Achievements平成30年度はスタチンの培養細胞に及ぼす影響の評価とラットのBRONJモデル作製を行う計画とした。アルカリフォスファターゼ染色、アリザリンレッド染色と骨分化因子に関するリアルタイムPCRを施行した。プラバスタチン、ロスバスタチンのいずれも1~100uMの濃度で細胞増殖能の検討を行ったところ、プラバスタチンでは濃度間で細胞増殖能に差は見られなかったが、ロスバスタチンでは50,100uMで濃度依存的に増殖能の低下がみられた。このため、各々のスタチンを1-10uMで培養し、ALP染色とアリザリンレッド染色を行ったが、骨分化誘導とスタチン濃度との相関は見られなかった。リアルタイムPCRによりI型コラーゲン、ALP、オステオカルシン、オステオポンチン、BMP2の発現を検討した。その結果プラバスタチン濃度依存的にBMP2の発現の上昇がみられた。プラバスタチンとロスバスタチンのヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)に対する影響を、細胞増殖能試験を行って検討したが、ロスバスタチンに関しては濃度依存的に細胞増殖能の低下がみられた。対し、動物実験計画書を提出申請中である。今後はラットBRONJモデルが樹立できたら、スタチンの顎骨壊死に対する予防効果と治療効果についてモデルラットを用いて検討を行う予定である。delayed.Reason培養細胞の実験ではHUVECを用いたVEGFなどの血管新生因子の発現を検討する予定であるが、HUVECには継代数に限りがあるため、実験によっては培養に時間を要している。今後ゾレドロン酸を添加して増殖能や血管新生因子の検討を行う必要があるため、細胞培養系の実験は今後も時間を要すると考えられる。動物実験に関しては綿密な計画の下、実験を開始する必要があり、申請の認可に時間を要している。今後、ラットに対するゾレドロン酸やスタチンの至適投与量の検討も必要となることが予想されるため、研究計画としては若干遅れがみられている。Activityまずは培養細胞を用いた実験系を完了させる。MC3T3-E1細胞やHUVECのスタチンとゾレドロン酸による影響を検討する。ラットのBRONJモデルの作製を急ぐ。BRONJモデル樹立後はラットBRONJモデルを用いて、スタチンのBRONJ予防効果を評価する。スタチンはプラバスタチンとロスバスタチンの使用を想定しているが、培養細胞系の実験での結果次第では、過去の報告から有効性の高いシンバスタチンを選択し、投与量は0.5mg~2.0mg/kgに設定する。投与法は栄養チューブを用いて胃に連日注入する。抜歯4週後に下顎骨を摘出し、BRONJの発症率を測定する。Jを用いて骨の状態を詳細に評価する。対照群には生理食塩液を栄養チューブで投与する。