Achievements昨年に引き続き、KRAS遺伝子増幅を有する細胞株を用いて実験を進めた。MEK阻害剤を加えた実験系において、1KRAS遺伝子変異なし/増幅なしの細胞株、2KRAS遺伝子変増幅ありの細胞株、3KRAS遺伝子変異ありの細胞株を比較検討したところ、2においてのみアポトーシスが誘導されなかった。昨年度に引き続き、2を用いてMEK阻害加え経時的にGDP-RAS(不活化型)とGTP-RAS(活性化型)の割合を検出したところ2の細胞株のみが活性化型であるGTP-RASの割合が増大していることを突き止めた。昨年度の仮説通り、GDP-RASとGTP-RASの変換酵素GEFの一つであるSOSとその活性化を誘導するSHP2の阻害によりMEK阻害(GSK1120212)下でのKRAS遺伝子増幅細胞の増殖活性を抑制できるかどうかを確認することとした。KRAS遺伝子増幅を有する細胞株と、患者由来xenograftモデルを用い、shSOSもしくはSHP099(SHP2阻害剤)でも、GSK1120212投与下で強力な腫瘍増殖抑制効果を有することが確認できた。このような変化はKRAS遺伝子変異細胞株を用いたモデルでは確認できず、KRAS遺伝子増幅モデルに特有であることを確認した。KRAS遺伝子増幅の癌細胞では、通常状態では下流のMEKタンパクがSOSやSHP2にネガティブフィードバックをかけており、この状態では不活化型であるGDP結合RASの割合が多く細胞増殖に大きな変化を与えない。MEK阻害下ではそのフィードバックが外れ、SOSやSHP2が活性化することで不活化型GDP-RASから活性化型であるGTP-RASの割合が増加し、その結果腫瘍は増大に傾く。Oct;24(10):1627.に報告済である。同時に、肺がんのクリゾチニブ耐性の原因としてKRAS遺伝子増幅が関与していることも併せて報告した。Status平成30年度が最終年度であるため、記入しない。Activity平成30年度が最終年度であるため、記入しない。