場合は、注入方式はフルループとする。※流速は早い場合と遅い場合、両方行うと洗浄効果は高まります。条件を設定してください。サンプルリストを作成する。※注入回数は多ければ多い程、洗浄効果は高まります。不用意には実行しないでください。整ったら、測定実行する。次に、溶媒を2に変更し、1.~8.までを実行する。使用する際は、カラムは取り付けず、代わりにユニオンを付けてください。アンモニア水をカラムに流しても良いと判断される場合は、不要となったカラムを付けておいても構いません。次に、溶媒を3に変更し、1.~8.までを実行する。使用する際は、不要となったカラムを取り付けます。Practice(GLP)に従います。溶媒の選択と取り扱いについてコンタミネーションを防ぐには溶媒(移動相)を正しくする必要があります。実験室での経験に基づく推奨事項です。推奨の溶媒でありその使用に関しての責任は負いかねます。化学的な汚染がなく不純物を含まない溶媒や試薬を使用します。0.2-μm(またはそれ以下)のフィルターで精製されています。以下のブランドの溶媒かまたはそれと同等のものを推奨します。製されているかを確認します。CAUTION:製造過程でフィルターろ過された溶媒をさらにろ過すると汚染される可能性があるためお勧めしません。超純水の使用により、長時間の平衡化で水中の汚れがカラムに濃縮されるのを防ぎます。システムに悪影響を与える汚染物質を取り除いた水です。精製プロセスは以下の通りです。SystemCAUTION:精製装置をご使用の場合は、定期的なメンテナンスを実施して下さい。分間フラッシュ洗浄を行います。時間以上保管しないで下さい。NOTE:市販の超純水を使用する場合は、使用期限を確認し、期限を過ぎたものは廃棄します。析時のバックグラウンドの上昇の原因となります。微生物の発生は、フィルター、フリッツ、カラムの詰まりの原因になると同時に、チェックバルブの故障にもつながります。このような問題から、カラム圧力とポンプの背圧が高くなり、最終的にカラム寿命を早めたり、システムの故障につながる場合もあります。移動相中の微生物の発生を防ぐには、水系の移動相は日々調製するようにし、フィルター、デガスも行います。10%程度有機溶媒(アセトニトリルやメタノールなど)を含む溶液で洗浄します。CAUTION:90%以上水を含む溶液を満たして装置を保存しないで下さい。微生物による汚染の原因となります。溶媒のデガス(脱気)使用する移動相はすべてデガスします。脱気することによりベースラインが安定し、再現性のある分析結果が得られます。NOTE:ご使用のシステムにインラインデガッサーが接続されている場合は、更なるデガスは必要ありません。0.1%蟻酸を使用する)に抑えます。b.高純度の添加剤を使用する。c.鉄等の金属イオン濃度が低い添加剤(例えば蟻酸)を使用する。d.沈殿を防ぐため、有機溶媒比率の高い移動相での無機塩や添加物の使用は避けます。塩や添加剤はグラジエントの最終過程の有機溶媒比率の高い条件下では沈殿します。使用できる揮発性の添加剤を使用します。性の添加剤はご使用になれません。CAUTION:質量分析計にご使用いただける添加剤については、システムに付属しているドキュメントを参照して下さい。以上の移動相はご使用になれません。倍量の水でウェットプライムを実施し、最低10%以上有機溶媒(メタノールやアセトニトリル)を含む移動相で洗浄します。溶媒が混合可能かを確認します。40%以上有機溶媒を含む移動相の場合はタンパク質(細胞、血液、血清サンプル)の沈殿に注意します。沈殿したタンパク質はインジェクターやチューブの詰まり、装置への吸着などコンタミネーションの原因となります。クリーンな容器に移動相を保存するa.空気中からの汚染を避けるために蓋付き溶媒ビンに溶媒を保存します。b.ホウ珪酸ガラスの瓶に溶媒を保存します。水系の移動相は遮光の褐色ホウ珪酸ガラス容器に保存します。可塑剤や汚染物質を含むプラスティック容器に溶媒を保存してはいけません。c.アルミホイルを容器のカバーに用います。CAUTION:パラフィルムや他のプラスティックフィルムをカバーに用いてはいけません。d.分析に適した(流速、分析時間に適した)できるだけ小さな容器を用います。e.溶媒は注ぎ足さず古いものは廃棄します。溶媒を取り替える場合は、使用する溶媒で容器とソルベントインレットフィルターを共洗いしてから溶媒を容器に注ぎます。その後、ウェットプライムを実施します。ガラス機器の洗浄a.移動相を調製・保存するガラス容器は使用前に洗浄します。実験器具の洗浄は以下のように実施します。・有機溶媒で洗浄した後、水で共洗いする。・使用する溶媒で洗浄する。・より慎重な洗浄が必要な場合(容器の使用歴がわからない場合)、以下の手順を実行します。:10%蟻酸または硝酸で超音波洗浄したのち、水、メタノールまたはアセトニトリル、その後再度水で洗浄します。b.ガラス器具以外の容器はガラス容器とは別に洗浄します。CAUTION:他のガラス器具と同時にガラスボトルを洗剤で洗ったり、洗浄設備で洗ったりすると、洗剤が残ることがあります。洗剤が残るとポリエチレングリコール(PEG)や他の汚れにより汚染されます。器もコンタミネーションの原因となります。c.溶媒保存用のガラス器具は他のガラス器具とは別に保管します。d.ガラス器具と溶媒ボトルが微生物で汚染された場合は、オートクレーブを使用します。汚染された場合、溶媒ボトルと装置間にあるフィルターとチューブを外して交換します。最後にシステムをアセトニトリルまたはメタノールで一晩洗浄します。サンプルの調製と取り扱いについてサンプルに不純物が含まれていてはいけません。同時に調製時にコンタミネーションが起こらないように取り扱いに十分注意します。行う際は、コールドトラップを使用します。バキュームポンプのオイルは逆流しコンタミネーションの原因となるので注意します。クリーンなバイアル・キャップ・プレートの使用a.ウォーターズブランドのバイアル;汚染がないことを保障しています。他のメーカーのバイアルについては汚染されていたり、キャップに接着剤などが使用されている場合があるので、サンプルマネージャーの汚染の原因となります。紙の包装を使っているバイアルやキャップは使用しないで下さい。紙が汚染の原因となります。サンプルマネージャーを汚染する可塑剤や接着剤を製造工程で使用していないセプタムをご使用下さい。セプタムのご使用をお勧めします。)c.ウォーターズブランドのウェルプレートをご使用下さい。(例えばフタル酸ジオクチル(diisooctylphthalates))d.アルミホイルで覆われたプレートはアルミホイルが液面に接触しない限りは問題ありません。(液面に接触すると反応する可能性があります。クリーンで不活性な部品を使用するa.溶媒やサンプルに接触する接続部品としてストッパー、O-リング、チェックバルブ、ソルベントインレットフィルター(シンカー)があります。ようなポリマーのチューブを使用する場合は、可塑剤や他のコンタミ成分への注意が必要です。glove(表1参照)を使用します。Clean”の黄色いラベルのついた部品を交換するとき(図1参照)NOTE:指サックで代用しないで下さい。System図2-パッケージからグローブを取り出す袖口は広げずに包装を開きます。片方の袖に手を通します、袖は折り返したままにしておきます。一方の手も同様の操作を行います。最後に両方の袖口を折り上げます。CAUTION:手袋の指の部分に素手で触れないようにして手袋を着用します。換など作業に必要な場所以外には触れないようにします。カラムでは不純物やタンパク質の沈殿物や有機物がカラムの入り口にトラップされます。これらの汚染物質により、カラム背圧が上昇し、選択性が変化し、カラム寿命が短くなります。物質がゆっくりと溶出しバックグラウンドノイズが大きくなります。カラムは以下のような場合に移動相中の不純物を吸着します。吸着された汚れはクロマトグラムにピークとして溶出する場合もあります。汚れを取り除き、カラムにダメージを与えない溶媒でカラムを洗浄します。カラムの洗浄方法については、各カラムの取り扱い説明書をご覧下さい。超えるアルカリ溶媒を洗浄に用いるとシリカゲルは溶解してしまいます。ようなカラムを使用します。WARNINGg:シリカカラムの洗浄方法については、各カラムの取り扱い説明書を参照します。カラムの保存カラムを保存する際は、出荷時の溶媒で充填します(例:100%アセトニトリル)。コンタミに影響する場合もあります。シロキサンは大気中に存在します。この物質は、防臭剤、化粧品に含まれており、ナノフロウのような条件下ではコンタミネーションの原因となります。フタル酸類も大気中に存在します。エアコンのフィルターから飛散し、空気と接触する溶媒や、試薬を汚染します。コンタミネーションのトラブルシューティング作業中に最大の注意を払ってもコンタミネーションを完全に防ぐことはできません。システムにおける一般的なトラブルシューティングとコンタミネーションの洗浄方法をご紹介します。ハードウェアの問題に分けてご紹介します。プローブに接続します。システムに移動相を注入します。ソルベントマネージメントシステムは完全に切り離しておきます。CAUTION:エレクトロスプレイ条件下で適切にイオン化させるために、100%の有機溶媒は注入しません。システムのトラブルシューティング”を参照して下さい。システムに汚染があると考えられます。システムのトラブルシューティング”を参照します。トラブルシューティングを行うにはカラムを取り外します。カラムを取り外しユニオンを接続します。NOTE:カラム内に汚れがトラップされ濃縮されるため、グラジエントの初期条件のような有機溶媒比率が低い溶媒を長時間送液する際は注意が必要です。汚れは、グラジエント分析の際にはカラムから溶出されます。手順(注入ステップは省く)を繰り返します。1mLずつクリーンなバイアルに入れて混合します。この混合液を質量分析計に注入します。コンタミネーションピークが検出された場合、移動相か溶媒ボトルが汚染されていると考えられます。章の“コンタミネーションを防ぐために”の“クリーンな溶媒と容器の使用”の項を参照します。混合溶媒を送液します。コンタミネーションピークが検出される場合は、原因はソルベントマネージャーまたはサンプルマネージャー(またはその両方)にあると考えられます。注入動作を行い、コンタミネーションピークが検出された場合は、ソルベントマネージャーに原因があります。