vivo試験で行うのは大きな手間がかかります。らにより一般化され、報告された手法4)で、メンブレンフィルターに塗布形成した人工膜を生体膜の代替として用いて、膜透過性を評価します。時間がかからず、再現性が良好であるため、膜透過性の一次スクリーニングとして良く用いられています。PAMPAで用いられる人工膜としてはリン脂質4)あるいはヘキサデカン5)が主に用いられており、消化管吸収との高い相関性が報告されています。一方で、豚の脳から抽出した極性脂質混合物6)を用いた人工膜の場合は、血液脳関門との高い相関性が報告されています。文献より引用2)PAMPA以外の膜透過性試験として一般的に用いられているものとしては、Caco-2やMDCKなどの細胞系のアッセイ手法があります。上記表1にPAMPAと細胞系アッセイの比較を載せてありますが、簡潔に言うとPAMPAの利点は圧倒的に簡便だという点です。PAMPAの緩衝液中には爽雑物をほとんど含まれないので、化合物濃度の定量はLC-MSやHPLC以外にもUVでの測定も可能である点が優れています。実際に96穴プレート+UVプレートリーダーで波長の範囲(240~440nm程度)をスキャンして濃度を算出するという単純な手法なので、データ解析まで自動化されたPAMPA用ロボットも市販されています。PAMPAの場合は膜以外の透過(例えばトランスポーターの輸送など)は関与しないので、シンプルに膜のみの透過性を評価できる点がメリットになります。関しては、住化分析センターのホームページに載っていました。溶解して下層のドナーバッファーへ添加します。上層のアクセプタープレートの底部にあるメンブレンフィルターには、リン脂質類を有機溶媒に溶かしたもの塗布して人工脂質膜を形成させ、アクセプターバッファーを添加します。時間静置後、アクセプター側とドナー側のバッファーをそれぞれ分取し、スペクトルを計測します。計測結果から、膜透過速度を算出します。住化分析センター1)上記の試験方法では、アクセプタープレートが上層、ドナープレートが下層にありますが、これが逆の場合もあります。コメントをキャンセルメールアドレスが公開されることはありません。(3)科学系ブログです。