あるiPS細胞から求める細胞を作製することを「分化誘導」といいます。分化細胞は、多様ですので、その分化誘導法もまた多様です。呼ばれる三つの胚葉から発生します。そこで、iPS細胞から分化細胞を得るためには、まず、第一段階として、求める細胞が発生する「胚葉」への分化誘導を行います。分化誘導法の紹介をします。分化誘導のポイントは、「成長因子」の濃度とタイミングです。分化にはフィーダーフリー状態のiPS細胞を用いる。WNT,ACTIVINを培養液に3日間投与し分化させる。WNT,ACTIVINを除き、BMP4を投与することによって中胚葉へと分化させる。胚様体(EB)の状態で分化誘導を行い、その後細胞を分離してからニューロスフェア(NS)形成を繰り返すことで、従来長期間かかっていた高効率なオリゴデンドロサイトへの分化誘導が55-99日程度に短縮することが可能となりました。Diseaseのメカニズムが慶應大学岡野教授の研究室で解明されました。)を作製するところがポイントです。組み合わせドーパミン産生神経細胞へと分化誘導させます。分化誘導途中でドーパミン産生前駆細胞をソーティングすることにより細胞移植に適した細胞を純化することができ、高効率でドーパミン産生細胞が得られる分化誘導方法です。継代を重ねた細胞株では誘導効率が低下する場合があります。起眠後、一定の継代数の細胞を使用して下さい。FACSを用いる場合は、CORIN抗体のメーカーや状態についても注意が必要です。弊社では高橋研のオリジナル法と同じ抗体(カン研究所製)を使用しています。2014-058926、心筋細胞の選別方法2.分化誘導法の特徴iPS細胞を浮遊培養系により心筋細胞へと分化誘導する方法です。シングルセルにしたiPS細胞からスタートし、浮遊培養系にて、各種増殖因子を作用させながら心筋細胞へと誘導します。長期間浮遊培養を実施することで、成熟した心筋細胞が得られます。5つのステップで、段階的に分化誘導因子の種類及びその組み合わせを変えることによって、19日間でインシュリン産生細胞を分化誘導する。ゼノフリー培養系でもインシュリン産生細胞を効率的に分化誘導することができる。