et14から変更されています。線虫生化学および遺伝的指標に対するリンダンのMGEおよびMGR効果リンダンのMGEおよびMGR効果(持続的な有機汚染物質[POP])は、関連するインスリン様経路における脂質代謝および遺伝的発現変化における主要な生化学物質について研究された4。結果は、リンダンがインスリンシグナル調節の乱れを伴うオベストゲン効果を示したことを示した(図3)。sgk-1(F0、F3、T1'およびT3')とakt-1(T1およびT3)シグナリングの間の変化は、異なる暴露世代からの線虫が許容値と回避のための異なる応答戦略を示したことを示した。表現ダウンレギュレーション。この数字は、許可を受けて4.4でChenから変更されました。この図のより大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。librarian.Discussion記述されたプロトコルを正常に実行するためには、次の提案を考慮する必要があります。無菌環境で全体的な実験操作を実行します。不適切な操作は、大腸菌株の汚染、例えば、真菌およびダニは、C.エレガンスの正常な成長を妨げる可能性があり、したがって、実験結果に影響を与える可能性があります。C.エレガンスの栽培について説明するセクションでは、裸眼または顕微鏡でNGM寒天上のC.エレガンの成長尺度を観察する。寒天上のC.エレガンのスケールが地域の75%を超えた場合、または培養時間が1週間を超えた場合、C.エレガンスの過剰成長または人口減少を避けるために新しい接種を行う。同期のプロセスの前に、顕微鏡を使用してC.エレガンの成長を観察し、線虫の卵が寒天に広く分布しているときのプロセスを続けます。溶媒(例えば、ジメチルスルホキシド[DMSO])を使用する場合、その最終濃度が溶媒自体の悪影響を避けるために、ストック溶液中の濃度が1%未満でなければなりません。TG効果研究では、暴露時間が次世代の胚形成をカバーすることを確実にするために24時間を超える曝露期間が必要であり、その後の生成分離を容易にするために持続時間は96時間以内にする必要があります。寿命と生殖量を測定するために少量の線虫(通常は20以内)を使用してください。生化学的および遺伝的調節指標の測定には、大量の線虫(通常は500以上)を使用します。したがって、十分な数のサンプルを確保するために、予備実験を行い、成熟したF0線虫が生殖を開始してから最初の24時間以内に生殖できる子孫の数を大まかに推定する。次に、進行中の多世代研究のために少なくとも200の子孫がいることを確認するために必要なF0線虫の数を決定します。C.エレガンスとのTG研究の以前の報告と比較して、本実験プロトコルは、生命段階の選択をより考慮的であった。C.エレガンスでは、精子は後発卵性卵母細胞23を受精させるためにL4段階で形成される。したがって、精子形成および卵細胞形成期をカバーする暴露は、子孫に対するTG効果を研究するための特定のウィンドウを提供する。年齢同期卵は、暴露が各ライフサイクルの初めから全体的な期間をカバーすることを確実にするために、多世代効果研究に使用されます。以前の多世代研究と比較して、本実験プロトコルは、1〜2世代ではなく、複数の世代にわたって効果の測定を容易にしました。本プロトコルはMGEとMGR効果の両方を考慮し、これはMGEまたはMGR効果のみを測定した以前の研究よりも系統的である。本実験プロトコルでは考慮すべき問題がいくつかある。現在のプロトコルは、生成時間が約60時間で寿命が20日である野生型C.エレガンを採用しています。これにより、実験の全体的な持続時間はかなり長くなります(例えば、3世代以上の寿命に対するMGE効果研究は、少なくとも30日を必要とします)。時間を短縮するために、研究者は、短命の変異体線虫のような変異型C.エレガンを選択することができます。一つの問題は、細菌の殺害治療であり、線虫を健康に保つために必要な生きている状態24.また、紫外線殺しプロセスは、化学物質25の変化を導入する可能性があります。したがって、細菌に関する他の治療法を考慮する必要があり、特に不安定な化合物の場合は、調製または暴露プロセス中の化学変化を注意深く監視する必要があります。同時に、C.エレガンスがヘルマフロダイトであるという事実のほとんどは、毒性効果の性差を研究する上で限界があります。TG、MGEまたはMGR効果における性寄与を調査するためのさらなる改善が必要である。要約すると、提案されたプロトコルは、C.エレガンスを使用して毒性物質のTG、MGEおよびMGR効果を研究するために大きな意義があると予想される。librarian.Disclosures著者らは、水質汚濁防止のための国家科学技術専攻プロジェクト(2017ZX07201004)と中国の国際科学技術協力プログラム(No.2016YFE0123700)による財政的支援に感謝しています。gdpr@jove.com.。