vitroの実験に終始することになった。サイトカインの組み合わせ、培養液やMEDIUMの組成など変化させて組成を最適化することに努めたものの、どうしても骨への分化が優位になってしまい難渋してきた。内村僚一先生が我々の実験にも加わることになった。マウス血管炎モデルに樹立した脂肪由来幹細胞を投与するプロジェクトに取り組んできており彼の樹立した実験系は安定していて本プロジェクトにも応用が利く事が予想された。彼の評価系を使用することで移植後造血回復の時期の皮膚GVHDや血管炎をどの程度起こしてくるのか検討することができ興味深い。安定して樹立できるようになった。vitro実験の目処が立ってから実験計画書を提出し動物を搬入することにしているので2017年度中に申請することとした。樹立するかが不可欠である。我々の従来の培養系では骨細胞有意に分化誘導されてしまうことが多く、そこがボトルネックであった。2016年度の途中から我々のグループの植田が指導教官で別のプロジェクト(マウス間葉系細胞をもちいた川崎病血管炎モデルマウスの解析)を進めてきた大学院生の内村僚一先生が加わっったことにより、MEDIUMを最適化し、コラゲナーゼ処理をしてから遠心分離した細胞を使用する培養系で樹立したところ、ようやくマウス由来の細胞系は安定して脂肪幹細胞が樹立できるようになった。事前講習は受講済みなので2017年度中には実験動物計画書を提出する予定である。樹立できるようになった。動物実験に大学院生が加わることにより2017年度は動物実験に移行できると考えられる。その後脂肪間葉系細胞を併用した骨髄細胞移植実験に着手する予定である。評価系には内村先生の血管炎モデルの解析法と同様に病理検体の免疫染色も実施したい。ヒト臍帯血からの脂肪由来骨髄細胞のアッセイ系も確立して最終年度に予定するヒト化マウスを用いた移植実験に備えたい。造血不全症の患者が発生し、患者からの同意が得られたときには造血支持組織がどのような状態にあるかサイトカインアレーや造血コロニーアッセイで評価し最終的には造血不全症ヒト化モデルマウスを作成して脂肪組織由来細胞が移植時に有効であるか評価できるところまで検討できるようになれば本プロジェクトの目標は達成され、次期プロジェクトのseedsになると考える。beadsやフローサイトメーターや免疫染色で使用するための各種抗体の購入に必要な費用が未使用な状態であるため。beads、各種抗体で経費がかなりかかると考えられ、順次使用していく方針である。