1987)をパッケージングすることができ、追加の約2kBのDNAの受容能を提供する。E1およびE3領域中で取り替え可能な約5.5kBのDNAと合わせて、現行のアデノウイルスベクターの最大容量は7.5kB未満であり、すなわち該ベクターの全長の約15%である。アデノウイルスのウイルスゲノムの80%を超える部分はベクター主鎖中に残存し、それはベクターが有する細胞障害性の源である。E1欠失ウイルスの複製欠損は不完全である。他のヒトの胚性の間葉細胞または上皮細胞に由来してよい。該ヘルパー細胞は、ヒトアデノウイルスに関して許容される他の哺乳動物種の細胞に由来してよい。そのような細胞には、例えばVero細胞または他のサルの胚性の間葉細胞または上皮細胞が含まれる。上記のように、現在好ましいヘルパー細胞株は293である。al.(1995)は、293細胞を培養してアデノウイルスを増殖させるための改善された方法を開示した。UK)中に個々の細胞を接種することによって天然細胞凝集物を培養する。40rpmで撹拌した後、トリパンブルーで細胞生存度を見積もる。UK)(5g/l)を以下のように使用する。5mlの培地に再懸濁した接種用細胞を250ml三角フラスコ中の担体(50ml)に加え、1〜4時間、時折撹拌しながら静置する。その培地を50mlの新鮮な培地と取り替え、振とうを開始する。ウイルス生産では、細胞を約80%集密まで成長させ、その後、培地を取り除き(最終容量の25%にする)、アデノウイルスをMOI0.05で加える。培養を一晩静置し、その後、容量を増加させて100%にし、さらに72時間の振とうを開始する。【0149】アデノウイルスベクターが複製欠損、または少なくとも条件的に欠損であるという必要条件以外に、アデノウイルスベクターの性質は発明の実施を成功させるために重要ではないと考えられる。アデノウイルスは、42種の異なる公知の血清型または亜群A〜Fのいずれかであってよい。亜群Cの5型アデノウイルスは、本発明で使用するための条件的複製欠損アデノウイルスベクターを取得するために好ましい出発材料である。その理由は、5型アデノウイルスがヒトアデノウイルスであり、それについて非常に多くの生化学的情報および遺伝情報が公知であり、かつ歴史的に、ベクターとしてアデノウイルスを使用するほとんどの構築物に使用されているからである。上記のように、本発明の典型的ベクターは複製欠損であり、アデノウイルスE1領域を有さない。ゆえに、E1コード配列が除去されている位置で目的の遺伝子をコードするポリヌクレオチドを導入することが最も好都合である。アデノウイルス配列内の構築物を挿入する位置は本発明にとって重要ではない。(1986)によって報告されているようにE3置換ベクター中の欠失E3領域の代わりに挿入するか、あるいはヘルパー細胞株またはヘルパーウイルスがE4欠損を補完する場合のE4領域中に挿入してもよい。vivoで広い宿主範囲を示す。この群のウイルスは高い力価、例えば109〜1011プラーク形成単位/mlで取得することができ、それらは非常に感染性である。アデノウイルスの生活環は宿主細胞ゲノム内への組込みを必要としない。アデノウイルスベクターによって送達される外来遺伝子はエピソーム性であり、したがって宿主細胞に対する低い遺伝毒性しか有さない。vivo遺伝子導入ベクターとしての治療的潜在能力を示す。1992)において使用されている。1993)が含まれる。【0153】アデノウイルスベクターはヒトアデノウイルスに由来してよい。print]を参照のこと)。そのように生じたDNAはプロウイルスとして細胞の染色体内に安定に組込まれ、ウイルスタンパク質の合成を導く。組込みの結果、レシピエント細胞およびその子孫においてウイルス遺伝子の配列が保持される。レトロウイルスのゲノムは、それぞれキャプシドタンパク質、ポリメラーゼ酵素、およびエンベロープ成分をコードするgag、pol、およびenvの3遺伝子を含有する。gag遺伝子の上流に見出される配列は、ゲノムをビリオン内へパッケージングするためのシグナルを含有する。ウイルスゲノムの5’および3’末端に2個の長末端反復(LTR)配列が存在する。【0155】レトロウイルスベクターを構築するために、ウイルスゲノムの特定のウイルス配列の代わりに1以上の目的のオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド配列をコードする核酸を挿入し、複製欠損であるウイルスを得る。