エリスロポエチン(Epo)遺伝子の調節配列の解析は、その活性が低く不明であった。strategyを用いた解析を行った。合成オリゴヌクレオチドを、Epoを産生するHep3B細胞に添加してEpo遺伝子の調節配列で三重鎖を形成させると転写因子の調節配列への結合が阻害され転写レベルに変化が起きる。mRNAを定量して解析した。mRNA産生量は用量依存性に低下し、CACCC配列は生の調節配列であることを確認した。mRNA産生が亢進し、GATA配列は負の調節配列であることを確認した。電気泳動で上記領域の三重鎖形成を確認した。ゲルシフトでCACCC-GATA配列に特異的に結合する転写因子を認めた。CACCCの転写因子はゲルシフトにおけるbandのintensityが低酸素で増加するため誘導因子と考えられる。GATAの転写因子は、そのintensityが低酸素で減少するため抑制因子と考えられ、以上を報告した(J.Biol.Chem.1994)。次にこのGATA配列に結合する転写因子の同定を行った。mRNAを発現していた。モノクローナル抗体を用いた細胞化学染色でも、ともにGATA-2蛋白の発現を確認した。mRNA産生が低下することを認めた。以上より、Hep3B細胞内ではEpo遺伝子のプロモーター、GATA配列にはGATA-2因子が結合し負に発現調節していることが認められ、報告予定である。