AchievementsCHCHD2遺伝子変異の病態生理機能を解析するために、今年度は昨年度未実施であったメチル化解析について新たにデザインしたプライマーを数組作成し検討したが、目的のPCR産物を得ることが出来ず断念した。CHCHD2変異陽性患者iPS細胞からドーパミン細胞へ分化させた試料を用い、ミトコンドリア機能について詳細に解析した結果、酸素消費度の測定からATP合成、最大呼吸がコントロール細胞に比べ有意に低下していることが明らかとなった。ATP量とATP合成能を生化学的に解析した結果、いずれもコントロール細胞に比べ有意に低下していた。従って、パーキンソン病の発症原因であるCHCHD2遺伝子変異はミトコンドリアの酸素呼吸障害を引き起こすことが判明した。ヒト神経芽細胞腫SH-SY5Y細胞をCRISPE/Cas9システムを用いてCHCHD2ノックアウト細胞を2ライン追加で作成し、昨年までに作成したCHCHD2ノックアウト細胞と表現型の比較を行った。その結果、ATP量、ATP合成能や酸素呼吸は既作成CHCHD2ノックアウト細胞と同様に野生型細胞に比べ有意に低下していた一方、当初作成したノックアウト細胞で亢進していた解糖系も低下傾向であった。既作成ノックアウト細胞はミトコンドリア呼吸差複合体の構成タンパクであるMTCO2が減少したが、新規作成細胞はMTCO2は不変でCOA4が減少していた。いずれのタンパクも複合体IVに関与するため、CHCHD2は複合体IVの機能調節に関与していることが明らかとなった。