使用して神経筋疾患のマウスモデルでの配信をについて説明します。干渉は、転写後の遺伝子サイレンシングによってタンパク質合成を制御することにより遺伝子発現を調節します。利得関数メカニズムによって引き起こされる神経学的疾患の治療の可能性を示しました。標的組織への効率的な配信は、そのアプリケーションを制限されています。ベクトルを使用して、非分裂細胞の情報伝達を容易に過剰発現。持続的かつ広範な発現を誘導し、マウスの神経の表現型の改善で起因しました。分解を誘導することによって調整される主に。記載されているターゲットの領域を補完するものです。家族薬理学的変調には有効な治療選択肢、ますます。毒性が少ないと低い免疫原性とサイズが小さいセルに簡単に配信することができます。通常ある携帯電話ネットワーク内に多くのターゲットしたがって潜在的なターゲットに効果と安全性の懸念を標的組織への効率的な配信を指定のアカウントに入れる必要があります。神経筋疾患は、集録または筋肉と運動ニューロンに影響を与える条件を継承します。骨格筋への薬物の対象と研究、主な課題は、治療ウィンドウ内の広範な分布を達成するためにはどこの新興エリアです。7運動ニューロンは、血液脳関門によって薬へのアクセスを妨げないために主に対象とするより困難。細胞培養とねずみのモデルは、この研究で使用されました。有毒な利得筋と運動ニューロンの両方が影響を受ける関数メカニズムによって引き起こされる神経筋疾患です。リピート拡大によって引き起こされます。10この無秩序のため現在入手可能な病気変更の処置はありません。配信と私たちの病気のマウスモデルの骨格筋の安全かつ効率的なモードを設計します。表現を直接抑える12特定。ウイルス戦略を使いました。血液脳関門を通過し、非分裂細胞、ニューロンを含む長期の遺伝子発現を仲介することが可能です。過剰発現または生体内で提供するためにこの手法を使用できます。動物ケア委員会によって承認されていると。地域と対話するを選択します。シーケンスの最小種の長さを制限します。選ばれたさらなる評価。シーケンスを取得します。シーケンスその、ベクトルします。ベクトルを選択します。プロモーターは、サイレンシングの最小限のリスクで、安定且つ均一な表現を保証するために選ばれました。特定のアプリケーションによって、組織の特定のまたは条件付きのプロモーターを使用できます。準備、浄化、AAV、次の公開プロトコルを滴定しなさい。ベクトルとウイルスの生産によって行われた外部メーカー。この手順には、ターゲット遺伝子と年齢とマウスの体重に合わせて調整が必要があります。ガイドラインを使用すると、ドーズ量の範囲、ボリュームおよび年齢とマウスの体重に基づく管理の最適なルートを決定します。週間投与後と予想されます。次のプロトコルは早い成年期の雄マウスを指します。ガイドラインの下でバイオハザードとして処理する必要があります。ストックを分割します。ソリューションを処理するために使わなければなりません。フリーザーで保存できます。アルコール綿の尾の表面をきれいにします。赤い熱ランプを使用して動物を暖かい、暖かい水に尾を浸漬します。注射の前に針が正しく挿入されてを確認します。注入時に抵抗が感じられる場合、腫れは皮膚の下が表示されます、手順を停止します。針を除去し、前回の注射部位の上針を再挿入します。可能となる針を軽く吸引して血液を観察すること。ハードの吸引は、尾静脈を折りたたむことができます。射出時に静脈が青白くなる、針が正しく挿入されています。注入が完了した後、針を上げる前に数秒を待ってから。出血の部位を確認します。本の指を使用して適度な圧力を適用します。すべての実験は、一意にコード化されたバイアルによる治療の隠蔽と第三者によって盲目的に実施されました。治療の順序はランダムに。一日の時間は変動を抑える制御必要があります。週古いマウスで実行する必要があります。開始週に一度を評価しました。注入したマウスをもたらします。順化のこの期間中に動物が不可でした。分間のギャップを保ちます。このテストは、筋力と運動機能障害を監視します。パディングのシートを使用して、クッションとして。ラックの中央に配置します。センチ、表面上ラックを上げ、ゆっくりと画面上のグリップを調整する動物を許可するのには、画面を反転します。ラックが完全に反転して、一度タイマーを起動し、落ちる時間を記録します。つの手足とハングアップします。ワイヤーが低すぎる設定されている場合、マウス可能性がありますにハングしません。つのより多くの試行までこの手順を繰り返します。最高のパフォーマンスを登録します。達すると、動物がケージに戻します。マウスを片手で優しく、赤インクを前足と後足は前足をブラシに青インクに適用します。狭い滑走路の床に吸収性シートを配置します。マウスを徒歩または他に端から端まで滑走路の直線で吸収シート上で実行を許可します。つの連続したステップ間の距離を測定します。最初にインクルードしないし、最後の動物のちょうどの開始とその実行を終了いくつかの足跡。ファイルを使用します。フードの下での手順を実行します。ファイルにそれを置きます。麻酔材料とのスキンシップから動物を維持するのにには、物理的な区切りを使用します。この手順の直後に瓶の中の動物を配置します。ベルジャーはプリチャージとイソフルレン動物に低酸素血症の可能性を避けるためにしないでください。削除した直後に、瓶からマウスは頚部転位によって安楽死させます。つの手足を修正します。エタノールの解離のサイトを洗います。頚部転位の鋭いはさみを使用してを実行します。中央線で皮膚の切開を行います。切断または注意ペルトを引き上げて、頭の上に続いて、横断面の皮膚の断裂によるペルトを削除します。地域の肩甲骨の下にはさみで切断することによって頭を削除します。つの方向を続行します。頸髄から鋭いはさみ削除脊椎を使用します。両側に椎体のアーチの間で切断することによって脊椎の横の部分を削除します。全体の椎骨を削除した後に、脊髄をリリースします。収穫された組織を凍結します。ボウルを記入し、液体窒素を入れた容器でボウルの下四分の一が水没します。鉗子で骨格筋を配置します。保存し組織をすぐに転送します。ブロックで組織を埋め込みます。定量、1収穫された組織内クリオバイアル置き、液体窒素で凍結します。週齢マウスに尾静脈注射によって注入されました。よる神経筋疾患の徴候を開発します。週間で収穫されました。治療とその後の分析の管理は、盲目の調査官によって行われました。週間でモックに無作為に割り付けされました。週齢まで、毎週の体重と行動評価によって続いた。研究デザインのスケマティック。マウスを注入しました。尻尾無駄注射によって注入されました。異なる時点でのコホートから集められました。週まで毎週行われました。この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください。