蛍光検出装置で画像を取得SDS-PAGE以外のタンパク電気泳動法これまで解説してきたSDS-PAGE以外の電気泳動もあります。SDS-PAGEここではこれらについて、簡単に紹介します。タンパク質を変性させて泳動しますが、サンプル中のS-S結合を切断したくない場合には還元剤を入れずに移動することがあります。通常のSDS-PAGEサンプルバッファーから還元剤を除くだけで実施可能です。注意点として、1枚の同じゲルに還元剤を含むサンプルと含まないサンプルを同時に流した場合、還元剤が拡散して非還元状態のサンプルを還元してしまう可能性があります。タンパク質の泳動度は分子量に依存しますが、S-S結合でオリゴマーになっている場合はオリゴマーの分子量のところにバンドが出ることになります。kDaのバンドとして現れます。(SDS)と還元剤を使わないポリアクリルアミドゲル電気泳動のことです。SDS-PAGEの系からSDSと還元剤を抜けばいいです。タンパク質の泳動度は分子量だけでなく電荷に大きく依存するので、適切なバッファーを選び、プラス極とマイナス極のどちらに移動されるかを検討しておかなければいけません。8.8のバッファー中では負に荷電しているためプラス極側に移動することになります。等電点が8に近いタンパク質では電荷が少なくなるためあまり泳動しなくなり、さらに等電点が大きいタンパクはマイナス極側に移動することになります。加えて移動する方法もあります。尿素はタンパクを変性させ、変性状態で泳動することになりますが、Native-PAGEと同じくタンパク質自身の電荷で移動するので移動度はタンパク質の電荷を反映します。リン酸化状態の違いを検出したい時、分子量の近い複数のタンパク質を分離したい場合に使われています。SDS-PAGESDS-PAGEで検出できる最も小さいタンパクは分子量12000程度です。SDS-PAGEを使うといいです。分子量3000から1万くらいのタンパク質を分離できます。これよりも小さい場合、通常の染色操作を行う時にゲルから抜けてしまう可能性があり、検出は困難かもしれません。関連サイト・図書この記事に関連した内容を紹介しているサイトや本はこちらです。【失敗原因の考察も】MBLライフサイエンス社リンクまとめ最後に今回の内容をまとめます。ポータルサイト】生命医学をハックするをお読みいただきありがとうございました。生命科学研究は、研究手法が大きく前進したこととコンピューターの発達なども相まって、かつてないほどの勢いで知識の整備が進んでいます。ない方や、未来を担う学生さんに向けた情報発信をしています。2週間に1回のペースで、サイトの更新情報や、それらをまとめた解説記事をニュースレターとして発行しています。メールアドレスの登録は無料で、もちろんいつでも解除することができます。サイト名の「ハックする」には、分かってきたことを駆使し、それを応用して、病気の治療や研究などにさらに活用していこうという意味があります。英語学習でお世話になることの多い英英辞典。その中でも、特に英語学習にオススメの初学者向きのものを中心に紹介します。救急車が来るまでの間に周りの方が正しく心肺蘇生をしていないと救命は困難です。この記事では、知っておきたい救命処置についてまとめました。薬局にはたくさんの痛み止めの湿布があります。これらの貼り薬はそれぞれに特徴があります。この記事ではそれらについてまとめました。ついて、どのように効くのかや副作用、注意すべき点などにつ...生命科学タンパク変異体のデザイン法タンパク質の機能を理解する上で、あるアミノ酸を変化させたときにどうなるかを調べることはとても大事です。物語】転写・翻訳とセントラルドグマ生命活動を実際に行っているのは、主にタンパク質なので、DNAの遺伝情報を使ってタンパク質を作らないといけません。手術するロボットが広まっているロボットで手術するというのがSFの世界であったのは過去の話だ。今は特に前立腺がんでロボットを使った手術は徐々に普及している。健康診断で毎回のように行われる血液検査。ついても、学術論文を生命科学トップのCell関連誌に筆頭著者として掲載。目指す学生の方に向けてお届けします。@biomedicalhacksサイトの記事をもとに加筆した月2回のニュースレターもメールで好評配信中。医学・生命科学の総合メディア。バイオテクノロジー・データサイエンス、研究留学を中心に発信。