5/01/2017連結を解くコリオリの力と全視野熱回転浮力の影響回転チャネルのプロパティを転送します。FavoritesSummary赤外線神経刺激は、聴覚系に関連するものを含む神経種類の範囲内の電気刺激の代替として提案されている。このプロトコルは一次聴覚神経細胞の培養における赤外線神経刺激のメカニズムを研究するためのパッチクランプ法を説明しています。here.Abstractなお、パルス、赤外レーザ光が標的組織の更なる変形例の独立した神経組織の電気応答を誘発するために使用することができる近年では実証されている。vivoで末梢および感覚神経組織の様々報告されている。INSは、これらの設定で動作するように示されているがしかし、赤外光は、神経興奮を引き起こすする機構(または機構)は、現在よく理解されていない。調査を容易にするように設計された全細胞パッチクランプ法が記載されている。vitroでの赤外レーザ照射に対するこれらの細胞の応答を特徴付けることで、基本的な物理学会の改善された理解を得ることも可能であるlおよび生化学的プロセスは、赤外線神経刺激の基礎となる。Introduction神経生理学や医療バイオニクスの分野では、神経組織の電気応答の制御可能な刺激を可能な技術に大きく依存しています。電気刺激は、神経興奮で金本位まま神経応答、および組織1を取り巻くへの電流の広がりに起因する刺激の特異性の欠如を記録するとき、そのような刺激アーチファクトの存在など多くの欠点に悩まされる。最後の二十年は、光学的に媒介刺激技術の開発2を見てきました。光遺伝学)4のいくつかのフォームを、標的組織の変更を必要とする研究の設定の外側に適用することが容易である。興味深いのは、そのため赤外線神経刺激(INS)、wherebですyは神経組織、パルス赤外レ​​ーザ光により励起される。INSは、神経組織2の高度に特異的な、非接触刺激を可能にすることで、電気刺激の欠点の多くを克服する可能性を秘めている。vivoでのさまざまな設定で実証されているがしかし、励起の正確なメカニズムは不明である。INSのメカニズムを解明に向けた進展を示している。水によるレーザ光の吸収による急速加熱が重要な役割を果たすと思われる。これを超えてコンセンサスがまだ到達しなければならない。7は、急速加熱が、細胞膜およびその後の脱分極の静電容量の変化をもたらす、細胞膜に隣接する荷電粒子の分布の摂動を引き起こすことにより、非常に一般的なメカニズムを提案する。​​を主張rを誘発加熱イオンが細胞膜を通過させ、温度感受性イオンチャネル(一過性受容体電位バニロイドチャネル)の特定のクラスを活性化する。この段階では、これらのメカニズムはまだ同定されている更なる要素があるかどうかを実際に組み合わせる、またはどのように不明である。インビボで行われている。聴覚ニューロンの赤外線刺激は人工内耳10,14-18の潜在的なアプリケーションに起因し、特に関心のある領域、となっています。試験管内試験ではによって与えられる制御の増加レベルメカのより詳細な理解につながることが期待されての有効性を検証することが重要である一方INSの責任anism。このレポートには、これらも聴覚系から既存データの大本体に連結しながら基本的なメカニズムを研究するために使用することができるように、パッチクランプ調査培養らせん神経節ニューロンの調製を記載する。調査のための優れたツールである。vitroにおける安定調製に適用される場合には、深さが神経活性が制御され、操作されるメカニズムを研究する機会を提供する。パッチクランプを通してらせん神経節ニューロンの電気的特性に及ぼすレーザー刺激の効果を調査するため、この作業のアウトライン法で指定されたプロトコルレコーディング。アプローチは、標準的な顕微鏡の構成を変更することなく安全な操作だけでなく、より簡単かつ再現性の配向を可能にする、ファイバ結合レーザではなく、自由空間レーザに基づいている。これらのプロトコルに基づいて、それがより明確にINSのメカニズムまたは機構を決定するために実験の広い範囲を行うことが可能であるべきである。librarian.Protocol1。直径10mm)カバーガラスと湾曲鉗子を滅菌。滅菌ピンセットを用いて、滅菌4リング35ミリメートルペトリ皿または4ウェルプレートの各ウェルに滅菌カバースリップを転送します。ml)で150μlのを適用します。カバースリップは井戸の底から離れて浮いていないことを確認してください。注:サプリメントが凍結することができ、-20°Cで保存し、必要な日に培地に添加。前述の20,21として産後4-7日のラットの仔から私たちをらせん神経節ニューロンを解離(0.025%トリプシンおよび0.001%DNアーゼI)酵素的および機械的なテクニックの両方をING。23を参照してください。24蝸牛軸分離のデモンストレーションのために。カバースリップから残っpoly-L-ornithine/laminin液を吸引し、NBMと簡潔に洗う。2)にカバースリップと場所に解離らせん神経節ニューロンの懸濁液150-200μLを加える。注意:最大20カバーガラスには、8仔ラットの平均リターから調製することができる。メッキニューロン4時間後には、細胞の破片を除去し、150から200μlを温め新鮮NBMと交換するための解決策を吸引。ために必要になるまでインキュベーターにカバースリップを返します。注:解離スパイラル神経節ニューロン培養物を4時間解離した後、二日後までのための電気生理学的実験のために使用することができる。vitroでの時間は、結果の分析時に考慮されるべきである。毎年24〜48時間をNBM補充。