EGFR、HER2、HER3和HER4。FRET信号之前进行。HER2蛋白。Transfer”)信号。(如RIPA缓冲液)共用。10nM、优选10nM-150nM或20nM-80nM、优选30nM-60nM。-HER2类型治疗,特别是使用结合至HER2蛋白的抗体,如曲妥珠单抗(赫赛?。(患者分类为0、1+、或2+))中明确地检测HER2蛋白。EP0180492、EP0321353、EP0601113和国际申请WO01/96877中。在该情况下,反应基团例如为NH2基团):其合成在国际申请WO2008/063721中有描述(化合物6a,第89页)。),制备表达人HER2蛋白的品系(以下称为“H2”)。(厚度约20μm),得到的FFPE(甲醛固定石蜡包埋)切片在eppendorf管中4°C储存待用。1次相同步骤,随后添加1.2mL95%乙醇。20min。Bioassays),其在665nm发射(REGF01-d2)。(A3-A12孔)。line):F665c=F665-B665(见图1)。:E620c=E620-B620(见图2)。emission)的贡献(下表中称为B665)。计算在665nm恢复(restored)的FRET信号:Δ665=E665c-B665。Hoechst33342化合物在460nm处的荧光。KREBS缓冲液。[Krebs/HEPES缓冲液mmol/l:NaCl99;KCl4.69;CaCl21.87;MgSO41.2;K2HPO41.03;NaHCO325;Na-HEPES20+葡萄糖11.1mM+0.1%BSA,pH7.4]。(缓冲液空白)。Bioassays)的混合物加入A5-A12孔。通过在KREBS缓冲液中稀释含有EGF-Lumi4Tb和Ab10-d2的储液,形成标准范围(1/2连续稀释,从而获得1nM至0.031nM的Ab终浓度)。A1和A2孔中测定的B620空白值后)。Hoechst33342(2mg/mL在DMSO中的溶液,即时在KREBS中预稀释至1/100th),并再在20°C孵育1小时。估计EGF-Lumi4Tb的结合为约0.096nM。(A5-A8孔)为约0.348nM。(并乘以100000从而得到整数)。