Achievements本研究では末梢組織からの感覚入力が脊髄後角の神経細胞ネットワークでどのように情報処理され、上位中枢に出力されるかを明らかにするため、形態観察用の蛍光タンパク(GFP)だけでなく機能解析用のCa2+センサー蛍光タンパクを子宮内遺伝子導入により脊髄後角神経細胞に発現させたマウスを用いて平成26年度の研究実施計画1)~3)に沿って多光子励起顕微鏡を用いた研究を実施し、以下の成果が得られた。vivoで解明を行った。1回の皮膚刺激により応答する細胞が数10個同時に観察され、脊髄後角の表層では侵害刺激の受容として、熱や機械的刺激に応答するニューロン、深層では触による非侵害刺激に応答するニューロンが多数存在することを認めた。Neurosci.に発表した。3)脊髄後角ニューロン選択性、抑制ニューロン選択性をもつドライバーマウスとレポーターマウスを交配して、それらのニューロンに選択的にCa2+センサー蛍光タンパクを発現するトランスジェニックマウスを作製し、実験を開始した。planned.Reason平成25年度実験計画の(1)~(3)は予定通り実験が実施され、成果が得られた。(5)の痒みモデル動物系を確立し、実験を実施し、早急に論文を作成する予定である。(4)の脊髄後角ニューロンとDRGニューロンの共培養系の実験は、現時点では開始できていない。平成26年度実施計画(1)~(5)の4項目が達成できていることからB:おおむね順調に進展していると考える。用いて刺激応答を解析する。昨年度報告した末梢組織からの刺激応答が脊髄後角の数多くのニューロンの情報処理の統合された結果を投射ニューロンの出力として捉え、出力に対する阻害薬・拮抗薬の影響を検討し、それに関与する生体因子を解析する。神経伝達物質グルタミン酸で直接刺激し、さらにPGE2作動薬・拮抗薬を用いてCa2+応答を解析する。ニューロン、介在ニューロン、下行性抑制ニューロンが複雑に絡み合った神経回路網を形成し、情報処理され出力される。神経回路網の情報処理は、投射ニューロンに集約されることから、脳幹にコレラ毒素を投与して投射ニューロンを同定し、その刺激応答を解析する。(西田、松村)4)痒みモデルマウスを作製し、痒みの伝達にグルタミン酸が関与することを明らかにしているので、疼痛と痒みの神経ネットワークの違いを検討する。Carryover研究計画は研究実績概要に記載したように、順調に進捗している。次年度使用額が生じた主な理由は当初予定していた研究支援者の雇用費が十分使用できなかったためである。Budget平成26年度に雇用した研究支援者の雇用を継続させるために基金分の一部を今年度執行する予定である。