要旨:【目的】ブタの腎臓はヒトと同様の構造を有しており、よりヒトに近似した腎機能パラメーターを示すと考えられる。NIBS系ミニブタ(雌、10頭)および高齢期のミニブタ(雌、5頭)を実験に用いた。採血し、血清生化学値の測定を行った。尿中および血中クレアチニン濃度から糸球体濾過率の指標となるクレアチニン・クリアランスを算出した。検査終了後に剖検し、解剖学的検査および病理組織学的検査を行った。【結果および考察】体重当り(kg)の飲水量は、若齢動物で79土15ml/day、高齢動物で56土11ml/dayであり若齢動物で有意に高値を示した。体重当りの尿量については、差は認められなかった。体重当り(kg)の尿蛋白排泄量は、若齢動物で3.3土1.9mg/day、高齢動物で19.0土16.4mg/dayであり高齢動物で有意に高値であった。高値を示した4例は、剖検時の尿沈渣の検査結果より膀胱炎と診断され、その病態に起因したと考えられた。血清生化学値は、腎機能の指標となるBUN、Cre等のパラメーターに差は認められなかった。クレアチニン・クリアランスは、若齢動物で2.4土0.3ml/min/kg、高齢動物で1.5土0.5ml/min/kgであり高齢動物で有意に低値を示した。病理学的検査では高齢動物の4例で単純性腎嚢胞の形成が認められた。以上の結果より、尿中排泄量および血清生化学値では腎機能に異常はみられなかったが、高齢動物でレアチニン・クリアランスが低値を示しており、緩やかな腎機能低下の可能性が示唆された。2006年より、独自に系統確立したNIBS系ミニブタの体細胞クローン個体作製に関する研究を開始した。センターの山田和彦先生と共同で、異種臓器移植を最終目標に掲げたα1,3-ガラクトース転移酵素遺伝子ノックアウト(GalT-KO)ミニブタの作出を併せて行ってきた。GalT-KOミニブタ作出の具体的な手法としては、既に米国で確立され信頼性のあるGalT-KOマサチューセッツ総合病院ミニブタの細胞をドナー細胞に用いた。11頭(死産・仮親による圧死を含む)のGalT-KOミニブタを得、3頭については、カニクイザルとの異種間の腎臓移植を行い良好な成績を得た。移植時の抗体産生評価及び精液凍結保存のために、それぞれ1頭ずつを長期に渡って飼育してきた。共同で、動脈硬化症の有用な動物モデルとなることが期待されるヒトアポリポプロテイン(a)遺伝子を導入したNIBS系ミニブタの作製を行った。11頭のTg個体を得ることに成功し、雄1頭及び雌2頭は長期飼育が可能であった。本日は、これら遺伝子改変ミニブタの作出に関する成果を報告する。japonica)は、ニワトリと並ぶ鳥類を代表する実験動物であり、様々な実験用系統が作成されている。ニホンウズラのゲノム解読によってその重要性はさらに大きくなりつつある。それらの系統を研究に用いる上で、各系統の遺伝的多様性や系統間の遺伝的類縁関係は必須の情報であり、また、野生種との遺伝的な違いや家禽化の歴史的背景の情報も重要である。ニホンウズラは東アジアを起源とし、現在の家禽ニホンウズラは日本の野生個体から作成されたといわれている。1920年代に日本で本格的な商業的利用が始まったといわれている。その後、家禽ニホンウズラはアメリカ、ヨーロッパや中東に輸出され、卵生産や体サイズなど、各地で有用とされる形質が選抜されていった。改良された食肉用の大型品種が日本に逆輸入されている。このように、ニホンウズラの家禽集団は複雑な歴史的背景を持ち、その遺伝的背景は多様であると推察される。本研究では、演者らが開発したマイクロサテライトマーカーとmtDNAを用いて、様々な実験用ニホンウズラ系統、および野生ウズラ集団の遺伝的特性と遺伝的類縁関係を明らかにした。al.(投稿準備中)で用いられた、ニホンウズラの1番~28番および性染色体をカバーする50個のマイクロサテライトマーカーを遺伝的特性の調査に用いた。AMRPやWEなど15系統について、それぞれ6~40個体を解析した。バイオサイエンス研究センター(ABRC)で維持されているrb系が最も低い値(0.11)を、ハンガリー(Hn)系が最も高い値(0.51)を示した。【考察】野生ウズラ16個体(本州産9羽、対馬産2羽、旅順半島産5羽)についても解析した結果、ヘテロ接合度は0.59であり、野生捕獲個体から実験用系統として育成されたWild系の0.57に比べてやや高い値を示した。loopを用いた分子系統学的解析の結果、三つのハプロタイプが観察され、今回解析した実験用ニホンウズラ系統は複数の母系集団に由来することが示唆された。要旨:【目的】マハタ養殖は、陸上水槽で生産された人工種苗を秋に野外へ沖出しした後、海面生け簀でおよそ2~3年間養成して出荷する。ウイルス性神経壊死症は、沖出し後のマハタ稚魚に大量死を引き起こすため問題になっている。ワクチン液を注射したマハタにおける沖出し後の追跡調査に関する知見は少ない。そこで本報告では沖出しから水揚げまでに相当する約2.5年間にわたり、ワクチン液を注射したマハタの中和抗体価の推移や歩留まりを調査し、その効果を評価した。【方法】2012年産マハタ人工種苗を用い、三重県尾鷲湾の海面生け簀で試験を実施した。死亡率の推移を調べた。比較として無接種対照群について同様に評価した。2~4月に低下する傾向があるものの、ワクチン液を注射した群は本疾病発生リスクがある時期(6~12月)に抗体価の上昇が認められ、ウイルス抗原への曝露が疑われると共に養成期間を通じて免疫記憶が持続すると推測された。ワクチン注射群は、疾病発生リスクがある期間において中和抗体価の幾何平均値が115以上(室内感染試験において感染防御効果を有する値)に達した。試験終了時のワクチン注射群の生残率は無接種対照群に比較して有意に高かった。試験期間中の死亡魚の主因は本疾病であることを確認した。群間で試験終了時の平均体重に有意差は認められなかった。本症例において、ワクチン液を投与されたマハタは養成期間全体を通じてVNNに対する死亡率低減効果を示した。発生は肉用鶏において日常的に認められ、育成率の低下及び増体重の減少による生産成績の悪化や、食鳥検査における廃棄の増加など、経済性に大きな影響を与えている。2013年7月に鶏大腸菌症生ワクチンが上市され、2014年2月までに35農場約130万羽に投与された。これまでに得られた成績を解析すると生産性を示す指標が改善しているだけでなく、そこにある一定の傾向も認められた。これらについて、いくつかの事例を示しながら報告する。【材料と方法】肉用鶏農場において鶏大腸菌症生ワクチン投与群と非投与対照群を設定し、出荷時における育成率および平均体重等の生産成績ならびに食鳥検査における全廃棄率とその内訳を比較した。得られた各農場の成績について、改善傾向と季節や生産指数(PS)の相関の有無を解析した。【結果】ワクチン投与群では育成率、増体および屠場での廃棄率に改善が見られた。この改善傾向は一貫しておらず農場によって様々であったが、ワクチン投与による費用対効果は多くの農場で得られることが判明した。このような成績改善は生産指数が一定の範囲の場合に強く表れる傾向が認められただけでなく、気温が下がった時期での屠場廃棄率がより減少する可能性も示唆された。【総括】農場によって鶏舎の環境や鶏種、飼料などの生産成績に関わる要因が異なることもあり、ワクチン投与での成績改善を単純には比較検証できなかった。一方で、出荷成績から収支を算出すると多くの農場で改善が認められたことから、ワクチンの効果判定には費用対効果の算出が重要である。今後はさらに症例数を増やし、通年での成績の比較や生産性改善が与える腸内細菌叢への影響を調査していきたい。要旨:鶏大腸菌症の発生は肉用鶏において日常的に認められ、育成率の低下及び増体重の減少による生産成績の悪化や、食鳥検査における廃棄の増加など、経済性に大きな影響を与えている。2013年7月に鶏大腸菌症生ワクチンが上市され、多くの農場で使用されている。ケージに対して投与等、各農場に適した投与方法を模索しつつ、生産成績の収集を実施してきた。農場によって鶏舎の環境や鶏種、飼料などの生産成績に関わる要因が異なることもあり、ワクチン投与あるいは投与方法の違いによる成績改善を単純には比較検証できなかったが、多くの農場で費用対効果が認められた。多くの鶏への円滑な投与を目的として開発を進めてきた孵化場での自動噴霧装置も運用を開始しており、徐々に成績が得られてきている。要旨:牛白血病ウイルス(BLV)感染による病態進行は個体差による要因が大きく、ワクチン等の効果判定を非常に困難なものとしている。我々はこれまで、牛白血病の病態進行にウシ主要組織適合抗原(MHC)クラスIIの多型性が重要な宿主因子である事を明らかにしてきた。本研究では、新規に開発された炭酸アパタイト(CO3Ap)固定化ペプチドワクチンの効果判定を、初めて牛白血病感受性牛を用いて行い、ワクチン効果の判定を行った。受精卵移植により発症感受性牛6頭を作出し、BLVで攻撃後、CO3Ap固定化p12-4R1及びgp51R1を1mg/頭ずつ3週間隔・3回皮内接種し病態抑制効果を判定した(BLV接種後161日目まで観察)。比較対照として中立牛4頭を用いた試験も行った(BLV接種後119日目まで観察)。次に発症感受性牛5頭を用意し、3頭にワクチンを接種した。2頭は無処置群として用い、5頭同時にBLV陽性牛群に237日間放牧して伝播抑制効果としての感染の有無を判定した。して非接種牛3頭では、プロウイルス量、リンパ球数、CD5陽性B細胞数が増加したが、ワクチン接種牛3頭においてはいずれも抑制されていた。中立牛4頭の試験では個体差が大きく、ワクチン接種効果は認められなかった。伝播抑制効果として、ワクチン接種牛3頭、無処置牛2頭いずれも試験期間中には抗体陽転しなかったが、ワクチン接種牛で0-2回、無処置牛で2-3回に渡って微量のプロウイルスが検出された。感受性牛を用いる事でワクチンの病態進行抑制効果の検出に成功した。感受性牛を用いた評価法は、BLVに対するワクチンや治療薬の評価に大変有効である事が示された。スライドフォーラム要旨:10週齢のホルシュタイン種に牛ヘルペスウイルス1(BoHV-1)を鼻腔内接種し、3週後に安楽殺した。肉眼病変として左・右肺の前葉と右中葉に限界明瞭な無気肺病巣が観察されたが、その他の諸臓器に著変は認められなかった。と一部に気管支間質性肺炎が所見された。4)異物巨細胞性の小肉芽腫などが認められた。本症例の特徴病変である細気管支のポリープ様肉芽組織の多くは細気管支腔を狭小化~閉塞していたが、周囲の肺組織には膠原繊維等の線維増生は見られなかった。ポリープ様肉芽組織はそれらの切断方向や部位により様々な形態と特徴を示していた。肉芽組織が完全に細気管支を閉塞しその周囲にリンパ球浸潤を伴うもの、化膿性滲出物を吸収するかのように粘膜から増殖する肉芽組織、終末~呼吸細気管支にかけて形成された炎症細胞浸潤を伴わないポリープ様肉芽組織などであった。ポリープ様肉芽組織の多くは、その一部が細気管支粘膜から増殖した血管結合組織により形成されていた。対する拒絶反応、などによる細気管支粘膜の傷害が挙げられている。傷害を受けると、残存する上皮細胞や粘膜固有層の線維芽細胞が様々なサイトカインや接着分子などを発現し、障害部位あるいは滲出物付着部位に細胞外マトリックスを形成し、それに対して線維芽細胞や毛細血管が増殖しその表面を既存の上皮細胞が増殖しながら覆い、腔内にポリープが形成されると考えられている。従って、本症例はBVH1と細菌の二次感染などによる粘膜上皮細胞への障害がポリープ形成の起因になったと推測された。