アンプリコアは、メーカー推奨の手順で検査を実施した。PCR法については以下の通りである。NALC-NaOH液により前処理した検体に専用の細胞溶解液を添加しインキュベーション後、フェノール/クロロホルム法にてDNAを抽出した。このDNAを鋳型としNested-PCR法を実施した。本法では操作の各ステップにおいて、コンタミネーションによる偽陽性を回避するための様々な防止策を講じた。DNA抽出操作及びPCR反応の精度管理目的でヒトβグロビン遺伝子を同時に増幅した。PCR法の1段階目のPCRで陽性結果が得られた。PCRが陽性となったものが2検体あった。この2例はいずれも塗抹、培養陰性の胸水検体であった。TBの核酸増幅検査は現在、アンプリコアが広く用いられているが、呼吸器系以外の検体での陽性率は低く、特に塗抹陰性検体における感度については低い傾向にあると報告されている。PCR法が有効である可能性が示唆された。/論文のサマリーを開く【はじめに】ノロウイルス(NoV)は、冬季に多発する感染性胃腸炎の主要な起因ウイルスである。NoVはウイルス量が数十個でも感染が成立するといわれており、感染力の強さが特徴である。そのため、一度感染者が発生すると瞬く間にヒト・ヒト間の二次感染が拡大する。この様な特徴を持つNoVには、感染のリスクマネジメント上、迅速・高感度に検出できる性能を有する検査法が求められる。TechnologyノロウイルスG1、G2検出試薬キット(以下、本キット)」は、RNA抽出などの検体前処理工程を必要とせず直接糞便中のNoVを検出することが可能であり、検査時間・労力の大幅な削減が期待できる。今回、本キットと従来法の相関性、操作性および検査所要時間について検討したので報告する。対象として、臨床所見から感染性胃腸炎が疑われた糞便検体28例を用いた。このうち3例は、ロタウイルス抗原陽性糞便検体2例、ロタウイルス抗原陰性糞便検体1例であり、キットの特異性の確認に供した。本キットの操作法および判定方法は取扱説明書に従った。RT‐PCR法(以下、公定法)を実施した。所要時間の検討では、検体前処理から判定までの時間を公定法と比較した。公定法と本キットの相関性検討の結果、感度93.8%、特異度88.9%、一致率92.0%であり、本キットは公定法と同等の性能を有していた。ロタウイルスに対する交差反応は認められなかった。所要時間の比較では、公定法は約7時間、本キットは約4時間であった。ない分、糞便中の阻害物質による増幅阻害についての精度管理が重要となるが、インターナルコントロールが予め試薬に含まれているため、全検体について偽陰性の有無を確認することが可能であった。TechnologyノロウイルスG1、G2検出試薬キット」は、公定法と同等の性能を有し、かつ公定法よりも簡便・迅速にNoV遺伝子を検出可能であることから、実地臨床のニーズに則しているという点で極めて有用なキットであると考えられた。TechnologyノロウイルスG1、G2検出試薬キット(以下、本キット)」は、前処理工程を必要とせず直接糞便中のNoVを高感度に検出することが可能である。感染性胃腸炎が疑われた糞便検体28例を用いた。RT‐PCR法(以下、公定法)を実施した。結果、感度93.8%、特異度91.7%、一致率92.9%であり、本キットは公定法と同等の性能を有していた。ない分、糞便中の阻害物質による増幅阻害についての精度管理が重要となるが、インターナルコントロールが予め試薬に含まれているため、全検体について偽陰性の有無を確認することが可能であった。以上の結果から、本キットは実地臨床のニーズに則しているという点で極めて有用なキットであると考えられた。|検査インフォメーション|リクルート|品質保証体制|サイトのご利用について|個人情報保護方針|リンク一覧|お問い合わせ|サイトマップ|職員専用|。