Achievements本研究では、受精後の遺伝子発現プログラムの実態、更にはその調節機構を明らかにすることを目的として、次の研究計画を立案した。Clock、(3)段階的変化、の3つを想定し、これらを抑制することで遺伝子発現パターンがどのように変化するのかをRNAシーケンスで解析する。その変化の様相を解析することで、遺伝子発現プログラムの全貌解明へのマイルストーンとする。平成29年度においては、まず蓋然性は高いがこれまでその可能性を示す研究結果が報告されていない、(3)段階的変化について調べた。ZGA)を抑制する実験を行った。clockは進行)、また母性mRNAの調節による発生も進行する((1)発生イベントも進行)。したがって、この実験は純粋に遺伝子発現プログラムが「(3)段階的変化」によるものであるかを調べるために有効なものであると言える。ZGAが起こることが明らかとなった。ZGAへと段階的に遺伝子発現を変化させていくことが明らかとなった。planned.Reason本年度の計画は、研究実績の項で記したように、遺伝子発現プログラムの実態、およびその調節機構を明らかにするものである。スタート時の遺伝子発現プログラムについて明らかにすることはその後のプログラムの流れを解析・理解していくうえで必須のものと考えられる。ZGAへとつながるプログラムの調節に関してはまったく研究することができない状況であった。ZGAで発現する遺伝子(および遺伝子間領域)が明らかにされたことで、本研究の解析が可能となった。ZGAを一過的に抑制することで、段階的にプログラムが調節されているかどうかについての検証を行った。ZGAへと段階的に遺伝子発現を変化させていくことが明らかとなった。示された初めての例となる。以上、本研究プロジェクトは、ここまでの結果で十分な進展があったものと考えられる。ZGAへと段階を追ってプログラムが進行することが示された。clockが関わっていないということを示すものではない。ZGAへの切り替わりにこれらの陰唇が関与しているかどうかを明らかにする。具体的には以下の実験を試みる。polymeraseの阻害剤であるaphidicolin及びM期促進因子の阻害剤であるroscovitineを1、2細胞期に作用させ、その後の遺伝子発現の経時的変化をRNAシーケンスにより調べる。BのsiRNAを顕微注入し発生の進行を止めて、その後の遺伝子発現の経時的変化をRNAシーケンスにより調べる。