×この技術を簡単クリック査定この機能をご利用いただくには、会員登録(無料)が必要です。出願した特許の牽制数、引用された数などを知る事ができます。気になる技術や特許をブックマークしておけば、いつでも後から読むことができます。後で印刷するために、公報をPDFでダウンロードできます。会員登録してastamuseを使えば、もっと簡単に便利にお使いいただけます。会員登録(無料)「astamuse」は世界中の挑戦したい社会課題に挑戦し、未来を創る人のプラットフォームです。※この項目の情報は公開日時点(1996年1月23日)のものです。SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による分子量が約60,000ダルトンで、胸腺のマクロファージ系細胞及び脳ミクログリア細胞を単独で増殖誘導させる活性を有する新規なタンパク質を分離・精製し、その部分アミノ酸配列を決定した。種々の免疫担当細胞の機能亢進に利用できることが期待される。脳ミクログリア細胞に当該タンパク質を与えたところ、特徴的な増殖形態を示すので、本発明のタンパク質は脳ミクログリア細胞の分化増殖因子としても機能することが示唆される。従って本発明のタンパク質は、脳損傷等の治療にも適用できる。骨変形あるいは骨髄腔の狭小化などを伴う骨萎縮症である大理石病では、従来のM−CSFによる治療が困難と考えられており、これらの疾患に本願のタンパク質が適用できる可能性も考えられる。SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による分子量が約60,000ダルトンで、胸腺のマクロファージ系細胞及び脳ミクログリア細胞を単独で増殖誘導させる活性を有する新規なタンパク質を分離・精製し、その部分アミノ酸配列を決定した。種々の免疫担当細胞の機能亢進に利用できることが期待される。脳ミクログリア細胞に当該タンパク質を与えたところ、特徴的な増殖形態を示すので、本発明のタンパク質は脳ミクログリア細胞の分化増殖因子としても機能することが示唆される。従って本発明のタンパク質は、脳損傷等の治療にも適用できる。請求項1下記の理化学的性質を有することを特徴とする新規なタンパク質。SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による分子量が、約60,000ダルトンである。2.胸腺のマクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞を単独で増殖誘導させる活性を有する。請求項2その部分アミノ酸配列が配列表の配列番号1に記載の配列で表されることを特徴とする請求項1記載のタンパク質。請求項3その部分アミノ酸配列が配列表の配列番号2に記載の配列で表されることを特徴とする請求項1記載のタンパク質。請求項4その部分アミノ酸配列が配列表の配列番号3に記載の配列で表されることを特徴とする請求項1記載のタンパク質。請求項5その部分アミノ酸配列が配列表の配列番号4に記載の配列で表されることを特徴とする請求項1記載のタンパク質。請求項6その部分アミノ酸配列が配列表の配列番号5に記載の配列で表されることを特徴とする請求項1記載のタンパク質。技術分野0001本発明は、胸腺のマクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞の分化増殖を促す作用を有する新規なタンパク質に関する。0002近年、好中球の分化増殖を誘導する顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、顆粒球とマクロファージの増殖を促進する顆粒球・マクロファージ・コロニー刺激因子(GM−CSF)およびマクロファージの分化誘導を促すマクロファージ・コロニー刺激因子(M−CSF)の存在が発見され、それぞれの役割が明らかにされつつある。伴う顆粒球減少症の治療薬としての有用性が期待されている。課題を解決するための手段0004一方、マクロファージ系細胞とは、骨髄幹細胞より分化増殖し、貪食作用を行い、微生物等の侵襲から生体を防御する一群の細胞である。これらの細胞は、肝臓ではクッパー細胞、肺ではマクロファージというように臓器固有な細胞に分化し、臓器特有な機能に関与する。胸腺では胸腺マクロファージ系細胞として存在し、自己抗原を認識したT細胞を選択的に除外する“ネガティブセレクション”に関係していることが知られている。そのような臓器特異的なマクロファージ系細胞に対して分化増殖を促すような因子の存在は全く知られていなかった。ある筋様細胞が胸腺マクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞に対する分化増殖因子を産生していることを始めて見出し、当該因子を単離、精製して本発明を完成するに至った。0006すなわち本発明の要旨は、下記の理化学的性質を有することを特徴とする新規なタンパク質に存する。SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による分子量が、約60,000ダルトンである。2.胸腺のマクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞を単独で増殖誘導させる活性を有する。0007以下、本発明につき詳細に説明する。C4カラムクロマトグラフィー(ワイエムシー社製)等により精製することによって得ることができる。0008精製された本発明のタンパク質は、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による分子量が、約60,000ダルトンであり、胸腺のマクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞を単独で増殖誘導させる活性を有する。当該タンパクには、G−CSF活性およびGM−CSF活性が見られなかった。M−CSFは腹腔浸出細胞の増殖をよく刺激しても胸腺細胞に対しては作用しないのに対し、本発明の60K−CSFは胸腺のマクロファージ系細胞の分化増殖に作用する。これらのことから、当該因子は従来にないCSF様活性を有する新規な因子であることが判明した。0009また本発明の60K−CSFは、配列表の配列番号1に示すようなアミノ酸配列をN末端に、さらに配列表の配列番号2〜5に示すようなアミノ酸配列を中間部フラグメントとして含むものである。かかる60K−CSFは、胸腺のマクロファージ系細胞および脳ミクログリア細胞を増殖誘導させるという機能を損なわない範囲において、一部のアミノ酸を除去、置換、修飾または追加する等の改変を行うことができる。0010本発明の60K−CSFを医薬品として使用するに当たっては、好ましくはこれを適当な希釈剤や他の添加剤と共に適当な製剤形態、剤型に調合され、使用に供される。剤型としては、一般に非経口的投与に適する剤型が用いられる。(バイアル)等を挙げることができる。0011上記各種剤型への調製は、この技術分野で慣用されている通常の手法を用いて行うことができる。製剤化する際に用いられる製剤担体としては、各種剤型への調製に慣用されている希釈剤や添加剤等が用いられる。クエン酸、水酸化ナトリウム等のpH調節剤等を加え、常法に従い凍結乾燥することにより調製される。pH調節剤等の添加剤を加え、これを通常の加熱滅菌、無菌ろ過等により無菌化して調製される。0013かかる医薬組成物は、これを必要とする患者に対して非経口的に、一般には皮下、筋肉内または静脈内注射により、その所定量を単回もしくは複数回に分けて投与するか、または連続的に投与する。応じて適宜増減させることができる。連続投与の場合には、成人1時間当たり約0.1〜50μg/kgの範囲で、上記1日量に相当する量を投与することができる。0014投与方法としては、注射用アンプル剤の場合はそのまま皮下、筋肉内または静脈内に投与することができるが、静脈内投与の場合には、必要に応じて輸液用ミニポンプを用いて投与することもできる。リンゲル液等の希釈剤に溶解した上、アンプル剤の場合と同様にして投与する。発明の効果0015さらに本発明の医薬組成物は、治療の際にブドウ糖等の糖輸液に予め所定量を混合して投与するか、または該糖輸液の投与と同時にその有効量を単独で末梢静脈等から投与することも可能である。種々の免疫担当細胞の機能亢進に利用できることが期待される。併用、高脂肪症等の治療が挙げられる。0017また、脳ミクログリア細胞に当該タンパク質を与えたところ、特徴的な増殖形態を示すので、本発明のタンパク質は脳ミクログリア細胞の分化増殖因子としても機能することが示唆される。従って本発明のタンパク質は、脳損傷等の治療にも適用できる。骨変形あるいは骨髄腔の狭小化などを伴う骨萎縮症である大理石病では、従来のM−CSFによる治療が困難と考えられており、これらの疾患に本願の60K−CSFが適用できる可能性も考えられる。0018以下、本発明につき実施例をあげてより具体的に説明するが、その要旨を超えない限り、以下に限定されるものではない。α−メチルマンノシド溶出画分を回収した。リン酸緩衝液(pH7.3)へ置換した後、同緩衝液で平衡化したTSKG4000SW(トーソー社製)カラムに添加し、同緩衝液にて流速1ml/分で溶出し、45分から55分の溶出画分を分取した。C4−AP,0.46×15cm)に添加し、0.1%トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル/イソプロピルアルコール(3/7,v/v)混液で20から80%、30分間の直線濃度勾配法により流速1ml/分で溶出し、各ピークを分取した。215nmの紫外吸収測定による溶出パターンを、図1に示した。C8−AP,0.46×15cm)に添加し、0.1%トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリルで30から60%、30分間の直線濃度勾配法により流速1ml/分で溶出し、各ピークを分取した。215nmの紫外吸収測定による溶出パターンを、図2に示した。このうち14.2分に溶出した画分に目的とする活性が認められ、同画分を真空状態で乾燥した。精製した60K−CSFをSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動により解析したところ、その分子量は約60,000ダルトンであることが明らかとなった。この標本を用いてアミノ酸配列の解析を行った。図1図20019なお、上記した各精製工程においては、後述する実施例に記載の方法で骨髄細胞へのサイミジン取り込み活性を指標として、60K−CSFを分画精製した。Biosystems社製470Aシークエンサーでエドマン分解し、N末端域のアミノ酸配列を決定した。かかる配列を、配列表の配列番号1に示す。Octyl,0.46×25cm)に添加し、アセトニトリル濃度0%から60%まで60分間の直線濃度勾配溶出を行い、各ピークを分取した。215nmの吸光度による溶出パターンを、図3に示す。このうち、29.5分、40.7分、42.2分および45.0分に溶出したピークを真空状態で乾燥した後、同様にシークエンサーによりエドマン分解した。その結果、29.5分、40.7分、42.2分および45.0分に溶出したピークの内部部分配列は、それぞれ配列表の配列番号2、3、4および5に示す通りであった。60K−CSFの活性評価ウイスター系ラットの脳ミクログリア細胞を、精製した60K−CSFの存在下、マイクロプレートを用いたトリチウムサイミジンの取り込み法により、増殖活性を測定した。cell)、ED1(monocyte)、ED2(macrophage)、ED3(macrophage)等のモノクローナル抗体を用いた間接蛍光抗体法を使用した。+:細胞の約8割が反応−:反応せず0023上記の結果より、本願の60K−CSFは、脳ミクログリア細胞に作用して上記のようなマーカーを有するマクロファージ様細胞を分化させる能力を有することがわかる。type)のコロニー形成が認められた。これより本願の60K−CSFは、骨髄細胞に作用してマクロファージ様細胞を分化させる能力を有することがわかる。生物名:ラット組織の種類:胸腺0030図1本発明の60K−CSFを、215nmの紫外吸収を指標として逆相HPLCで精製した際の溶出パターンを表す図面である。図2図1の活性画分を、さらに215nmの紫外吸収を指標として逆相HPLCで精製した際の溶出パターンを表す図面である。図3リジルエンドペプチダーゼ処理した60K−CSFを、215nmの紫外吸収を指標として逆相HPLCで精製した際の溶出パターンを表す図面である。図1図2図3ページトップへこの技術を出願した法人この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedInこの技術を発明した人物この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedInページトップへ関連する挑戦したい社会課題この情報を共有FacebookTwitterGoogle+LinkedIn農業用水が豊富な社会を実現する農業用水が豊富な社会を実現すると、今後の人口の増加に対応する食糧と水資源を確保できるかもしれません。地球上に存在する水のうち、淡水の占める割合はわずか2.5%と言われています。世界で...最終更新日:2018/06/20環境にやさしいエネルギーを実現する環境にやさしいエネルギーの実現は、経済成長と環境や健康面への配慮を両立させる社会につながります。既存の抗体のヒト化により生じる抗体及びその断片、並びにそれらを作製する方法に関する。食品製品の旨味及び/又は塩味の増強に使用するための、式(I)の化合物及びかかる化合物を含む組成物に関する。農業用水が豊富な社会を実現する農業用水が豊富な社会を実現すると、今後の人口の増加に対応する食糧と水資源を確保できるかもしれません。地球上に存在する水のうち、淡水の占める割合はわずか2.5%と言われています。世界で...環境にやさしいエネルギーを実現する環境にやさしいエネルギーの実現は、経済成長と環境や健康面への配慮を両立させる社会につながります。発電やエネルギー創出時の環境への影響は、大気汚染などの健康被害にもつながり、また人命にかかわる気...癌(5大疾病)のない社会を実現する癌のない社会を実現すると、全世界の患者約1,750万人を助け、年間約760万人の亡くなる命を救うことができます。データ等)を元に構成されています。出典元のデータには一部間違いやノイズがあり、情報の正確さについては保証致しかねます。一時的に、各データの収録範囲や更新周期によって、一部の情報が正しく表示されないことがございます。当サイトの情報を元にした諸問題、不利益等について当方は何ら責任を負いかねることを予めご承知おきのほど宜しくお願い申し上げます。”未来を創るためのプラットフォーム”astamuseは、世界中で未来を創るための「仕組み」を提供するため日々改善を進めています。専門用語を解析し、意味や用法を知ることが出来るキーワード情報そしてこれらの情報を最大限活用することで、挑戦したい社会課題を独自の切り口で編集。社会に大きな変化を起こし、未来を創るために活動し続けるのは容易なことではありません。行う為に必要なサービスの提供を行っていきます。それが私たちの考える“未来を創ること”です。