Achievements本研究の目的は、種々の栄養因子を含む脳脊髄液を産生している脈絡叢上皮細胞に着目し、脊髄損傷時におこる脈絡叢上皮細胞の応答を調べることで、本来持っている神経の自己再生メカニズムの一端を明らかにすることである。前年度には、ラットの側脳室と第四脳室の脈絡叢を採取し、それぞれの脈絡叢上皮細胞の初代培養系を確立し、免疫細胞化学的な手法でタンパク質レベルでの発現の違いを比較検討したところ、側脳室由来の脈絡叢上皮細胞の多くは未分化マーカーとして知られるSox2を発現していたが、第四脳室由来の脈絡叢上皮細胞はSox2を全く発現していないことを明らかにした。vivoでの生理的な違いを調べるために、正常ラットの脳の凍結切片について免疫組織化学的な解析を行った。その結果、正常ラットではいずれの脳室の脈絡叢上皮細胞もほとんど未分化マーカーを発現しておらず、近傍の上衣細胞が発現していた。例外的に、SSEA-3は両脳室の脈絡叢上皮細胞の一部で発現が認められた。次に、脊髄損傷による反応をみるため、圧挫損傷を与えたラットの脳の凍結切片について免疫組織化学的な解析を行った。その結果、Sox9は両脳室の脈絡叢上皮細胞に同程度発現が認められた。一方で、SSEA-3は第四脳室よりも側脳室の脈絡叢上皮細胞で発現が増加した。vivoでも脊髄損傷後に側脳室の脈絡叢上皮細胞で未分化マーカーの発現が高いことがわかった。今回、脊髄損傷から6週後(慢性期)のラットの脳のみを解析したため、今後さらに、急性期の脊髄損傷ラットも解析することで経時的な脈絡叢上皮細胞の反応を脳室ごとに明らかにしていく予定である。vivoでも脊髄損傷に応答して特に側脳室の脈絡叢上皮細胞で未分化マーカーの発現が上がることがわかった。このことは本研究の最終到達点である脈絡叢の神経自己修復への寄与の解明に近付けたと言える。来年度以降の具体的なストラテジーも決まったことは有意義であった。microarray等で解析する。実際に各種細胞に分化するかを調べる。