7.5~8.0)付)1.無傷細胞の場合、10ng/ml、24時間の処理でほとんどすべてのIAP基質がリボシル化されると考えられる。高濃度(mgオーダー)の処理は細胞刺激作用が問題になるといわれているので注意が必要である。2.NADase活性の強い細胞、膜の場合(HL60など)は上記の条件でうまくリボシル化されないことがあるらしい。NADase活性を抑制するためINH、ADPリボースを加えるなどの工夫が必要となる。CHO、COS細胞は上記の方法でうまく行く。3.SDS-PAGEを行った場合には、毒素のAプロトマー(28K)のリボシル化されたバンドが見られる。4.TCAで蛋白を沈殿させたあとSDS-PAGEバッファーに溶かすときには必ずpHが中性付近(BPBの色が青くなる)になるようにする(2Mのtrisを使うと合わせやすい)。