よろしければ、学会や論文等で発表された内容をご紹介頂ければ大変ありがたく思います。ご質問・コメントなどお気軽にお送り頂けると助かります。biotech@jaica.comまでお気軽にお知らせください。対象となるマーカーも徐々に増やしていきたいと思います。弊社は責を負いませんので予めご了承ください。先生のご研究をご紹介ください。尿サンプルを測定する場合には、付属の希釈液で10倍以上に希釈してから測定してください。不溶物を除去してから希釈、測定してください。調製後は冷蔵にて24時間保存できます。発色試薬は使用直前に必要量のみ調製してください。油脂サンプルに含まれるアクロレインを測定することが可能です。油層/水層を分離させ、水層を回収します。ELISAキットにて測定します。組織サンプル中のACR測定法は確立されておりませんが、下記の方法で測定できる可能性があります。BHT/PBS中にホモジナイズします。遠心上清を回収し、ELISAに適用します。ELISAキットの血清サンプルでの測定は確立されていないようです。2008年4月を以って販売を終了いたしました。ご愛用頂き誠にありがとうございました。1996年に大澤、加藤らによって見出された新規な酸化ストレスマーカーです。尿、血清中でも検出されています。サンプルに適用可能です。ホルマリン固定パラフィン包埋切片(4〜6μm厚)を脱パラフィン処理します。H2O2に10〜20分間浸し、内因性ペルオキシダーゼを不活化させます。PBSにて室温30分間ブロッキング処理をします。4)抗ACR抗体(推奨濃度0.5〜1.0μg/mL)にて4°C一晩反応させます。5)PBSにて洗浄します。6)ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)で染色します。発色基質にはDABを用います。7)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。染色性を減弱させることがあります。アクロレイン(アルデヒド)はSigma-Aldrich社より入手可能です。p8392-8400(2007)アクロレイン処理したApoE蛋白を対象にウェスタンブロットに適用しています。免疫組織染色プロトコル1)ホルマリン固定パラフィン包埋切片(4〜6μm厚)を脱パラフィン処理します。H2O2にて10〜20分処理し、内因性ペルオキシダーゼを不活化します。PBSにて室温30分間ブロッキング処理します。pH7.6)にて100〜200倍に希釈し、4°C一晩反応させます。6)ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)にて染色します。発色基質にはDABを用います。7)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。染色性を低下させる場合があります。1)ホルマリン固定パラフィン包埋切片(4〜6μm厚)を脱パラフィン処理します。H2O2にて10〜20分処理し、内因性ペルオキシダーゼを不活化します。PBSにて室温30分間ブロッキング処理します。pH7.6)にて100〜200倍に希釈し、4°C一晩反応させます。6)ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)にて染色します。発色基質にはDABを用います。7)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。染色性を低下させる場合があります。本抗体はウェスタンブロットにも適用可能です。複数の蛋白質である可能性が考えられます。(1998)MethylglyoxalをELISAにて検出した研究例です。(2006)血管内皮細胞においてHSP27がメチルグリオキザール修飾されることが報告されています。p507-514(2007)関節リウマチ患者148名および正常対照群88名を対象とした研究。TBARS値上昇およびGSH減少に関連して上昇することが報告されています。(2008)MG修飾されたアルブミンはヒト単球を刺激して酸化ストレスを亢進させることが報告されています。1)ホルマリン固定パラフィン包埋切片(4〜6μm厚)を脱パラフィン処理します。H2O2にて10〜20分処理し、内因性ペルオキシダーゼを不活化します。PBSにて室温30分間ブロッキング処理します。pH7.6)にて100〜200倍に希釈し、4°C一晩反応させます。6)ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)にて染色します。発色基質にはDABを用います。7)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。染色性を低下させる場合があります。1)ホルマリン固定パラフィン包埋切片(4〜6μm厚)を脱パラフィン処理します。H2O2にて10〜20分処理し、内因性ペルオキシダーゼを不活化します。PBSにて室温30分間ブロッキング処理します。pH7.6)にて100〜200倍に希釈し、4°C一晩反応させます。6)ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)にて染色します。発色基質にはDABを用います。7)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。染色性を低下させる場合があります。本抗体はウェスタンブロッティングにも適用可能です。1μg/mL程度で染まることが多いようです。7-KCの免疫組織染色サンプルには、凍結切片をご用意ください。パラフィン包埋サンプルは適用できません。これは7-KCは溶剤に溶解してしまうためです。凍結切片の作製は下記のように行います。組織サンプルを20%ホルマリンで固定します。30%ショ糖に浸し、組織中の固定液をショ糖液に完全に置換します。ドライアイスアセトン上でOCTコンパウンドに凍結包埋し、クリオスタットを用いて凍結切片を作製します。凍結組織から包埋切片(3〜7μm厚)を作製します。2)凍結切片をPBS(pH7.6)で洗浄し、OCTコンパウンドを除去します。H2O2/PBSにて15分間、内因性ペルオキシダーゼの不活化処理をします。4)PBS(pH7.6)にて洗浄します。5)正常血清(3%)にて室温30分間、ブロッキング処理をします。6)PBS(pH7.6)にて洗浄します。7)内因性アビジンビオチン活性を不活化させます。8)PBS(pH7.6)にて洗浄します。pH7.6)にて希釈し、4°C一晩反応させます。ABC法(アビジン-ビオチンcomplex法)にて染色します。発色基質にはDABを用います。11)ヘマトキシリンまたはメチルグリーンにて対比染色をします。5mm厚以内に切り出した新鮮組織の固定には、20%ホルマリン中にて24〜48時間以内の固定が望ましい。EDTAを添加することをお奨めします。Vector社よりブロッキングキットが市販されておりますので、ご利用ください。使用するキットによって異なります。室温にて2時間程度反応させます。詳しくはご利用になるABCキットの説明書をご参照ください。3〜7μm厚に調製することをお奨めします。検証困難であることが理由です)。認識しない可能性が高いと推測されます。Li7-KCの細胞毒性に関する文献です。存在し、細胞毒性を示します。7-ketocholesterolはヒト生体内において相互変換することが示されています。重水素標識した7-ketocholesterolを健常者ボランティア2名に静注。7-ketocholesterolの血中半減期は1.5時間。