Japanese)リゾリン脂質は、酵素であるホスホリパーゼA1、A2、Bなどの加水分解作用によって、基質であるリン脂質から生成される化合物であり、細胞内で代謝に深く関わっていることが知られている。リゾホスファチジルコリンに作用する酵素であるリゾホスホリパーゼDは、別名オートタキシン(ATX:Autotaxin)として知られ、癌細胞の運動性を促進するだけでなく、ホストの血管形成を促進することにより癌の形成に深く関与することが知られている。オートタキシンにより生成されるリゾホスファチジン酸が信号の役割をしていることも知られている。血清、血漿中のリゾホスファチジルコリンは動脈硬化と相関があり、リゾホスファチジン酸は発毛を促進する効果があることも発見されている。動脈硬化と相関がある血清、血漿中のリゾホスファチジルコリンを定量する方法として酵素法が知られているが、微生物由来酵素が見つかっていないため、従来は酵素を高コストで製造しているものと考えられる。従来のリゾホスファチジン酸の製造方法も、高コストな天然物からの抽出法である。アルツハイマー型認知症とコリン型プラズマローゲンの血中濃度とは相関があるので、コリン型プラズマローゲンに作用するホスホリパーゼDが発見されれば、体外診断薬酵素として利用可能であると期待されている。コリン型プラズマローゲンに作用するホスホリパーゼDはこれまで発見されていない。特許文献1に記載の酵素は、ラット由来のものであり、大量生産が難しく、活性も極めて低い。選択性が低くスフィンゴミエリンにも作用するため定量性が低いと予想される。応用が期待できると考えられる。sp.の酵素が知られている。前二者は病原性微生物であり、Actinomadurasp.は放線菌であるが、これらの酵素のアミノ酸配列は明らかにされていない。Japanese)本発明は、コリン型プラズマローゲン及びリゾリン脂質の3位リン酸ジエステルを加水分解してコリンなどを遊離させる作用を有する新規なホスホリパーゼD、前記ホスホリパーゼDをコードするポリヌクレオチド、前記ホスホリパーゼDの製造方法、コリン型プラズマローゲンの測定方法、リゾホスファチジルコリンの測定方法、リゾホスファチジン酸の製造方法に関する。/又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド;又は(c)配列番号2に記載のアミノ酸配列と少なくとも95%の同一性を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド。【請求項2】リゾホスファチジルコリンを基質とした場合に、pH5.6で37°Cにて5分間の条件での加水分解活性を100%としたときに、pH4.4からpH7.2の範囲内で50%以上の加水分解活性を示す、請求項1に記載のホスホリパーゼD。【請求項3】リゾホスファチジルコリンを基質とした場合に、pH5.6で65°Cにて5分間の条件での加水分解活性を100%としたときに、37°Cから80°Cの範囲内で50%以上の加水分解活性を示す、請求項1又は2に記載のホスホリパーゼD。【請求項4】SDS-PAGEで測定した場合の分子量が50,000~60,000の範囲内である、請求項1乃至3のいずれか一項に記載のホスホリパーゼD。【請求項5】ストレプトマイセス(Streptomyces)属に属する微生物に由来する、請求項1乃至4のいずれか一項に記載のホスホリパーゼD。請求項1乃至5のいずれか一項に記載のホスホリパーゼDをコードする、ポリヌクレオチド。以下の(a)又は(b)に記載のポリヌクレオチドを含む、請求項6に記載のポリヌクレオチド:(a)配列番号1に記載の塩基配列からなるポリヌクレオチド;又は(b)配列番号1に記載の塩基配列と少なくとも90%の配列同一性を有するポリヌクレオチド。【請求項8】ストレプトマイセス(Streptomyces)属に属する微生物に由来する、請求項6又は7に記載のポリヌクレオチド。前記ホスホリパーゼDは、コリン型プラズマローゲン及びリゾリン脂質の3位リン酸エステルを加水分解してコリンを遊離させる作用を有し、以下の(a)から(c)のいずれかに記載のポリペプチドを含む、コリン型プラズマローゲンの測定方法。/又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド;又は(c)配列番号2に記載のアミノ酸配列と少なくとも95%の同一性を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド。前記ホスホリパーゼDは、コリン型プラズマローゲン及びリゾリン脂質の3位リン酸エステルを加水分解してコリンを遊離させる作用を有し、以下の(a)から(c)のいずれかに記載のポリペプチドを含む、リゾホスファチジルコリンの測定方法。/又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド;又は(c)配列番号2に記載のアミノ酸配列と少なくとも95%の同一性を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド。前記ホスホリパーゼDは、コリン型プラズマローゲン及びリゾリン脂質の3位リン酸エステルを加水分解してコリンを遊離させる作用を有し、以下の(a)から(c)のいずれかに記載のポリペプチドを含む、リゾホスファチジン酸の製造方法。/又は付加されたアミノ酸配列を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド;又は(c)配列番号2に記載のアミノ酸配列と少なくとも95%の同一性を有し、かつ前記加水分解作用を示すポリペプチド。