Abstract変異型アミロイド前駆体タンパク(swAPP)とタグタンパクのFLAGを組換えたAAVを作製した。当初、血清型はAAV-2を予定していたが、神経系全体への親和性の良いAAV-1への変更を行った。E1B)が導入されたHEK293細胞(ヒト胎児腎由来)へトランスフェクトし、swAPP+FLAG+AAV-1が完成した。swAPP+FLAG+AAV-1を乳のみマウス10匹、PBSを10匹に接種して、3ヶ月後に解剖した。各群5例を組織学的検索用としパラフィン切片を作製、5匹をタンパク質の検出用とし、可溶性分画と不溶性分画とに分けて抽出した。パラフィン切片を用いて、抗APP抗体、抗swAPP抗体および抗アミロイドβタンパク(Aβ)抗体の免疫染色を行ったが両軍の間に差は無かった。swAPP+FLAG+AAV-1が接種された群に抗FLAG抗体の陽性像は見られなかった。免疫染色と同じ各抗体を用いたウェスタンブロットでも両群の間には差が見られず、swAPP+FLAG+AAV-1接種群に抗FLAG抗体の陽性像が確認できなかった。Aβの分子種、Aβ40およびAβ42に対するELISAを行ったが、両群の間には差が無かった。接種法や評価法を含めて、再検討しているところである。delayed.Reason現在までに、swAPP+FLAG+AAV-1のマウス脳への導入が確認できている必要があるが、まだ達成できていない。vitroで確認してなかったこと、マウス脳においては接種の方法が不適切だったことが理由と考えられた。Activity上記を解決するため、培養細胞であるHEKを用い、swAPP+FLAG+AAV-1導入の確認と導入効率のチェックを行う。その上でマウス脳への接種を行うが、使用するマイクロシリンジの改良、乳のみマウスに加え、成齢マウスへステレオタキシックな方法でswAPP+FLAG+AAV-1を接種する。Compound-B(PIB)を用いたアミロイド・イメージングのプレ撮像を行った後、早急にサルへの導入の試験を行う予定である。