明らかにすることである。申請者は、動物では1種類しか存在しないと考えられてきた糖化ステロールが、脳においては一群を成して存在することを発見した。驚いたことに、一群の中にはこれまで未報告の新たなステロール骨格を有するものが存在し、パーキンソン病モデル動物で発現量が変動している新奇物質も見つかった。新規糖化ステロール群の存在は、脳において未知のステロール代謝経路が存在する可能性を示唆しており、本研究では、完成されたと考えられているステロール代謝経路を再構築することを目指す。具体的には、新規糖化ステロール群(CG群)の生理的意義を解明するため、1.CG群の構成分子の構造決定、2.CG群の代謝酵素の同定、3.CG群の局在解析、4.CG群の生理機能解析という4つのステップで研究を進める。2018年度は、ステップ4に取り組むため、2017年度にステップ2で同定したCG群代謝酵素の1つであるグルコシルセラミド分解酵素GBA2をノックアウト(KO)した細胞を作製した。GBA2はCG群の一種であるグルコース化コレステロールの合成活性をもつことから、高速液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法でグルコース化コレステロール量を測定した結果、GBA2-KO細胞ではグルコース化コレステロール量がWT細胞に比べて有意に低下していた。GBA2-KO細胞はWT細胞と比較して、後期エンドソーム、ゴルジ体の分布様式が顕著に変化していた。GBA2-KO細胞では、グルコシルセラミドやセラミドなどの脂質量もWT細胞と比べて変動していたことから、GBA2-KO細胞で見られた細胞内小器官の分布様式の変化がグルコース化コレステロールによって引き起こされたか否かについては今後検証が必要である。planned.Reason2018年度終了時点で、ステップ4(CG群の生理機能解析)に着手しており、2019年度はステップ4を引き続き実施する予定であることから、研究はおおむね順調に進展していると判断できる。Activity2019年度は、交付申請書に記載した研究実施計画に従って、ステップ4(CG群の生理機能解析)を進めていく。