cereus菌株検出に有用なプライマーセットを用いたPCR解析。cereusは、人や動物の生活環境を含む自然界に広く分布しており、人や動物の日和見感染症、人の食中毒、食品の腐敗・変敗の原因菌である。本菌による食中毒の発生は細菌性食中毒の中では多い方ではないが、毎年発生している。cereusの自然感染によるウシの乳房炎や流産例なども報告されている。cereusも存在するため、乳および卵製品の安全性確保において問題となっている。thuringiensisとは形態学的にも生化学的性状にも同一なため、細菌の分類に広く利用されている16SリボソームRNAの塩基配列分析では両菌を区別できない。thuringiensisにも卵黄反応陽性株は多数存在する。cereusのみを確実に検出できる迅速法は無かった。cereusの検出法を発明している(特許文献1参照)。cereusによる食中毒は臨床症状や潜伏時間の違いから、「下痢型」と「嘔吐型」の2つに分類される。あると考えられている。下痢型食中毒の原因となるエンテロトキシンについては研究が進んでおり、現在、サンドイッチELISA法や、ラテックス凝集反応などの免疫学的試験による検出法のキットが市販されており、利用されている。エンテロトキシン本体についてすでに遺伝子がクローニングされているものもあるため、それらの遺伝子検出用プライマーセットを用いたPCRによる検出法の開発もされてきている。嘔吐毒の検出法は生化学的試験によるものが主で、現在,嘔吐毒がHEp-2細胞およびIntestine407細胞に引き起こす空胞化試験による検出法、また,嘔吐毒による豚の精子の運動阻害やミトコンドリアの破壊現象の観察などが行われている。これらの方法は操作が煩雑で判定までに少なくとも2〜3日を要する。セレウリドの合成経路や作用機序などは明らかにされていない。cereusのみを確実に検出・同定できる迅速法はない。cereusのみを確実に検出・同定できる迅速法の開発である。cereus菌株検出に有用なプライマーセットを見出し、本発明を完成させた。cereus検出キット、に関する。検出するので、特異的かつ迅速に検出できる利点がある。(L-O-Ala-L-Val-D-O-Val-D-Val-)3と類似していることが報告されている。プライマーを設計する。これらのプライマーを用い、ゲノムDNAおよびプラスミドDNAを鋳型としてPCRによるセレウリド産生株を特異的に検出するプライマーセットを選択する。これらのプライマーセットで増幅されるDNAの塩基配列を決定し、この塩基配列をさらに特異的に増幅するためのプライマーセットを設計する。保有しないB.cereusおよびB.cereus以外のBacillus属細菌種には存在せず、特異的であるといえる。当該プローブとハイブリダイズするゲノムDNA断片を検出し、クローニングして、塩基配列を決定する。当該プローブとハイブリダイズするゲノムDNA断片を検出し、塩基配列を決定する。このセレウリド合成酵素遺伝子の塩基配列中から、この遺伝子を特異的に増幅するためのプライマーセットを設計する。保有しないB.cereusおよびB.cereus以外のBacillus属細菌種には存在せず、特異的である。以下、本発明を実施例により説明する。本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。AさらにSurfactinのアミノ酸配列に注目して、表1に示すようなプライマーを作製した。synthetaseの塩基配列を検索した。cereusのコドン表を用いて、以下のようなプライマーを設計した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの下流部位に見出される共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの下流部位に見出される共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。domainの共通アミノ酸配列をもとに作製した。thioE-4Rを作製する。cereus株52株から調製したゲノムDNAを鋳型としてPCRを行った。よる嘔吐毒(セレウリド)検出法HEp-2細胞を用い、Agataらの方法で行った。