Achievements本研究では神経修飾因子シナプスに共通する分子形態基盤の確立を目指している。本年度は以下を明らかにした。1線条体アセチルコリンシナプスにおいて、興奮性または抑制性シナプスにそれぞれ選択的な足場タンパクであるShank2とgephyrinの発現を比較検討した。結果、アセチルコリンシナプスにてgephyrinが選択的に検出されたがShank2は検出されなかった。線条体アセチルコリンシナプスの分子発現は既に報告したドーパミンシナプスと同様、抑制性シナプスと相同であることが示唆された。2脳内にて最も豊富なノルアドレナリン投射を受ける分界条床核にてノルアドレナリンシナプスのシナプス構造および分子発現解析を行った。分界条床核ノルアドレナリンシナプスは65%が非対称性、35%が対称性のシナプス構造を示し、それぞれのシナプスでは興奮性または抑制性シナプスと相同なポストシナプス分子の発現を認めた。3神経修飾因子シナプスのポストシナプスにおいて観察されたシナプス接着分子ニューロリギンのプレシナプス側の結合相手であるニューレキシンには6種類の主要なアイソタイプが存在する。situハイブリダイゼーション法によりmRNA発現解析を行った。その結果、線条体アセチルコリンニューロンと黒質ドーパミンニューロンのニューレキシン発現パターンは互いによく似ていたが、分界条床核へ投射する孤束核ノルアドレナリンニューロンのものとは異なるという新たな知見を得た。変更することとなったが、おおむね当初予定していた解析を完了することができた。シナプスの形成メカニズムを明らかにするため、入力依存的なシナプス形成因子のmRNA発現プロファイリングを当初予定していたが順調に進んでおらず、現在のところニューレキシンのmRNA発現パターンの検討にとどまっている。このため全体としての進捗状況はおおむね順調に進展しているとした。Activity今後は以下のように本研究を進める予定である。研究費は主に以下の計画に伴う消耗品の購入に充てる。使用可能なアセチルコリン終末マーカーの検討を引き続き行う。2分界条床核ノルアドレナリンシナプスの解析では、これまでに同定した興奮性および抑制性シナプスと相同なシナプス構造が単一ノルアドレナリン軸索により形成されるのかを明らかにする目的で、ウイルスベクターによる少数軸索標識と共焦点レーザー顕微鏡による蛍光免疫多重染色を組み合わせた解析を予定している。situハイブリダイゼーションを用いた神経修飾因子ニューロンの種類に依存的したシナプス形成因子の探索を引き続き行うと共に、既に見出したニューレキシン発現パターンの相違の意義を検討するため、Cre-loxP系とウイルスベクターを組み合わせたニューロン選択的なニューレキシン発現の置換を計画している。