マウス関節軟骨におけるHyaluronidase-2の発現抑制は変形性関節症を進行させる。マウス関節軟骨におけるHyaluronidase-2の発現抑制は変形性関節症を進行させる。マウス関節軟骨におけるHyaluronidase-2の発現抑制は変形性関節症を進行させる。cultureによるOAモデルでも認められた。ADAMTS-5の発現亢進が認められた。マウス関節軟骨におけるHyaluronidase-2(Hyal2)の発現抑制により高分子ヒアルロン酸が関節軟骨に異常蓄積し、変形性関節症が発症、進行することを明らかにしました。Hyal2の発現抑制は、過去に報告されたHyal1の発現抑制によって発症するムコ多糖症IXにおいて、軟骨へのヒアルロン酸が異常に蓄積し、変形性関節症を発症する病態と類似していることを示唆しています。1.背景ヒアルロン酸は様々な組織の細胞外基質の主要構成成分です。ヒアルロン酸は関節軟骨、関節の滑液および眼の硝子体液を含む結合組織において特に豊富です。ヒアルロン酸の代謝と異化のバランスは、結合組織の質の維持にとって大変重要です。ヒアルロン酸の、特に関節軟骨における分解過程はまだ明らかにされていません。2つのヒアルロン酸分解酵素(Hyal1およびHyal2)および細胞表面ヒアルロン酸受容体(CD44)は、ヒアルロン酸分解において重要な役割を果たすと推測されています(図1)。Hyal1の機能不全は、ムコ多糖症(MPS)IXを引き起こします。OA)の発症を特徴とする病気です。Hyal2機能不全マウスは頭蓋顔面および頚椎の異常を示しましたが、関節軟骨および変形性関節症の発症に関する報告はされていません。cultureモデルを使用して、Hyal2発現抑制がOAの発達および進行に関連するかを明らかにすることを目的として実験を行いました。発現抑制マウスはサフラニンO染色が顕著に低下し、軟骨損傷が強いことを証明しました(図2A,E,I)。ヒアルロン酸染色(B-HABP染色)の結果、Hyal2発現抑制マウスは野生型マウスより関節軟骨における染色性が強く、HA蓄積が多く蓄積していることを示しました(図2B,F)。発現抑制マウスの方がより高値でした(図3)。Hyal2発現抑制マウスの関節軟骨では、野生型マウスに比べてADAMTS-5およびMMP-13陽性の軟骨細胞を多く観察できました(図2C,D,G,H,J)。図29ヶ月齢の野生型マウス(A-D)およびHyal2発現抑制マウス(E-H)の自然老化における関節軟骨の組織学的評価、B-HABP染色および免疫染色の結果。<0.01図39ヶ月齢のHyal2発現抑制マウスの膝関節および大腿骨頭から抽出したヒアルロン酸および既知の分子サイズを有するヒアルロン酸に対するセファクリルS-1000ゲル濾過クロマトグラフィーの結果。この方法を用いて、ヒアルロン酸の分子量を測定しました。各画分のヒアルロン酸含量は、競合ELISA法を用いて測定しました。O染色の結果、野生型マウスと比較して、Hyal2発現抑制マウスはプロテオグリカンの染色性が低下し、軟骨損傷が強かったことを証明しました(図4A,E,I)。ヒアルロン酸染色(B-HABP染色)の結果、野生型マウスと比較して、Hyal2機能不全マウスの関節軟骨における染色性が強く、ヒアルロン酸が多く蓄積していることを示しました(図4B,F)。Hyal2発現抑制マウスの関節軟骨では、野生型マウスに比べてADAMTS-5およびMMP-13陽性の軟骨細胞を多く観察できました(図4C,D,G,H,J,K)。図4DMM術後10カ月の野生型マウス(A-D)およびHyal2発現抑制マウス(E-H)における関節軟骨の組織学的評価、B-HABP染色および免疫染色の結果。