生体内において低酸素環境はがんや虚血性疾患など多くの疾患と密接に関連しています。試薬では免疫染色が必要であり、固定細胞でしか使用できませんでした。厳しい低酸素状態になるにつれて蛍光強度の増加が観察されます。低酸素環境検出にはpimonidazole試薬を用いるのが一般的でしたが、細胞固定と免疫染色が必要でした。MARは、生細胞に添加するだけで低酸素環境の蛍光イメージングが可能となります。RGを生成し、蛍光を発するようになります。電荷によりミトコンドリアに局在しやくすなります。細胞に対して、各酸素濃度条件におけるMARならびにpimonidazoleによる染色観察を行った。Pimonidazoleは約1%の酸素濃度に応答するのに対し、MARは約5%程度の酸素条件でも応答性を示していた。4858-4866)。上昇をライブセルイメージングで観察しました。蛍光(中央、緑)により同範囲における低酸素状態も検出されました。両者を重ね合わせた画像(右)から、ほぼ同じ範囲で低酸素応答および遊離鉄の増加が起こっていると考えられます。細胞を培養し、スフェロイドを形成させました。(市販のスフェロイド形成キット等も使用可能です。詳しいスフェロイド形成方法、必要な細胞数等は、ご使用のキットやプレートのプロトコルをご参照ください。)スフェロイドを顕微鏡観察に適した「ガラスボトムディッシュ」等の容器に注意深く移して培養し、スフェロイドを接着させました。