プレートの色はどのように選べばよいですか?蛍光測定サンプルやバッファー、プレートが発する自家蛍光が、蛍光測定では問題となります。nm以上)は、紫外・可視光域よりも自家蛍光が低くなることが知られています。高い白色プレートが主に使用されます。クロストークを回避するために、白灰色(AlphaPlate)あるいは黒色プレートが使用されることもあります。これらは、高い発光シグナルを保ったまま、クロストークや燐光の影響を減少させます。カタログ参照)のため、白色、あるいは白灰色のプレートを使用します。白色プレートと灰色プレートの中間の白灰色に着色されたプレートです。テクノロジーでは、発光検出器がシグナルの検出に使用されます。使用すると、クロストークが抑制され、アッセイの精度が向上します。IsoPlateとは何ですか?フレームにカップを埋め込んでウエルを成型しているパーキンエルマー独自のマイクロプレートです。種類ラインナップがあります。通常の透明底プレートは、有色フレームに透明な板を貼りつけて成型されます。これをボトムリードに使用すると、ウェル内の光が透明な板を通して隣のウェルにリークし、クロストークの原因となります。IsoPlateでは、ウェルごとに透明底が独立し、また有色フレームによって光のリークが遮蔽されます。AlphaPlateを使った発光測定時のクロストーク」表参照)。プレートの約半分のウェル径のプレートです。少ない液量でもサンプル深度を高くでき、液量低下によるシグナル低下を防ぎます。テクノロジーなどの、遮光下のインキュベーションが必要なアッセイで、プレートに貼ってご使用いただけます。測定時には、はがしてください。イメージングやボトムリードなどの下方からの測定時に貼って使用すると、光の漏れこみを抑制します。事前に細胞観察などを行った後、プレートリーダーで測定する必要がある場合は、透明底プレートにバックシールを貼り、測定可能です。蛍光測定では、自家蛍光によるバックグラウンドの原因となるため、白色バックシールの使用は避けてください。シリーズには、フレームの色に合わせたバックシールが付属します。測定)を行う場合、ウェル内の溶液上面と検出器の距離が、シグナル強度に影響します。高いシグナルを得るためには、液面をなるべく検出器に近づけることが望ましくなります。底上げされている浅底ウェルマイクロプレートを使用すると、液量を減少させつつ高感度なシグナルを維持することが可能です。透明マイクロプレートであれば、核酸・タンパク質の吸光度定量に使用できますか?透明なマイクロプレートは、その素材によって異なり、可視光透過型と紫外光透過型に分類されます。nmの吸光度を測定する核酸・タンパク質の吸光度定量では、紫外光透過型マイクロプレートを使用します。メニスカスとは何ですか?マイクロプレートに溶液を入れると、壁面と溶液の相互作用から、液面の屈曲が生じます。これをメニスカスと呼びます。おける重要な要素の一つとなります。測定での使用を推奨します。測定では、シールは必須です。これは、検出器がプレートと接するような動作でシグナルを検出する機構になっているためで、特にウェル内がプレート上部まで溶液で満たされている場合は、シールが存在していないと溶液が検出器に接し、深刻な検出器の汚染が発生する恐れがあります。ご使用いただけません。蛍光測定ではバックグラウンド上昇の原因となります。マイクロプレートの素材や表面処理について教えてくださいマイクロプレートリーダー用マイクロプレートポリスチレン素材未処理マイクロプレートリーダーで使用するマイクロプレートのほとんどがポリスチレン素材を使用しています。このような吸着が問題になる場合は、非イオン性界面活性剤やブロッキング剤などをアッセイバッファーに使用します。処理を施すことによって、表面を親水性に変化させ、核酸やタンパク質などのウェル内面への吸着を低減させます。処理に使用し、プレート表面と分子との相互作用を最小にします。Binding(HB)処理ポリスチレン素材の疎水性をさらに高め、核酸やタンパク質の結合能を上げた表面処理です。イメージング用マイクロプレートシクロオレフィン・コポリマー(COC)素材シクロオレフィンは、光学特性がガラスに近いとされるプラスチック素材で、パーキンエルマーが最も早くイメージング用のマイクロプレートに採用しました。ポリスチレン素材と比較して透明性が高く、クリアな画像を得ることができます。薬剤耐性も高いという優れた特性を持っています。ガラス素材ホウケイ酸ガラスは、比較的安価で良好な加工性のため、マイクロプレートの底材としても採用されています。細胞イメージング用途において、プラスチック素材と比較して優れた光学特性(高い透明性や低い自家蛍光)を持ちますが、細胞の接着性が弱くなります。Culture(TC)処理プラズマ放電処理を行うと、ポリスチレンなど疎水性プラスチック表面に酸素を含む官能基が発現し、親水性に変化します。処理を施したマイクロプレートは、未処理のものよりも細胞の接着性が向上します。親水性を利用した細胞接着性の向上を図ることができます。L-Lysineを分解してしまうためとの報告もあります。細胞接着マトリックスとして古くから使用されてきました。コーティングに使用しています。Attachment(ULA)処理ポリスチレンは疎水性のため、細胞の接着力は限定的ですが、一方でその疎水的相互作用によって不均一な細胞増殖となります。形成などの三次元培養がマイクロプレートで可能となりました。エッジ効果について教えてくださいマイクロプレートを使用したアッセイを行ったとき、プレートの縁(エッジ)側のウェルが、プレートの中心のウェルとは異なるデータが得られることがあります。これをエッジ効果と呼びます。エッジ効果の種類とその解決法として、以下が知られています。温度勾配:例えば37°Cでインキュベーションしていたプレートを測定した場合に、プレートの中心と縁とで温度差が生じることがあります。これは多くの場合、測定前にプレートをあらかじめ測定器と同じ温度にすることによって解決します。インキュベーターによって、プレートの縁の培養液が中心よりもより蒸発してしまうことがあります。塩濃度が変化し、細胞接着や代謝に影響してしまうことがあります。このため、フタやシールを使って蒸発から守ります。インキュベーター内の湿度を100%近くに設定することも効果的です。時間程度プレインキュベートすると細胞が均一に接着し、効果的との報告もあります*。発光測定において、誤シグナルが得られました。すれば良いですか?白色プレートで発光測定を行った場合、燐光(蓄光)によって高いシグナルが得られてしまうことがあります。これは、蛍光灯などの光がプレートに当たり、蓄光されてしまうためです。分程度暗順応させます。乾燥している環境では、プレートシールと検出器の擦れによって静電気が発生し、誤シグナルが得られることがあります。これを回避するには、シールを水、あるいは低濃度の洗濯柔軟剤水などで拭います。マイクロプレートの位置情報を教えてくださいプレート位置調整用データをご覧ください。マイクロプレートの有機溶剤耐性を教えてくださいプレート樹脂の耐薬品性をご覧ください。パーキンエルマーのプレートの特長は?独自の樹脂を使用し、高い光反射効率、低バックグラウンド、低クロストークを実現しました(下図)。ユニークなプレートをラインナップに有し、各アプリケーションに対して細やかに対応します。オートメーション化にも適します。クリーンルームで製造されています。サンプル・価格等はお問い合わせください。