Japanese)本発明は、BBBの解剖学的構造を再現したインヴィトロモデルおよびBBBの解剖学的構造を再現したインヴィトロモデルの作製方法の提供を目的とするもので、下記(a)~(e)の工程を含む、血液脳関門インヴィトロモデルの作製方法である。Japanese)BBBは、外部からの有害物質の流入を制限し脳の内部環境維持に重要な役割を果たす。その一方、中枢神経系への薬物伝達を困難にするため、末梢では効果的な治療薬であっても中枢神経系には十分な効果を来さないことが多い。急務な状況となっている。BBBは、血管内皮細胞、ペリサイト、アストロサイトの3種類の細胞から構成される。insert)を用いた様々なBBBインヴィトロモデルが作製されてきた。細胞培養インサートの上面に血管内皮細胞を培養し、培養ウェルの上面にアストロサイトとペリサイト(周皮細胞)を共培養したBBBインヴィトロモデルが報告されている(特許文献1)。このモデルは、アストロサイトとペリサイトが混在した状態で培養されており、また、血管内皮細胞と、ペリサイトおよびアストロサイトが非接触状態で培養されているため、インヴィボにおける血液脳関門の構造を再現しているとは言いがたいものであった。ペリサイト、培養ウェルの上面にアストロサイトを培養したモデルが報告されている(特許文献2、非特許文献1)。ペリサイト層への直接的な作用を観ることはできず、アストロサイトとペリサイトの血管内皮細胞に対する直接的な相互作用を有する、BBBの解剖学的構造を再現した理想的なインヴィトロモデルとはほど遠い状況であった。作用するBBBの解剖学的構造を反映させた培養系を確立している(非特許文献2)。上述のように、多くの研究者の努力により、インヴィボの構造を反映すべく、血液脳関門のモデル系は改良されてきてはいるが、さらに解決すべき大きな課題が存在している。BBBの主な構成細胞である血管内皮細胞、ペリサイト、アストロサイトの3種類の培養細胞株を用いて、通常の分散培養でBBBのマルチ培養モデルを作製する場合には、これら3種類の細胞株で増殖速度が異なるため、各細胞株が単層構造を形成せず、3つの細胞が3層構造をとる解剖学的構造を再現したBBBモデルの構築が、技術的に困難であった。barrier、以下「BBB」と記載する場合もある)のインヴィトロモデルおよび血液脳関門インヴィトロモデルの作製方法に関する。下記(a)~(e)の工程を含む、血液脳関門インヴィトロモデルの作製方法。シート、条件不死化脳ペリサイトのシート、多孔性メンブレンおよび条件不死化アストロサイトのシートの順に積層されていることを特徴とする、血液脳関門インヴィトロモデル。シート、ラミニン層、条件不死化脳ペリサイトのシート、多孔性メンブレンおよび条件不死化アストロサイトのシートの順に積層されていることを特徴とする、血液脳関門インヴィトロモデル。T抗原の遺伝子を導入して作製したものであることを特徴とする、請求項5または6に記載の血液脳関門インヴィトロモデル。