V1)、VELOCIMMUNE(登録商標)2(V2)またはVELOCIMMUNE(登録商標)3(V3)マウスの脾臓(最上段、上から三段目および最下段)または鼠蹊リンパ節(上から二段目)からの細胞を、表面IgMを発現するB細胞(最上段、および上から二段目)、κもしくはλ軽鎖のいずれかを含有する表面免疫グロブリン(上から三段目)または特定のハプロタイプの表面IgM(最下段)について染色し、集団をFACSによって分離した。図7Aは、接合部の多様性およびヌクレオチド付加の証拠となる、VH−DH−JH(CDR3)接合部周辺のランダムに選択したVELOCIMMUNE(登録商標)抗体の代表重鎖CDR3配列を示すものである。重鎖CDR3配列をDH遺伝子セグメント使用量(usage)に従ってグループ分けし、その生殖細胞系を各グループの上に太字で提供する。各重鎖CDR3配列についてのVH遺伝子セグメントを各配列の5’端のカッコ内に記入する(例えば、3−72は、ヒトVH3−72である)。各重鎖CDR3についてのJH遺伝子セグメントを各配列の3’端のカッコ内に記入する(例えば、3は、ヒトJH3である)。示されている各配列についての配列番号は、上から下に進んで、次のとおりである:配列番号21;配列番号22;配列番号23;配列番号24;配列番号25;配列番号26;配列番号27;配列番号28;配列番号29;配列番号30;配列番号31;配列番号32;配列番号33;配列番号34;配列番号35;配列番号36;配列番号37;配列番号38;配列番号39。図7Bは、接合部の多様性およびヌクレオチド付加の証拠となる、Vκ−Jκ(CDR3)接合部周辺のランダムに選択したVELOCIMMUNE(登録商標)抗体の代表軽鎖CDR3配列を示すものである。各軽鎖CDR3配列についてのVκ遺伝子セグメントを各配列の5’端のカッコ内に記入する(例えば、1−6は、ヒトVκ1−6である)。各軽鎖CDR3についてのJκ遺伝子セグメントを各配列の3’端のカッコ内に記入する(例えば、1は、ヒトJκ1である)。示されている各配列についての配列番号は、上から下に進んで、次のとおりである:配列番号40;配列番号41;配列番号42;配列番号43;配列番号44;配列番号45;配列番号46;配列番号47;配列番号48;配列番号49;配列番号50;配列番号51;配列番号52;配列番号53;配列番号54;配列番号55;配列番号56;配列番号57;配列番号58。図8は、38(非免疫IgM)、28(非免疫IgG)、32(IgGからの非免疫Igκ)、36(免疫IgG)または36(IgGからの免疫Igκ)配列セットの中の各ヌクレオチド(NT;左縦列)およびアミノ酸(AA;右縦列)位置で変化した配列のパーセントとして(マッチする生殖細胞系配列へのアラインメント後に)スコアを付けたVELOCIMMUNE(登録商標)抗体の重鎖および軽鎖の体細胞超変異頻度を示すものである。陰影のあるバーは、CDRの場所を示す。図9Aは、野生型マウス(白抜きのバー)またはVELOCIMMUNE(登録商標)マウス(黒塗りのバー)におけるIgMおよびIgGアイソタイプについての血清免疫グロブリンのレベルを示すものである。図9Bは、野生型マウス(白抜きのバー)またはVELOCIMMUNE(登録商標)マウス(黒塗りのバー)におけるIgAアイソタイプについての血清免疫グロブリンのレベルを示すものである。図9Cは、野生型マウス(白抜きのバー)またはVELOCIMMUNE(登録商標)マウス(黒塗りのバー)におけるIgEアイソタイプについての血清免疫グロブリンのレベルを示すものである。図10Aは、IL−6Rのエクトドメインでの2ラウンドの免疫後(採血試料(bleed)1)または3ラウンドの免疫後(採血試料2)の7匹のVELOCIMMUNE(登録商標)(VI)および5匹の野生型(WT)マウスからの血清のインターロイキン−6受容体(IL−6R)に対する抗原特異的IgG力価を示すものである。図10Bは、7匹のVELOCIMMUNE(登録商標)(VI)マウスおよび5匹の野生型(WT)マウスからの抗IL−6R特異的IgGアイソタイプ特異的力価を示すものである。図11Aは、VELOCIMMUNE(登録商標)マウスにおいて産生された抗インターロイキン−6受容体モノクローナル抗体の親和性分布を示すものである。図11Bは、VELOCIMMUNE(登録商標)(VI)マウスおよび野生型(WT)マウスにおいて産生された抗インターロイキン−6受容体モノクローナル抗体の抗原特異的遮断を示すものである。図12は、マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座におけるマウスADAM6aおよびADAM6b遺伝子の概略説明図(縮尺不定)を示すものである。マウスADAM6aおよびADAM6bの挿入のために使用したターゲティングベクター(mADAM6ターゲティングベクター)が示されており、このターゲティングベクターは、5’および3’端に工学的に作製された制限酵素認識部位を含む部位特異的組換え部位(Frt)が隣接する選択カセット(HYG:ハイグロマイシン)を有する。図13は、ヒト重鎖可変遺伝子セグメント1−2(VH1−2)と6−1(VH6−1)の間にあるヒトADAM6偽遺伝子(hADAM6Ψ)の概略説明図(縮尺不定)を示すものである。ヒトADAM6偽遺伝子を欠失させ、ヒト重鎖遺伝子座にユニークな制限酵素認識部位を挿入する細菌相同組換えのためのターゲティングベクター(hADAM6Ψターゲティングベクター)が示されており、このターゲティングベクターは、5’および3’端に工学的に作製された制限酵素認識部位を含む部位特異的組換え部位(loxP)が隣接する選択カセット(NEO:ネオマイシン)を有する。部位特異的組換え部位が隣接する選択カセットを含む、マウスADAM6aおよびADAM6b遺伝子をコードするゲノム断片を含有する、結果として得られる標的ヒト化重鎖遺伝子座の説明図(縮尺不定)が示されている。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の骨髄中のIgMおよびB220の表面発現についてのシングレット(singlet)でゲートしたリンパ球のFACS等高線図を示すものである。未熟(B220intIgM+)および成熟(B220highIgM+)B細胞の百分率を各等高線図に記入する。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の大腿骨から単離した骨髄中の未熟(B220intIgM+)および成熟(B220highIgM+)B細胞の総数を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の骨髄中のc−kitおよびCD43の表面発現についてのCD19+ゲートB細胞のFACS等高線図を示すものである。プロB(CD19+CD43+ckit+)細胞およびプレB(CD19+CD43−ckit−)細胞の百分率を各等高線図のそれぞれ右上および左下象限(quadrant)に記入する。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の大腿骨から単離した骨髄中のプロB(CD19+CD43+ckit+)細胞およびプレB(CD19+CD43−ckit−)細胞の総数を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の骨髄中のCD19およびCD43の表面発現についてのシングレットでゲートしたリンパ球のFACS等高線図を示すものである。未熟B(CD19+CD43−)細胞、プレB(CD19+CD43int)細胞およびプロB(CD19+CD43+)細胞の百分率を各等高線図に記入する。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の骨髄中の未熟B(CD19+CD43−)細胞およびプレB(CD19+CD43int)細胞のヒストグラムを示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の脾細胞におけるCD19およびCD3の表面発現についてのシングレットでゲートしたリンパ球のFACS等高線図を示すものである。B(CD19+CD3−)細胞およびT(CD19−CD3+)細胞の百分率を各等高線図に記入する。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の脾臓におけるIgλおよびIgκ軽鎖の表面発現についてのCD19+ゲートB細胞のFACs等高線図を示すものである。Igλ+(左上象限)B細胞およびIgκ+(右下象限)B細胞の百分率を各等高線図に記入する。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の脾臓におけるCD19+B細胞の総数を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の脾臓におけるIgDおよびIgMの表面発現についてのCD19+ゲートB細胞のFACs等高線図を示すものである。成熟B細胞(CD19+IgDhighIgMint)の百分率を各等高線図に記入する。右の等高線図上の矢印は、IgMおよびIgD表面発現に関連したB細胞の成熟過程を図示するものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+)の脾臓におけるB細胞の総数を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+;n=5)からの、第1回および第2回採血試料についての抗体力価を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+;n=10)からの、第1回および第2回採血試料についての抗体力価を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+;n=12)からの、第1回および第2回採血試料についての抗体力価を示すものである。関してホモ接合性のマウス(H+/+A6resκ+/+;n=12)からの、第1回および第2回採血試料についての抗体力価を示すものである。図10A図10B図11A図11B図12図13図14A図14B図15A図15B0150本発明は、記載する特定の方法および実験条件に限定されない。かかる方法および条件は変わることがあるからである。本発明の範囲を特許請求の範囲によって定義するので、本明細書において用いる専門用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としたものであり、限定することを意図したものではないことを理解されたい。0151別様に定義しない限り、本明細書において用いるすべての用語および句は、その用語または句が用いられている文脈から相反することが明確に指摘されるまたは明確に分かる場合を除き、その用語および句が当該技術分野において獲得している意味を含む。本明細書に記載するものに類似したまたは等価の任意の方法および材料を本発明の実施または試験に用いることができるが、今は特定の方法および材料を記載する。言及するすべての出版物は、参照により本明細書に援用されている。0152遺伝子セグメントの量を指すために用いるときの句「実質的な」または「実質的に」(例えば、「実質的にすべての」V遺伝子セグメント)は、機能的遺伝子セグメントと非機能的遺伝子セグメントの両方を含み、および様々な実施形態において、例えば、すべての遺伝子セグメントの80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上または99%以上を含む;様々な実施形態において、「実質的にすべての」遺伝子セグメントは、例えば、機能的(すなわち、非偽遺伝子)遺伝子セグメントの少なくとも95%、96%、97%、98%または99%を含む。0153用語「置換」は、ゲノム内の配列を該ゲノム配列の遺伝子座において異種配列(例えば、マウスにおけるヒト配列)で置換するようなやり方でDNA配列を細胞のゲノムに配置する場合のものを含む。そのようにして配置されたDNAは、そのようにして配置された配列を得るために使用した源DNAの一部である1つ以上の調節配列(例えば、プロモーター、エンハンサー、5’または3’非翻訳領域、適切な組換えシグナル配列など)を含み得る。様々な実施形態において、前記置換は、そのように置かれた(placed)DNA配列(異種配列を含む)から遺伝子産物の産生をもたらす結果となる、異種配列に代えての内因性配列の置き換えであり、該内因性配列の発現ではない;前記置換は、内因性ゲノム配列の、該内因性ゲノム配列によってコードされているタンパク質と類似の機能を有するタンパク質をコードするDNA配列での置換である(例えば、前記内因性ゲノム配列は、免疫グロブリン遺伝子またはドメインをコードしており、前記DNA断片は、一つ以上のヒト免疫グロブリン遺伝子またはドメインをコードする)。様々な実施形態において、内因性遺伝子またはその断片は、対応するヒト遺伝子またはその断片で置換される。対応するヒト遺伝子またはその断片は、置換される内因性遺伝子もしくは断片のオルソログである、置換される内因性遺伝子もしくは断片のホモログである、または置換される内因性遺伝子もしくは断片と構造および/もしくは機能の点で実質的に同一もしくは同じである、ヒト遺伝子または断片である。0154遺伝モデルとしてのマウスは、トランスジェニックおよびノックアウト技術によって大きく向上され、これらの技術により特定の遺伝子の指向性過発現または欠失の効果の研究が可能になった。あらゆるその利点にもかかわらず、前記マウスは、マウスをヒト疾患についての不完全なモデルにならしめるおよびヒト治療薬を試験するまたはそれらを作製するための不完全なプラットホームにならしめる遺伝的障害をやはり提示する。420:520−562)が、可能性のある治療薬は、多くの場合、所期のヒト標的のマウスオルソログと交叉反応することができない、または不適切に交叉反応する。この問題を未然に防ぐために、選択標的遺伝子を「ヒト化」することができる、すなわち、マウス遺伝子を消去して、対応するオルソロガスヒト遺伝子配列により置換することができる(例えば、米国特許第6,586,251号、同第6,596,541号および同第7,105,348号明細書;これらは参照により本明細書に援用されている)。43:1741−1750参照)。これらの努力は、サイズ制限によって妨げられた;従来のノックアウト技術は、大きなマウス遺伝子を該遺伝子の大きなヒトゲノムカウンターパートで直接置換するのに十分なものではなかった。該マウス遺伝子の同じまさにその遺伝子の場所で(すなわち内因性マウス遺伝子座で)ヒトカウンターパート遺伝子により内因性マウス遺伝子を直接置換する直接相同置換の直接的なアプローチは、技術的な難しさのため、滅多に試みられない。今まで、直接置換に対する努力は手の込んだ厄介な手順を必要とし、それ故、取り扱うことができる遺伝子材料の長さおよび操作することができる精度が限定された。1:231−236)。25:1134−1143)。97:722−727)。354:821−831)。上で論じたように、これらのマウスは、野生型マウスと比較して、損なわれたB細胞発生および免疫不全を示す。かかる問題は、活発な体液性応答を維持するおよびしたがって一部の抗原に対する完全ヒト抗体を産生するマウスの能力を潜在的に制限する。situヒト化によって修正することができる。これは、マウス定常領域の保持に基づきマウス環境で正常な相互作用および選択が可能であろう「逆キメラ」(すなわち、ヒトV:マウスC)抗体を作製するマウスを有効に生じさせる結果となるであろう。かかる逆キメラ抗体は、治療のために完全ヒト抗体に容易に再配列することができる。0156内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座における置換と共に、または免疫グロブリン軽鎖導入遺伝子(例えば、キメラ免疫グロブリン軽鎖導入遺伝子もしくは完全ヒト完全マウスなど)と共に、前記内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座における異種(例えば、別の種からの)免疫グロブリン配列による置換を含む遺伝子改変動物を作製することができる。前記異種免疫グロブリン重鎖配列が由来する種は多種多様であり得、免疫グロブリン軽鎖配列置換に利用される免疫グロブリン軽鎖配列、または免疫グロブリン軽鎖導入遺伝子に関しても多種多様であり得る。えば、V、Dおよび/またはJセグメントは、ヒトまたは非ヒト動物から得られる。(例えば、ニワトリ)が挙げられる。非ヒト動物としては、例えば、哺乳類が挙げられる。哺乳類としては、例えば、非ヒト霊長類、ヤギ、ヒツジ、ブタ、イヌ、ウシ(例えば、雌ウシ、雄ウシ、バッファロー)、シカ、ラクダ、フェレットおよび齧歯動物および非ヒト霊長類(例えば、チンパンジー、オランウータン、ゴリラ、マーモセット、アカゲザル、ヒヒ)が挙げられる。好適な非ヒト動物は、ラット、マウスおよびハムスターを含む齧歯動物のファミリーから選択される。1つの実施形態において、前記非ヒト動物はマウスである。この文脈から明白であるように、様々な非ヒト動物(例えば、サメ、エイ、哺乳類(例えば、ラクダ、齧歯動物、例えばマウスおよびラット))を可変ドメインまたは可変領域遺伝子セグメントの源として使用することができる。0158前記文脈によると、非ヒト動物は、可変配列またはセグメントと併用される定常領域配列の源としても使用される。ヒトまたは非ヒト可変配列に作動可能に連結される導入遺伝子(例えば、齧歯動物、例えばマウスもしくはラットもしくはハムスター、定常配列に作動可能に連結されたヒトまたは非ヒト霊長類可変配列)において齧歯動物定常配列を使用することができる。作動可能に連結させる。作動可能に連結または融合させる。0159特定の実施形態では、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座におけるVH、DHおよびJHセグメントの、1つ以上のヒトVH、DHおよびJHセグメントでの置換を含み、該1つ以上のヒトVH、DHおよびJHセグメントが、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子に作動可能に連結されているものであるマウスを提供し、この場合のマウスは、内因性免疫グロブリン遺伝子座以外の遺伝子座に導入遺伝子を含み、該導入遺伝子は、マウスまたはラットまたはヒト定常領域に作動可能に連結された非再構成または再構成ヒトVLおよびヒトJLセグメントを含む。situ遺伝子置換するための方法を記載する。該遺伝子のヒトカウンターパートでの正確に置換することを記載する。結果として、マウス定常領域を維持しながら、マウスの生殖細胞系免疫グロブリン可変レパートリーすべてが等価のヒト生殖細胞系免疫グロブリン可変配列で正確に置換されたマウスを生み出した。前記ヒト可変領域をマウス定常領域に連結させて、再構成して生理的に適切なレベルで発現するキメラヒト−マウス免疫グロブリン遺伝子座を形成する。発現する抗体は、「逆キメラ」である。それらはヒト可変領域配列およびマウス定常領域配列を含む。ヒト可変領域およびマウス定常領域を有する抗体を発現するヒト化免疫グロブリン可変領域を有するこれらのマウスは、VELCOIMMUNE(登録商標)マウスと呼ばれる。前記ヒト化マウスは、B細胞発生の全ての段階で正常な細胞集団を提示する。前記ヒト化マウスは、正常なリンパ器官形態を示す。VELOCIMMUNE(登録商標)マウスの抗体配列は、正常なV(D)J再構成および正常な体細胞超変異頻度を示す。これらのマウスにおける抗体集団は、正常なクラススイッチ(例えば、正常なアイソタイプシススイッチ)の結果として生ずるアイソタイプ分布を表わす。VELOCIMMUNE(登録商標)マウスを免疫することにより、治療候補としての使用に好適なヒト免疫グロブリン可変ドメインを有する大量の多様な抗体レパートリーを産生する頑強な体液性免疫応答が得られる。このプラットホームは、薬学的に許容され得る抗体および他の抗原結合タンパク質を作製するための豊富な自然親和性成熟ヒト免疫グロブリン可変領域配列源を提供する。0162マウス免疫グロブリン可変配列の、ヒト免疫グロブリン可変配列での正確な置換により、VELOCIMMUNE(登録商標)マウスを作製することができる。recombineering)による、重および軽鎖遺伝子座における内因性マウス免疫グロブリン配列の、等価ヒト免疫グロブリン配列での正確の置換は、マウスとヒトの間の免疫グロブリン遺伝子座の分岐進化のため、一定の課題を提起し得る。免疫グロブリン遺伝子座内に散在する遺伝子間配列は、マウスとヒトの間で同一ではなく、一部の状況では、機能的に等価でないこともある。マウスとヒトの間の免疫グロブリン遺伝子座におけるその相違は、特に内因性マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座の一定の部分をヒト化または操作するとき、やはりヒト化マウスに異常を生じさせる結果となる場合がある。マウス免疫グロブリン重鎖遺伝子座における一部の改変は有害である。有害な改変としては、例えば、改変されたマウスの交配および子孫産生能力の喪失を挙げることができる。situ置換を行った(図1Aおよび図1B)。オーバーラップ断片を担持する13のキメラBACターゲティングベクターの段階的挿入により、マウスES細胞に導入した。図1A図1B0163マウス免疫グロブリン遺伝子のヒト化は、今日までのマウスゲノムへの最大の遺伝子改変を代表する。ランダムに組み込まれたヒト免疫グロブリン導入遺伝子での以前の努力は、(上で論じた)ある程度の成果を上げたが、前記マウス免疫グロブリン遺伝子の、該遺伝子のヒトカウンターパートでの直接置換は、ほかの点では正常なマウスにおいて完全ヒト抗体を効率的に産生することができる効率を劇的に増加させる。かかるマウスは、無能化された内因性遺伝子座および完全ヒト抗体導入遺伝子を保有するマウスと比較して、実質的に任意の抗原での免疫後に得ることができる完全ヒト抗体の多様性の劇的増大を示す。様々な分化段階で有意に低減されたB細胞集団を示すランダムに組み込まれたヒト導入遺伝子を有するマウスとは対照的に、置換されヒト化された遺伝子座の多彩なバージョンが完全に正常な成熟および未熟B細胞レベルを示す。ヒト遺伝子導入マウスにおけるヒト遺伝子セグメント数を増加させる努力は、かかる欠陥を低減させたが、拡張されたそれらの免疫グロブリンレパートリーは、野生型マウスと比較してB細胞集団の低減を全部は修正しなかった。0164免疫グロブリン遺伝子座が置換されたマウス(すなわち、VELOCIMMUNE(登録商標)マウス)において観察される野生型に近い体液性免疫機能にもかかわらず、ランダムに組み込まれた導入遺伝子を利用する一部のアプローチでは遭遇しない、免疫グロブリンの直接置換を利用すると遭遇する他の課題がある。マウスとヒトの間の免疫グロブリン遺伝子座の遺伝子組成の相違は、免疫グロブリン遺伝子セグメントが置換されたマウスの繁殖にとって有益な配列の発見をもたらした。具体的には、前記内因性免疫グロブリン遺伝子座内にあるマウスADAM遺伝子は、妊性におけるその役割のため、免疫グロブリン遺伝子座が置換されたマウスに最適に存在する。0165マウスADAM6のゲノムの場所および機能いずれかの機能的ADAM6タンパク質を発現する能力が無い雄マウスは、驚くべきことに、交配して子孫を産生する該マウスの能力の欠陥を示す。これらのマウスには、すべてのまたは実質的にすべてのマウス免疫グロブリン可変領域遺伝子セグメントをヒト可変領域遺伝子セグメントで置換することによって機能的ADAM6タンパク質を発現する能力が無い。領域内にあるため、このADAM6機能の喪失が生ずる結果となる。すべてのまたは実質的にすべての内因性マウス重鎖可変遺伝子セグメントの、ヒト重鎖可変遺伝子セグメントでの置換に関してホモ接合性であるマウスを交配させるために、それぞれが該置換に関してホモ接合性であり、生産的交配を待つ雄と雌を供給することは、一般に厄介なアプローチである。好結果の同腹子は、頻度が低く、サイズが小さい。その代り、前記置換に関してヘテロ接合性の雄を用いて、前記置換に関してホモ接合性の雌と交配させて、前記置換に対してヘテロ接合性の後代を産生し、その後、それらからホモ接合型マウスを繁殖させた。前記雄マウスの妊性の喪失についての可能性のある原因は、ホモ接合型雄マウスにおける機能的ADAM6タンパク質の不在であると本発明者らは決定した。0166様々な態様において、損傷した(すなわち、非機能的またはわずかに機能的な)ADAM6遺伝子を含む雄マウスは、妊性の低減または消去を示す。マウス(および他の齧歯動物)ではADAM6遺伝子が免疫グロブリン重鎖遺伝子座にあるため、本発明者らは、置換された免疫グロブリン重鎖遺伝子座を含むマウスを繁殖させるために、または該マウスの系統を作り、維持するために、様々な改変交配または繁殖スキームを利用することを決定した。置換に関してホモ接合性の雄マウスの低い妊性または不妊性は、マウス系統のかかる改変の維持を困難にする。様々な実施形態において、前記系統の維持は、前記置換に関してホモ接合性の雄マウスによって示される不妊問題の回避を含む。01671つの態様では、本明細書に記載のマウスの系統を維持するための方法を提供する。マウスの前記系統は、異所性ADAM6配列を含む必要がなく、様々な実施形態において、マウスの前記系統は、ADAM6のノックアウト(例えば、機能的ノックアウト)に関してホモ接合性またはヘテロ接合性である。0168前記マウス系統は、雄マウスにおいて妊性の低減または喪失を生じさせる結果となる内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変を含む。1つの実施形態において、前記改変は、ADAM6遺伝子の調節領域および/またはコーディング領域の欠失を含む。特定の実施形態において、前記改変は、その改変を含む雄マウスの妊性を低減させるまたは消去する内因性ADAM6遺伝子(調節領域および/またはコーディング領域)の改変を含む;特定の実施形態において、前記改変は、その改変に関してホモ接合性である雄マウスの妊性を低減させるまたは消去する。01691つの実施形態において、前記マウス系統は、ADAM6遺伝子のノックアウト(例えば、機能的ノックアウト)または欠失に関してホモ接合性またはヘテロ接合性である。01701つの実施形態では、前記改変に関してホモ接合性またはヘテロ接合性であるマウスから細胞を単離すること、および宿主胚において前記ドナー細胞を用いること、および代理母において前記宿主胚およびドナー細胞を妊娠させること、および前記遺伝子改変を含む後代を前記代理母から得ることによって、前記マウス系統を維持する。1つの実施形態において、前記ドナー細胞は、ES細胞である。1つの実施形態において、前記ドナー細胞は、多能性細胞、例えば導入多能性細胞である。01711つの実施形態では、前記改変に関してホモ接合性またはヘテロ接合性であるマウスから、前記改変を含む核酸配列を単離すること、および前記核酸配列を宿主核に導入すること、および好適な動物において前記核酸配列および前記宿主核を含む細胞を妊娠させることによって、前記マウス系統を維持する。1つの実施形態では、前記核酸配列を宿主卵母細胞の胚に導入する。01721つの実施形態では、前記改変に関してホモ接合性またはヘテロ接合性であるマウスから核を単離すること、および前記核を宿主細胞に導入すること、および好適な動物において前記核および宿主細胞を妊娠させて、前記改変に関してホモ接合性またはヘテロ接合性である後代を得ることによって、前記マウス系統を維持する。vitro受精(IVF)を用いることによって、前記マウス系統を維持する。1つの実施形態において、前記雄マウスは、前記遺伝子改変に関してヘテロ接合性である。1つの実施形態において、前記雄マウスは、前記遺伝子改変に関してホモ接合性である。01741つの実施形態では、前記遺伝子改変に関してヘテロ接合性である雄マウスを雌マウスと交配させて、前記遺伝子改変を含む後代を得ること、前記遺伝子改変を含む雄および雌後代を同定すること、および前記遺伝子改変に関してヘテロ接合性である雄を、野生型である、前記遺伝子改変に関してホモ接合性であるまたはヘテロ接合性である雌との交配に用いて、前記遺伝子改変を含む後代を得ることによって、前記マウス系統を維持する。関してヘテロ接合性の雌、または前記遺伝子改変に関してホモ接合性の雌とを交配させる工程を繰り返して、前記マウス系統での前記遺伝子改変を維持する。1つ以上のヒト免疫グロブリン重鎖配列での置換を含むマウス系統を維持するための方法であって、前記マウス系統を交配させて、ヘテロ接合型雄マウスを産生する工程を含み、前記ヘテロ接合性雄マウスを交配させて、前記系統において前記遺伝子改変を維持する方法を提供する。特定の実施形態において、前記系統は、ホモ接合性雄と野生型雌、または前記遺伝子改変に関してホモ接合性もしくはヘテロ接合性の雌とのいずれの交配によっても維持されない。Metalloprotease(ディスインテグリンおよびメタロプロテアーゼ)の頭文字である。タンパク質のADAMファミリーは、大きく、多様であり、細胞接着をはじめとする多様な機能を有する。ADAMファミリーの一部のメンバーは、精子形成および受精に関与する。ADAM2は、精子−卵子相互作用に関与するタンパク質ファーティリンのサブユニットをコードする。ADAM3、すなわちシリテスティンは、透明帯への精子の結合に必要であるようである。ADAM2またはADAM3いずれかの不在は不妊性を生じさせる結果となる。ADAM2、ADAM3およびADAM6は、マウス精子細胞の表面で複合体を形成すると仮定されている。ヒトVH遺伝子セグメントVH1−2とVH6−1の間で通常見出されるヒトADAM6遺伝子は、偽遺伝子であるようである(図12)。マウスには2つのADAM6遺伝子−ADAM6aおよびADAM6b−があり、これらは、マウスVH遺伝子セグメントとDH遺伝子セグメントの間の遺伝子間領域において見つけられ、前記マウスにおいて、ADAM6a遺伝子およびADAM6b遺伝子は、周囲の免疫グロブリン遺伝子セグメントのものとは反対の転写配向に配向する(図12)。マウスの場合、正常な受精には機能的ADAM6遺伝子座が明らかに要求される。そこで、機能的ADAM6遺伝子座または配列は、内因性ADAM6遺伝子座が欠けているまたは非機能的内因性ADAM6遺伝子座を有する雄マウスにおいて示される受精の徹底的低減を補うまたはレスキューすることができる、ADAM6遺伝子座または配列を指す。図120177ADAM6aおよびADAM6bをコードする、マウスにおける前記遺伝子間配列の位置が、内因性マウス重鎖を改変するとき該遺伝子間配列に改変を受けやすくさせる。VH遺伝子セグメントを欠失させるもしくは置換するとき、またはDH遺伝子セグメントを欠失させるもしくは置換するとき、結果として得られるマウスは重度の妊性欠損を示す確率が高い。この欠損を補償するために、内因性マウスADAM6遺伝子座の改変に起因するADAM6活性の喪失を補うタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むようにマウスを改変する。様々な実施形態において、補足性ヌクレオチド配列は、妊性欠損をレスキューするマウスADAM6a、マウスADAM6b、またはそのホモログもしくはオルソログもしくは機能的断片をコードするものである。0178妊性をレスキューする前記ヌクレオチド配列を任意の好適な位置に配置することができる。前記配列を前記遺伝子間領域に配置することができ、またはゲノム内の任意の好適な位置に(すなわち、異所的に)配置することができる。1つの実施形態では、前記ヌクレオチド配列を、マウスゲノムにランダムに組み込む導入遺伝子に導入することができる。1つの実施形態では、前記配列をエピソームで、すなわちマウス染色体上ではなく別々の核酸上で、維持することができる。ヌクレオチド配列のターゲティングは、例えば米国特許第7,473,557号明細書に記載されており、この参考文献は参照により本明細書に援用されている。0179あるいは、妊性をレスキューする前記ヌクレオチド配列を誘導性プロモーターとカップリングさせて、適切な細胞および/または組織、例えば生殖組織、での最適な発現を促進することができる。例示的誘導性プロモーターとしては、物理的手段によって活性化されるプロモーター(例えば、熱ショックプロモーター)および/または化学的手段によって活性化されるプロモーター(例えば、IPTGもしくはテトラサイクリン)が挙げられる。0180さらに、前記ヌクレオチド配列の発現を他の遺伝子に関連づけて、特定の発生段階または特定の組織内での発現を実現することができる。かかる発現は、前記ヌクレオチド配列を、特定の発生段階で発現する遺伝子のプロモーターと作動可能に連結させることによって実現することができる。宿主種のゲノムへと工学的に作製された1つの種からの免疫グロブリン配列を、その宿主種からのCD19遺伝子(B細胞特異的遺伝子)のプロモーター配列と作動可能に連結させる。免疫グロブリンが発現する正確な発生段階でのB細胞特異的発現が実現される。0181挿入されたヌクレオチド配列の頑強な発現を実現するためのさらにもう1つの方法は、構成的プロモーターの利用である。例示的構成的プロモーターとしては、SV40、CMV、UBC、EF1A、PGKおよびCAGGが挙げられる。同様に、所望のヌクレオチド配列を選択された構成的プロモーターと作動可能に連結させ、それにより、該ヌクレオチド配列によってコードされているタンパク質(単数または複数)の高い発現レベルが得られる。0182用語「異所性」は、自然界で通常は遭遇しない位置への転位または配置(例えば、核酸配列の、該核酸配列が野生型マウスにおいて見出されるのと同じ位置でない位置への配置)を含むことを意図したものである。様々な実施形態において、この用語は、その対象がその正常なまたは正しい位置外にあるという意味で用いられる。「...をコードする異所性ヌクレオチド配列」という句は、マウスでは通常遭遇しない位置に出現するヌクレオチド配列を指す。マウスADAM6タンパク質(または雄マウスに対して同じまたは同様の妊性の恩恵をもたらすそのオルソログもしくはホモログもしくは断片)をコードする異所性ヌクレオチド配列の場合、該配列は、野生型マウスにおいて通常見出される位置とは異なるマウスのゲノム内の位置に配置されることがある。かかる場合、野生型マウスにおける位置とは異なるマウスのゲノム内の位置に前記配列を配置することにより、マウス配列の新規配列接合部を生み出すこととなる。マウスADAM6の機能的ホモログまたはオルソログは、ADAM6−/−マウスにおいて観察される妊性喪失(例えば、交配により子孫を産生する雄マウスの能力の喪失)のレスキューをもたらす配列である。機能的ホモログまたはオルソログは、ADAM6aのアミノ酸配列に対しておよび/またはADAM6bのアミノ酸配列に対して少なくとも約89%以上の同一性、例えば99%以下の同一性を有するタンパク質、ならびにADAM6aおよび/またはADAM6bの欠失またはノックアウトを含む遺伝子型を有するマウスの首尾よく交配する能力を補うまたはレスキューすることができるタンパク質を含む。0183前記異所位置は、(例えば、マウスADAM6配列を含有する導入遺伝子のランダム挿入の場合のように)どこでもよく、または例えば、野生型マウスにおける(例えば、改変内因性マウス免疫グロブリン遺伝子座内だがその天然の位置の上流または下流のいずれか、例えば、改変免疫グロブリン遺伝子座内だが、異なる遺伝子セグメント間、またはマウスV−D遺伝子間配列内の異なる位置における)その場所に近い(しかし、正確に同じではない)位置であってもよい。異所性配置の一例は、ヒト化免疫グロブリン重鎖遺伝子座内への配置である。1つ以上の内因性VH遺伝子セグメントの、ヒトVH遺伝子セグメントでの置換であって、内因性ADAM6配列を除去する置換を含むマウスを、マウスADAM6配列がヒトVH遺伝子セグメントを含有する配列内に配置されるように工学的に作製することができる。結果として得られる改変は、ヒト遺伝子配列内に(異所性)マウスADAM6配列を生じさせることとなり、このヒト遺伝子配列内へのマウスADAM6配列の(異所性)配置は、ヒトADAM6偽遺伝子の位置(すなわち、2つのVセグメント間)に近い場合もあり、またはマウスADAM6配列の位置(すなわち、V−D遺伝子間領域内)に近い場合もある。マウスの生殖細胞系内のヒト遺伝子配列(例えば、免疫グロブリン遺伝子配列)内にまたは該ヒト遺伝子配列に隣接した(異所性)マウスADAM6配列の接合により作られる、結果として生ずる配列接合部は、野生型マウスのゲノム内の同じまたは同様の位置と比較して新しいものになる。0184様々な実施形態において、ADAM6またはそのオルソログもしくはホモログが無い非ヒト動物を提供し、この欠如が該非ヒト動物を不妊性にするか、該非ヒト動物の妊性を実質的に低減させる。様々な実施形態において、前記ADAM6またはそのオルソログもしくはホモログ欠如は、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変に起因する。あたりの子、1年あたりの同腹子、など)の約50%、60%、70%、80%、90%または95%またはそれより多くの低減である。様々な実施形態では、非ヒト動物の雄において機能的であるマウスADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログもしくは機能的断片を前記非ヒト動物に補充し、この補充されたADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログもしくは機能的断片により、妊性低減の全部または実質的部分がレスキューされる。妊性の実質的部分のレスキューは、例えば、前記非ヒト動物が、非改変(すなわち、ADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログへの改変を有さない動物)重鎖遺伝子座と比較して少なくとも70%、80%または90%またはそれより多い妊性を示すような妊性の回復である。(すなわち、例えば免疫グロブリン重鎖遺伝子座の改変に起因して、機能的ADAM6またはそのオルソログもしくはホモログが無い動物)に付与する配列は、ADAM6遺伝子またはそのオルソログもしくはホモログから選択される。マウスにおけるADAM6機能の喪失は、1つの実施形態では、マウスADAM6遺伝子の付加によってレスキューされる。1つの実施形態において、マウスにおけるADAM6機能の喪失は、マウス、例えば齧歯動物、に対して近縁の種、例えば、異なる系統または種のマウス、任意の種のラット、齧歯動物、のオルソログまたはホモログを付加することによってレスキューされ、この場合、前記マウスのオルソログまたはホモログの付加により、ADAM6機能の喪失またはADAM6遺伝子の喪失に起因する妊性の喪失がレスキューされる。他の種からのオルソログおよびホモログは、様々な実施形態において系統発生的に関連した種から選択され、および様々な実施形態において、約80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上または97%以上である内因性ADAM6(またはオルソログ)との同一性パーセントを示し、およびADAM6に関連したまたは(非マウスの場合は)ADAM6オルソログに関連した妊性喪失をレスキューする。ADAM6機能が無い遺伝子改変雄ラット(例えば、ヒト免疫グロブリン重鎖可変領域で置換された内因性免疫グロブリン重鎖可変領域を有するラット、またはラット免疫グロブリン重鎖領域のノックアウトを有するラット)の場合、そのラットの妊性の喪失は、ラットADAM6の付加によって、または一部の実施形態ではラットADAM6のオルソログ(例えば、別のラット系統もしくは種からの、または1つの実施形態ではマウスからの、ADAM6オルソログ)の付加によってレスキューされる。ページトップへこの技術を出願した法人この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedInこの技術を発明した人物この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedInページトップへ関連する挑戦したい社会課題この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedIn環境にやさしいエネルギーを実現する環境にやさしいエネルギーの実現は、経済成長と環境や健康面への配慮を両立させる社会につながります。発電やエネルギー創出時の環境への影響は、大気汚染などの健康被害にもつながり、また人命にかかわる気...最終更新日:2018/06/13高い食料自給率を実現する高い食料自給率を実現すると、国内での食料の安定供給や、他国の問題による食料不足などの問題を防止する可能性が高まります。既存の抗体のヒト化により生じる抗体及びその断片、並びにそれらを作製する方法に関する。食品製品の旨味及び/又は塩味の増強に使用するための、式(I)の化合物及びかかる化合物を含む組成物に関する。環境にやさしいエネルギーを実現する環境にやさしいエネルギーの実現は、経済成長と環境や健康面への配慮を両立させる社会につながります。発電やエネルギー創出時の環境への影響は、大気汚染などの健康被害にもつながり、また人命にかかわる気...高い食料自給率を実現する高い食料自給率を実現すると、国内での食料の安定供給や、他国の問題による食料不足などの問題を防止する可能性が高まります。日本の食料自給率は非常に低く、食料面で海外に大きく依存しているのが現状です...地球温暖化のない社会を実現する地球温暖化のない社会の実現は、未来の都市生活と密接に結びついています。地球温暖化は、洪水など多くの異常気象を発生させ、過去100年間で地球上の海面は約19cm上昇しました。データ等)を元に構成されています。出典元のデータには一部間違いやノイズがあり、情報の正確さについては保証致しかねます。一時的に、各データの収録範囲や更新周期によって、一部の情報が正しく表示されないことがございます。当サイトの情報を元にした諸問題、不利益等について当方は何ら責任を負いかねることを予めご承知おきのほど宜しくお願い申し上げます。”未来を創るためのプラットフォーム”astamuseは、世界中で未来を創るための「仕組み」を提供するため日々改善を進めています。専門用語を解析し、意味や用法を知ることが出来るキーワード情報そしてこれらの情報を最大限活用することで、挑戦したい社会課題を独自の切り口で編集。社会に大きな変化を起こし、未来を創るために活動し続けるのは容易なことではありません。行う為に必要なサービスの提供を行っていきます。それが私たちの考える“未来を創ること”です。